熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA與ELISA檢測(cè)HBsAg對(duì)乙型肝炎診斷價(jià)值比較

李娟娟 馬瑞霞 沙吾庫(kù)·瑪拉提別克

【摘要】目的：對(duì)比分析熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測(cè)乙型肝炎病毒-脫氧核糖核酸（HBV-DNA）、 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）檢測(cè)乙肝表面抗原（HBsAg）應(yīng)用于臨床診斷乙肝的具體價(jià)值。方法：以我院2019年10月—2021年12月期間收治的100例疑似乙肝患者作為本次研究對(duì)象，指定同一名實(shí)驗(yàn)室醫(yī)師（具備高年資、高職稱(chēng)）對(duì)其實(shí)施熒光定量PCR檢測(cè)HBVDNA與ELISA檢測(cè)HBsAg。記錄并對(duì)比100例疑似乙肝患者HBV-DNA、HBsAg檢測(cè)陽(yáng)性情況，計(jì)算HBV-DNA、HBsAg對(duì)乙肝診斷敏感性及特異性。結(jié)果：100例疑似乙肝患者經(jīng)HBV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性率為49.00%，經(jīng)HBsAg檢測(cè)陽(yáng)性率為57.00%，數(shù)據(jù)對(duì)比差異不大（P>0.05）；進(jìn)一步分析可知100例疑似乙肝患者最終確診乙肝病情52例（52.00%），HBV-DNA檢測(cè)對(duì)乙肝診斷敏感性為92.31%、特異性為97.92%，HBsAg檢測(cè)對(duì)乙肝診斷敏感性為90.38%、特異性為79.17%。結(jié)論：應(yīng)用HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果輔助診斷乙肝病情敏感性及特異性均較優(yōu)。

【關(guān)鍵詞】乙型肝炎；HBV-DNA；HBsAg；診斷價(jià)值

Comparison of HBV-DNA detection by fluorescence quantitative PCR and HBsAg detection by ELISA in the diagnosis of hepatitis B

LI Juanjuan， MA Ruixia， Shawuku·Malatibieke

Yili State Friendship Hospital， Yili， Xinjiang 835000， China

【Abstract】Objective： To compare and analyze the specific value of the detection of hepatitis B virus-deoxyribonucleic acid （HBV-DNA） by fluorescence quantitative polymerase chain reaction （PCR） and the detection of hepatitis B surface antigen （HBsAg） by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） in clinical diagnosis of hepatitis B. Methods： 100 suspected hepatitis B patients admitted to our hospital from October 2019 to December 2021 were selected as the research subjects， and the same laboratory physician （with high seniority and professional title） was assigned to detect HBV-DNA by fluorescence quantitative PCR and HBsAg by ELISA.The positive rate of HBV-DNA and HBsAg in 100 suspected hepatitis B patients was recorded and compared， and the sensitivity and specificity of HBV-DNA and HBsAg for the diagnosis of hepatitis B were calculated. Results： The positive rate of HBV-DNA detection in 100 suspected hepatitis B patients was 49.00%， and the positive rate of HBsAg detection was 57.00%，there was little difference in data comparison（P>0.05）；Further analysis showed that 52 cases of 100 suspected hepatitis B patients were finally diagnosed with hepatitis B disease （52.00%），the sensitivity of HBV-DNA detection to hepatitis B was 92.31%，the specificity was 97.92% ， and the sensitivity of HBsAg detection to hepatitis B was 90.38%，the specificity was 79.17%. Conclusion：The sensitivity and specificity of HBV-DNA detection in auxiliary diagnosis of hepatitis B are excellent.

【Key Words】Hepatitis B； HBV-DNA； HBsAg； Diagnostic value

乙型肝炎（下文簡(jiǎn)稱(chēng)乙肝）是臨床發(fā)病率較高的傳染性疾病之一，發(fā)病原因?yàn)橐倚透窝撞《荆╤epatitis B virus，HBV）感染，發(fā)病后勢(shì)必對(duì)患者生活質(zhì)量及身心健康造成嚴(yán)重影響。早診斷、早治療是現(xiàn)階段臨床處理乙肝患者的主要原則，但醫(yī)學(xué)工作者對(duì)此病輔助診斷方法并未達(dá)成共識(shí)[1]。基于此，本文將以我院2019年10月—2021年12月期間收治的100例疑似乙肝患者作為本次研究對(duì)象，對(duì)比分析熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）檢測(cè)HBV-脫氧核糖核酸（DeoxyriboNucleic Acid，DNA）、 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）檢測(cè)乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）應(yīng)用于臨床診斷乙肝的具體價(jià)值，以利于為今后臨床醫(yī)生接診疑似乙肝病例后合理取舍輔助診斷方法提供可靠參考依據(jù)，現(xiàn)詳述如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

100例疑似乙肝患者中男58例，女42例，年齡19～76歲，平均年齡（48.92±0.27）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①因乏力、黃疸、惡心、肝區(qū)疼痛等乙肝相關(guān)癥狀前來(lái)就診，需接受進(jìn)一步檢查輔助確診病情；②對(duì)本次研究中涉及的熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA、ELISA檢測(cè)HBsAg等方法具有良好耐受性；③意識(shí)清醒，臨床病歷資料完整；④遵循自愿、獨(dú)立、記名等原則簽署知情同意協(xié)議（簽署時(shí)間為入組前，該協(xié)議由本院醫(yī)學(xué)與倫理研究會(huì)擬定）。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他肝臟疾病；②合并其他感染性疾病；③合并惡性腫瘤疾病；④合并精神系統(tǒng)疾病；⑤處于妊娠期、產(chǎn)褥期等特殊生理時(shí)期女性；⑥意識(shí)不清；⑦病歷資料不全；⑧拒絕簽署知情同意協(xié)議。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)方法 100例疑似乙肝患者均接受熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA與ELISA檢測(cè)HBsAg，指定同一名實(shí)驗(yàn)室醫(yī)師（具備高年資、高職稱(chēng)）完成相關(guān)操作。具體如下：（1）儀器設(shè)備：安徽中科中佳HC-3018R高速冷凍離心機(jī)、杭州博日LineGene-9600Plus熒光定量PCR分析儀、上海科華乙型肝炎病毒核酸定量檢測(cè)試劑、帝肯洗板機(jī)、帝肯酶標(biāo)儀、帝肯全自動(dòng)酶免儀、英科新創(chuàng)酶聯(lián)免疫試劑等；（2）HBV-DNA：于清晨抽取待檢者空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血液作為檢測(cè)樣本，血樣在-20℃條件下保存待用，檢測(cè)方法為熒光定量PCR，嚴(yán)格按照儀器及試劑相關(guān)說(shuō)明書(shū)要求操作；（3）HBsAg：血樣獲取條件同HBVDNA，將4mL靜脈血樣分離血清后保存在4℃條件下待用，檢測(cè)方法為ELISA，嚴(yán)格按照儀器及試劑相關(guān)說(shuō)明書(shū)要求操作。

1.2.2 觀察指標(biāo) （1）陽(yáng)性率：記錄并對(duì)比100例疑似乙肝患者HBV-DNA、HBsAg檢測(cè)陽(yáng)性情況；（2）敏感性及特異性：以100例疑似乙肝患者隨訪確診結(jié)果為依據(jù)，計(jì)算HBV-DNA、HBsAg對(duì)乙肝診斷敏感性及特異性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料采用（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（χ±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 陽(yáng)性率

100例疑似乙肝患者均順利完成HBV-DNA、HBsAg檢測(cè)，經(jīng)分析可知HBV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性率為49.00%、HBsAg檢測(cè)陽(yáng)性率為57.00%，數(shù)據(jù)對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），如表1。

2.2 敏感性及特異性

進(jìn)一步分析100例疑似乙肝患者臨床資料可知，其最終確診乙肝52例（52.00%），計(jì)算認(rèn)為HBVDNA檢測(cè)對(duì)乙肝診斷敏感性為92.31%、特異性為97.92%，HBsAg檢測(cè)對(duì)乙肝診斷敏感性為90.38%、特異性為79.17%，具體如表2、表3。

3 討論

乙肝是現(xiàn)階段嚴(yán)重威脅患者生活質(zhì)量及身心健康的傳染性疾病之一，如何有效提高此病正確檢出率已成為廣大臨床醫(yī)務(wù)工作者、患者本人及家屬等多方人群共同關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題。既往臨床工作中認(rèn)為HBeAg檢測(cè)結(jié)果對(duì)診斷乙肝病情具有重要的指導(dǎo)意義，是一種能夠準(zhǔn)確評(píng)價(jià)機(jī)體免疫耐受因子、病毒復(fù)制的指標(biāo)[2]。但近年來(lái)研究認(rèn)為[3]，部分肝癌患者或其他不明原因肝臟疾病患者機(jī)體內(nèi)可能存在隱匿性HBV感染，若僅依據(jù)HBeAg檢測(cè)結(jié)果則不能夠真實(shí)判斷HBV感染及復(fù)制情況，此外該指標(biāo)無(wú)法及時(shí)、動(dòng)態(tài)評(píng)估HBV傳染危險(xiǎn)性。另有研究認(rèn)為[1]，部分乙肝患者機(jī)體內(nèi)HBsAg檢測(cè)結(jié)果可能呈陰性，分析原因與HBV基因突變、HBV-DNA與肝細(xì)胞染色體整合從而使血清中缺失HBV顆粒等因素有關(guān)[4]。HBV-DNA是HBV遺傳物質(zhì)基因，能夠準(zhǔn)確反映機(jī)體內(nèi)HBV復(fù)制情況[5]。近年來(lái)越來(lái)越多的研究資料指出，HBV-DNA屬于乙肝病毒的核心組成部分，因此檢測(cè)該指標(biāo)對(duì)明確機(jī)體HBV感染情況具有直接性、高靈敏性及特異性等優(yōu)勢(shì)，相較于乙肝病毒核心顆粒中可溶性蛋白質(zhì)HBeAg而言，在乙肝病情活動(dòng)期、非活動(dòng)期等不同時(shí)期均對(duì)臨床疾病診治工作具有指導(dǎo)意義[6]。本文也已通過(guò)回顧性分析100例疑似乙肝患者臨床資料后證實(shí)，HBV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性率為49.00%，經(jīng)HBsAg檢測(cè)陽(yáng)性率為57.00%，但HBVDNA檢測(cè)對(duì)乙肝診斷敏感性、特異性均高于HBsAg檢測(cè)，此結(jié)論與趙棉[7]等人研究結(jié)果相符。

綜上所述，應(yīng)用HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果輔助診斷乙肝病情敏感性及特異性均較優(yōu)，值得在今后實(shí)際工作中參考使用。

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