香連外洗液對氟康唑抗耐藥白念珠菌增效作用的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究*

王 平 范瑞強 柏彩英

近年來，隨著廣譜抗生素、激素等在臨床的廣泛使用，侵入性檢查和治療手段的廣泛開展，由白念珠菌導(dǎo)致的真菌感染性疾病不斷出現(xiàn)。究其原因，白念菌株對唑類藥物如氟康唑(Fluconazole，F(xiàn)CZ)可穩(wěn)定遺傳的耐藥性是這一治療瓶頸的主要原因。從天然化合物中發(fā)現(xiàn)可以增強現(xiàn)有抗真菌藥物敏感性的藥物應(yīng)用于臨床，是解決這一困境的可行之路。實驗研究和臨床實踐都證實[1-3]，由廣東省中醫(yī)院范瑞強教授的經(jīng)驗方制成的香連外洗液具有抗菌、增效作用。

本研究就香連外洗液對氟康唑抗耐藥菌株的增效作用進行研究，并采用轉(zhuǎn)錄組測序的方法，對差異基因進行分析，為進一步研究香連外洗液對氟康唑抗耐藥菌株的增效機制打下基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 藥物氟康唑原藥粉末：購自華邁科生物科技有限公司，有效期2022年12月，純度99%。香連外洗液：含生藥濃度100%，120 ml/瓶，批號190921，批準文號：粵藥制字Z20071446，原液濃度為1000 mg/ml，有效期至2020年9月18日

1.2 菌株克柔念珠菌ATCC6258、白念珠菌ATCC10231 (由廣東省中醫(yī)院贈送)。其中，ATCC6258為質(zhì)控菌株。

1.3 培養(yǎng)基96孔板、SDA平板(均購自廣東省廣州市威佳科技有限公司)、RPM1640培養(yǎng)基(購自廣東省江門市凱琳貿(mào)易有限公司)。

1.4 儀器天根多酚試劑盒(TIANGEN公司)、Touch q-PCR System CFX96(BIO-RAD公司)、Novaseq 6000測序平臺(Illumina公司)等。

2 方法

2.1 質(zhì)量控制以克柔念珠菌ATCC6258為質(zhì)量控制菌株按照美國臨床和實驗室標準協(xié)會(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)的M27-A3方案，進行MIC值的判定。

2.2 氟康唑 香連外洗液對白念珠菌ATCC10231MIC值的測定采用微量液基稀釋法測定單一使用香連外洗液或氟康唑時，對白念珠菌ATCC10231的MIC。……