六種殺菌劑對哈茨木霉菌絲生長影響研究

曹秀榮 董照鋒 任崗 熊瀟垚 鵬 徐艷

摘 ? 要 ? 哈茨木霉極易侵染香菇、平菇、雙孢菇、杏鮑菇、茶樹菇、毛木耳、靈芝等多種食用菌的培養基質、菌種、菌絲和子實體，造成減產甚至絕收。采用菌絲生長速率法分別測定戊唑醇、枯草芽孢桿菌、四霉素、春雷霉素、多抗霉素、多菌靈對哈茨木霉菌絲的抑制作用。結果表明，戊唑醇抑制作用最強，其次是枯草芽孢桿菌、多菌靈和四霉素，春雷霉素和多抗霉素抑制作用相對較弱。故而戊唑醇和枯草芽孢桿菌不能與哈茨木霉混合使用，多菌靈和四霉素不建議與哈茨木霉混合使用，春雷霉素和多抗霉素可與哈茨木霉聯合使用以增強防效。戊唑醇、枯草芽孢桿菌、多菌靈和四霉素對哈茨木霉抑制作用明顯，可就其對木霉病害防治展開進一步研究。

關鍵詞 ? 殺菌劑;哈茨木霉;抑菌率

木霉（Trichoderma spp.） 是廣泛分布于土壤、植物殘體、植物根圍和葉圍、海洋以及空氣等環境中的一類真菌，對多種細菌和病原真菌有拮抗作用，已被作為生防制劑廣泛應用于農業生產。但木霉也因具有適應性強、繁殖速度快、為害期長等特性，極易侵染香菇、平菇、雙孢菇、杏鮑菇、茶樹菇、毛木耳和靈芝等多種食用菌的培養基質、菌種、菌絲和子實體，造成減產甚至絕收，為食用菌生產中的第一大競爭性雜菌。其中，綠色木霉（Trichoderma viride）與哈茨木霉（Trichoderma harzianum）是相對優勢菌種。

我們研究了戊唑醇、枯草芽孢桿菌、四霉素、春雷霉素、多抗霉素、多菌靈6種殺菌劑對哈茨木霉菌絲生長的影響，以期為哈茨木霉作為生防菌應用于農業生產時如何協調與生物防治、化學防治的矛盾，以及其作為食用菌生產中的競爭性雜菌時如何選擇防治藥劑提供 參考。

1 ? 材料與方法

1.1 ? 試驗材料

1）供試藥劑。430 g/L戊唑醇懸浮劑，鹽城利民農化有限公司生產;100億芽孢/g枯草芽孢桿菌粉劑，陜西綠頓作物科技有限公司生產;0.15%四霉素水劑，遼寧微科生物工程股份有限公司生產;2%春雷霉素水劑，績溪農華生物科技有限公司生產;3%多抗霉素水劑，績溪農華生物科技有限公司生產;40%多菌靈懸浮劑，江蘇劍牌農化股份有限公司。以上材料均為市售。

2）供試培養基。馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基（PDA）：無菌水1 000 mL，馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂15 g。

3）供試菌種。供試的哈茨木霉菌株（Trichoderma harzianum），來源于2021年3月3日從商洛盛澤農林科技發展有限公司香菇基地采回的染病香菇菌棒，經實驗室分離鑒定后，接種到PDA試管斜面培養基，于4 ℃條件下保存。

1.2 ? 試驗方法

1）試驗設計。采用菌絲生長速率法，測定6種供試藥劑對哈茨木霉菌絲的抑制作用。試驗設7個處理，每個處理4次重復，各處理濃度依據使用說明推薦用量確定，無菌水作對照。如表1所示。

2）含藥PDA平板制備。將供試藥劑用滅菌水稀釋至設計濃度的10倍，編號后備用。取6 mL稀釋好的藥液注入100 mL經過滅菌處理的燒杯中，再加入經高壓蒸汽滅菌并冷卻至50 ℃左右的PDA培養基54 mL，充分混勻，制成60 mL設計濃度的含藥培養基（為防止培養基過快冷凝而影響試驗進程，每個處理多配制20 mL），然后取10 mL注入經過滅菌處理的9 cm培養皿中，制成試驗設計濃度的PDA平板。以無菌水替代藥液，同上述方法制作空白對照。

3）菌絲接種。將哈茨木霉菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基，在溫度28 ℃、濕度90%條件下培養4天，活化菌種。在一培養皿內菌落生長均勻、旺盛的同一半徑處用打孔器制作直徑6 mm的菌餅，用接種針挑取菌餅正面向下轉接種到各處理PDA平板培養基中心位置，置于溫度28 ℃、濕度90%條件下培養，分別于48小時、72小時、96小時用十字交叉法測量各皿菌落直徑，并按下試計算菌絲生長抑制率：

2 ? 結果與分析

從表2、圖1可知：依據使用說明推薦的田間劑量濃度下，6種殺菌劑對哈茨木霉菌絲96小時抑制率由大到小排序為：戊唑醇>枯草芽孢桿菌>四霉素>多菌靈>春雷霉素>多抗霉素。戊唑醇抑制效果最好，48小時、72小時、96小時抑制率均達到98%以上，呈逐漸增大趨勢;枯草芽孢桿菌抑制率略低于戊唑醇，48小時、72小時、96小時抑制率均達到92%以上，72小時達到最高，72～96小時基本穩定;春雷霉素和多抗霉素48小時、72小時、96小時抑制率均低于20%，96小時抑制率分別為6.3%和4.4%;多菌靈和四霉素抑制率處于中等水平，96小時抑制率分別為58.4%和50.1%。

3 ? 小結與討論

試驗結果表明，在推薦的田間劑量下，春雷霉素和多抗霉素對哈茨木霉菌菌絲生長抑制作用較小，96小時抑制率分別為6.3%、4.4%;四霉素和多菌靈對哈茨木霉菌絲96小時抑制率分別為58.4%、50.1%，抑制作用明顯;戊唑醇和枯草芽孢桿菌對哈茨木霉菌絲有顯著的抑制作用，96小時抑制率分別達到99.4%、94.6%。

由以上結果得出，6種殺菌劑中，能與哈茨木霉配伍，增強防治效果的藥劑為春雷霉素和多抗霉素，不建議與哈茨木霉配伍的藥劑為四霉素和多菌靈，堅決禁止與哈茨木霉配伍的藥劑為戊唑醇和枯草芽孢桿菌。由于戊唑醇和枯草芽孢桿菌對哈茨木霉抑制作用顯著，可在進一步研究其對食用菌菌絲生長影響的基礎上，確定其可否適用于食用菌木霉病害防治。

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