微小RNA-21-5p、性激素結合球蛋白對多囊卵巢綜合征患者促性腺激素釋放激素受體激動劑長方案助孕結局預測價值分析

黃 琦， 葉明珠， 杜 瑜， 崔彬彬， 劉秀鳳

廈門大學附屬中山醫院1.婦產科；2.藥學部，福建 廈門 361004；3.廈門安寶醫院 生殖科，福建 廈門 361004

多囊卵巢綜合征是育齡期女性常見的內分泌疾病，也是造成女性不孕的重要原因，隨著社會環境變化及生活壓力增大，多囊卵巢綜合征患者不斷增加[1]。有研究表明，對于促排卵治療6個月無效者，可采用促性腺激素釋放激素受體激動劑(gonadotropin-releasing hormone analogue-a，GnRH-a)長方案治療[2]。微小RNA(microRNA，miRNA)是一類非編碼小分子RNA，能夠在轉錄后調節多種基因的表達，進而實現對卵巢功能、子宮內膜容受性的調控[3]。性激素結合球蛋白(sex hormone binding globulin，SHBG)能夠與游離狀態的雄激素結合運輸，阻止雄激素發揮生物活性，因此，SHBG水平與多囊卵巢綜合征密切相關[4-5]。本研究旨在探討微小RNA-21-5p(microRNA-21-5p，miR-21-5p)、SHBG對多囊卵巢綜合征患者GnRH-a長方案助孕結局的預測價值。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取廈門大學附屬中山醫院自2019年3月至2021年3月收治的120例行GnRH-a長方案的多囊卵巢綜合征患者為研究對象。納入標準：符合《多囊卵巢綜合征的診斷和治療專家共識》[6]中多囊卵巢綜合征診斷標準；未避孕性生活1年以上不孕者；女方輸卵管造影及超聲證實至少1側輸卵管通暢；無GnRH-a長方案禁忌證。排除標準：合并其他嚴重內分泌疾病者；具有重度子宮內膜異位癥、子宮畸形以及宮腔重度粘連者；合并其他嚴重系統性疾病者。根據臨床是否妊娠將其分為臨床未妊娠組與臨床妊娠組，每組各60例。臨床未妊娠組：年齡22～32歲，平均年齡(27.85±5.22)歲；不孕時間1～6年，平均(3.50±2.34)年。臨床妊娠組：年齡23～33歲，平均年齡(27.74±5.31)歲；不孕時間2～5年，平均(3.57±2.28)年。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準。所有患者均簽署知情同意書。

1.2 研究方法 所有患者均實施GnRH-a長方案。自患者自發/人工月經前1個周期的黃體期(第21天)，每日注射0.1 mg達必佳(輝凌制藥有限公司，生產批號H20090256)。自患者自發/人工月經周期的第2～3天，進行促排卵，按照患者雌激素水平和卵巢反應調整促性腺激素(gonadotropins，Gn)劑量，并在至少3個優勢卵泡直徑>18 mm時扳機，誘導卵母細胞成熟，在扳機后(36.0±0.5)h，超聲引導下穿刺取卵。

1.3 觀察指標 記錄并比較兩組患者的miR-21-5p及SHBG水平、Gn啟動量、卵裂數、囊胚數、竇卵泡數、Gn總天數、Gn總量及獲卵數。

2 結果

2.1 兩組患者血清miR-21-5p、SHBG水平及助孕結局比較 臨床未妊娠組患者的miR-21-5p水平、Gn啟動量、卵裂數以及囊胚數均高于臨床妊娠組，SHBG水平、竇卵泡數、Gn總天數以及Gn總量均低于臨床妊娠組，差異均有統計學意義(P<0.05)。兩組患者獲卵數比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組患者血清miR-21-5p、SHBG水平及助孕結局比較

2.2 影響助孕結局的多因素Logistic回歸分析 miR-21-5p、SHBG、竇卵泡數、Gn啟動量、Gn總天數、Gn總量、獲卵數、卵裂數、囊胚數均為影響多囊卵巢綜合征患者助孕結局的危險因素(P<0.05)。見表2。

表2 多因素Logistic回歸分析

2.3 miR-21-5p聯合SHBG預測多囊卵巢綜合征患者助孕結局效能分析 miR-21-5p、SHBG單獨預測多囊卵巢綜合征患者的AUC低于兩項聯合(P<0.05)。miR-21-5p聯合SHBG檢測的靈敏度高于miR-21-5p、SHBG單一檢測，特異度低于miR-21-5p、SHBG單一檢測(P<0.05)。見表3、圖1。

表3 miR-21-5p聯合SHBG預測助孕結局效能分析

3 討論

多囊卵巢綜合征是由內分泌系統引起的婦科疾病，一般發生在青春期和孕齡期，是導致月經紊亂、子宮內膜癌和不孕癥發生的重要原因[7-8]。不孕癥是指1～2年未采取避孕措施卻未受孕或未生育者，其發病率逐年上升[9-10]。有研究報道，不孕患者引發抑郁、焦慮的概率比正常人群高2～3倍，嚴重影響患者生活質量[11-13]。有研究發現，多囊卵巢綜合征發病過程中顆粒細胞的過度凋亡會使卵泡發育停滯在次級卵泡階段，進而出現卵巢多囊改變[14-15]。miRNA為顆粒細胞增殖及凋亡重要的上游調控分子，過表達miR-21-5p對卵巢顆粒細胞的增殖具有促進作用，但miR-21-5p在多囊卵巢綜合征患者中的作用及其與妊娠結局的相關性尚不清楚[16]。

本研究結果顯示，臨床未妊娠組miR-21-5p水平高于臨床妊娠組，差異有統計學差異(P<0.05)。這表明，miR-21-5p可作為行GnRH-a長方案的多囊卵巢綜合征患者助孕結局的早期診斷輔助標志物。多囊卵巢綜合征病因尚不清楚，高雄激素血癥和(或)高雄激素臨床表現為其顯著特征[17-18]。有研究發現，多囊卵巢綜合征患者體內雄激素在外周脂肪細胞作用下轉化為雌酮，雌酮和多個小卵泡分泌的雌二醇作用于下丘腦和垂體，影響了正負反饋機制，促黃體生成素(luteinizing hormone，LH)持續高水平，造成內分泌紊亂[19-21]。SHBG能特異性結合轉運性激素，雄激素與SHBG結合得到保護，避免了血管吸附、生物和化學破壞以及快速降解[22-23]。本研究結果顯示，臨床未妊娠組SHBG水平低于臨床妊娠組，差異有統計學差異(P<0.05)。這提示，SHBG低表達可能影響行GnRH-a長方案后多囊卵巢綜合征患者助孕的成敗。多因素Logistic回歸分析發現，miR-21-5p、SHBG、竇卵泡數、Gn啟動量、Gn總天數、Gn總量、獲卵數、卵裂數、囊胚數均為影響多囊卵巢綜合征患者助孕結局的危險因素；miR-21-5p聯合SHBG檢測的靈敏度高于miR-21-5p、SHBG單一檢測。以上結果表明，兩項聯合檢測在多囊卵巢綜合征的診斷中應用價值更高，能有效提高診斷的靈敏度，對多囊卵巢綜合征患者的治療監測及預后判斷具有重要指導價值。

綜上所述，多囊卵巢綜合征患者行GnRH-a長方案治療后，SHBG水平越高，miR-21-5p水平越低，臨床助孕結局越好，miR-21-5p聯合SHBG能顯著提高助孕結局預測的準確性，為臨床助孕結局的預測提供了新方法。