根皮素的生理功能及增溶方法研究進展

夏 琛，劉建華，崔心禹，劉 堯，金 蒙，沈建福,*

（1.浙江大學生物系統工程與食品科學學院，天然產物與人類健康研究中心，浙江 杭州 310058；2.浙江晟泰茶油科技有限公司，浙江 常山 324200）

根皮素（phloretin，Pht）是二氫查耳酮類化合物[1]，分子式為C15H14O5，其結構如圖1所示，主要存在于蘋果、草莓、梨等果蔬中。大量研究表明，Pht具有抗氧化、抗菌、抑制酪氨酸酶、抑制α-葡萄糖苷酶、降血糖、心血管保護和抗腫瘤等生理功能。不僅如此，Pht還是有效的鈉-葡萄糖協同轉運蛋白（sodiumdependent glucose transporters，SGLT）1和2以及葡萄糖轉運蛋白（glucose transporter，GLUT）1和2的抑制劑[2]。根皮苷（phlorizin，Phz）是Pht的葡萄糖苷，其分子式為C21H24O10，結構如圖2所示。雖然Pht和Phz都可用于經皮給藥，其具有抗炎性且對由紫外光誘導的皮膚光損傷有保護作用，但Pht在小腸中的吸收比Phz更有效，并能通過尿液更有效地消除，具有更好的體內藥代動力學[3]。

圖1 根皮素的結構Fig. 1 Structure of phloretin

圖2 根皮苷的結構Fig. 2 Structure of phlorizin

1 根皮素的生理功能研究現狀

Pht具有多方面的生理功能，在醫藥領域中，Pht可以作為天然的降糖、心血管保護和抗癌藥物等。在化妝品領域中，由于Pht能有效改善金黃色葡萄球菌以及痤瘡丙酸桿菌的感染，可用于治療痤瘡并應用于面膜、乳液等護膚品中；Pht可以通過抑制酪氨酸酶阻止黑色素的生成，起到美白的作用，可作為新型天然美白劑應用于化妝品行業；其較強的自由基清除能力、抗氧化能力，可以應用于抗衰老的護膚產品。在食品領域中，Pht已經在GB 2760ü2014《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》中被允許作為香料添加使用，且無明確劑量規定；由于Pht極強的抗氧化性、抑菌性和寬廣的抑菌譜，可將其開發為天然防腐劑；此外，由于其擁有眾多對人體有益的生理功能，且安全無毒，有望開發Pht功能性食品。

1.1 生物活性

1.1.1 抗菌、抗病毒

目前對Pht抑菌活性的研究已有不少報道，如張英[4]研究顯示Pht對金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、鼠傷寒沙門氏菌（SalmonellaTyphimurium）等多種革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均有抑制活性。Wang Guizhen等[5]研究表明Pht不僅可以在體外顯著抑制Sortase B蛋白酶，使菌細胞表面蛋白修飾缺陷，從而抑制細菌生長，防止感染，也可以顯著降低S.aureus對人肺泡上皮細胞的損傷并減少細胞中的S.aureus菌落數，結果表明，Pht可以用作治療S.aureus感染的候選藥物。Cheon等[6]研究發現Pht能改善痤瘡丙酸桿菌感染的皮膚狀況，有抗炎、抗菌等作用。Adil等[7]探究Pht以及與Pht-檸檬醛聯合使用對釀膿鏈球菌（Streptococcus pyogenes）的影響，運用棋盤格法研究了檸檬醛與Pht的體外協同作用，實驗證明Pht和檸檬醛都能有效抑制S.pyogenes，二者協同作用比單獨的抑制作用更強。

Pht還被證實可以顯著降低寨卡病毒（zika virus，ZIKV）的侵染量。ZIKV可以通過伊蚊或性傳播導致皮疹、發燒、頭痛、關節痛、結膜炎等癥狀，若孕婦在懷孕期間感染該病毒，則會導致胎兒小頭畸形和其他先天性畸形[8]。Lin等[9]研究表明Pht通過降低半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）和Caspase-7活性、減少蛋白激酶B/哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（protein kinase B/mammalian target of rapamycin，Akt/mTOR）通路磷酸化來減少病毒侵染量。此外，宿主細胞內可利用的葡萄糖減少也會抑制ZIKV的增殖，該研究為Pht作為抗ZIKV藥物的開發提供有力的理論支持。

1.1.2 抑制酪氨酸酶

酪氨酸酶是一種含銅金屬酶，是控制人體黑色素產生的主要限速酶，在催化黑色素細胞內黑色素的合成過程中起主要作用，而黑色素的過多產生會導致多種皮膚疾病，Pht是酪氨酸酶的可逆混合型抑制劑，可以通過改變酪氨酸酶的二級結構，阻止酪氨酸酶與底物的結合，從而降低其催化活性[10]。Chen Jianmin等[11]研究表明Pht在低濃度時會使酪氨酸酶活性提高，但隨著濃度的上升，對酪氨酸酶的抑制作用增強，半抑制濃度（half-inhibitory concentration，IC50）為169.36 mol/L，Pht的抑制活性雖然低于常見的酪氨酸酶抑制劑曲酸（IC50為83.11 mmol/L），但由于曲酸具有慢性毒性和致癌風險，Pht作為酪氨酸酶抑制劑有更大的應用潛力。

1.1.3 抗氧化

周北斗等[12]采用密度泛函理論（density functional theory，DFT）方法分析得出天然酚類化合物的抗氧化活性與分子結構中酚羥基、分子內氫鍵和自然鍵軌道（natural bond orbital，NBO）電荷數目呈正相關，經過數據分析對比得出Phz的抗氧化活性優于Pht，該分析結果與賀金娜等[13]的研究結果一致。李慧靈等[14]通過比較Pht、三葉苷、柚苷二氫查耳酮、柚苷的抗氧化能力，實驗證明Pht的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除能力以及Fe3＋還原能力都為最佳。孫玥等[15]研究了阿魏酸、Pht和水溶性VE的抗氧化能力，結果發現三者2,2’-聯氮-二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)，ABTS）陽離子自由基清除能力大小依次為Pht＞阿魏酸＞水溶性VE，DPPH自由基清除能力大小依次為水溶性VE＞阿魏酸＞Pht，Fe3＋還原能力大小依次為阿魏酸＞水溶性VE＞Pht，并以歸一值作為整體效應評價指標，采用響應面優化法進行配方優化，確定最優配方為阿魏酸34.9%（質量分數，下同）、Pht 35.1%和水溶性VE 30%。

1.2 生理作用

1.2.1 減輕炎癥

Zielinska等[16]研究證明，Pht可以通過減少前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）、白細胞介素-8（interleukin-8，IL-8）以及晚期糖基化終末產物（advanced glycation end products，AGEs）的形成從而改善腸道炎癥的癥狀。Zhang Zecai等[17]研究證明，Pht可以通過抑制轉錄因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）、toll樣受體4（toll-like receptor 4，TLR4）和過氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferatorsactivated receptors-γ，PPARγ）改善硫酸葡聚糖鈉（dextransulfatesodium，DSS）誘導的潰瘍性結腸炎小鼠的結腸病理損傷，并且減少結腸中的促炎細胞因子數量、降低血清脂多糖水平以及改善大腸桿菌以及乳酸菌的比例，結果表明，Pht可以通過飲食治療潰瘍性結腸炎。Chauhan等[18]研究證明Pht可以下調TLR4信號通路以及抑制一氧化氮和細胞因子的產生，防止巨噬細胞因大腸桿菌感染而引發炎癥。

1.2.2 抑制癌癥

Wu等[19]研究表明Pht可通過抑制GLUTs從而抑制乳腺癌細胞MDA-MB-231生長，其在BAKB/c裸鼠乳腺癌模型中也證明其能夠抑制癌癥增長。Pht可以通過調節細胞中Zerste基因增強子同源物2（enhancer of zeste homolog 2，EZH2）表達，抑制Akt信號通路，抑制NCI-H1373人肺腺癌細胞增殖并誘導凋亡[20]。Pht對人舌癌Tca8113細胞的體外增殖有明顯抑制作用并促進其凋亡，其機制可能與上調B淋巴細胞瘤-2相關蛋白X（B-cell lymphoma-2 associated X，Bax）、細胞色素c（cytochrome c，Cyt c）和Caspase-3的表達，下調B淋巴細胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）的表達有關[21]。Saraswati等[22]研究表明Pht通過靶向SHP-1/STAT3信號通路，抑制血管生成和細胞增殖并誘導細胞凋亡，在體外有效地抑制了肝癌細胞HepG2、SK-Hep1、Hep3B2.1-7、Huh-7以及PLC-5增殖。Hsiao等[23]研究證明Pht可以抑制人子宮金鱗癌細胞的轉移和血管生成能力以及癌細胞干性，此外，Pht還被證實通過增加活性氧數量來抑制前列腺癌細胞的增殖和遷移[24]，綜上，Pht是一種有應用前景的抗癌治療藥物。

1.2.3 預防或緩解糖尿病及其并發癥

申潔等[25]比較了蘋果葉提取物及主要化合物對α-葡萄糖苷酶的抑制活性，其中Pht的IC50為（0.325f0.015）mg/mL，其抑制活性優于Phz（IC50＝（4.884f0.591）mg/mL）以及醫用降糖藥物阿卡波糖（IC50＝（1.377f0.050）mg/mL），說明Pht可以作為一種α-葡萄糖苷酶抑制劑，通過延緩腸道內碳水化合物的水解和吸收有效控制餐后血糖。Shen Xin等[26]研究表明Pht和二甲雙胍聯合治療鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ）誘導的糖尿病大鼠不僅可以改善二型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）大鼠的空腹血糖水平、糖耐量和胰島素敏感性，還可以減少脂肪堆積，改善肝臟、胰腺中的病理變化。綜上可知，Pht是一種可與二甲雙胍聯合治療T2DM的潛在物質。Kumar等[27]研究證明，Pht和Phz可以通過抑制細胞周期素依賴蛋白激酶5（cyclin-dependent kinase 5，CDK5）活性從而抑制PPARγ Ser273位點磷酸化，來提高胰島素敏感性并促進葡萄糖的攝取。近年來SGLT2抑制劑成為了一種新型的降血糖藥物，它可以通過抑制腎小管葡萄糖重吸收來降低血糖，這可能也是Pht降血糖的主要途徑[28]。

除了降血糖，Pht還可以治療糖尿病患者常見的并發癥，如糖尿病神經病變（diabetic neuropathy，DN）。Balaha等[2]研究證明度洛西汀和Pht能改善STZ誘導的糖尿病模型大鼠坐骨神經組織抗氧化狀態，抑制組織炎性細胞因子并消除組織病理改變，其中Pht的作用效果更佳，并且Pht可以改善度洛西汀所引起的糖尿病代謝紊亂以及肝功能障礙。因此，Pht可以單獨或聯合度洛西汀使用來治療DN。Zhou Qian等[29]研究證明Pht能與甲基乙二醛（methylglyoxal，MGO）結合，通過晚期糖基化終末產物受體（receptor of advanced glycation end products，RAGE）/p38絲裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase，p38 MAPK）/NF-κB信號通路抑制AGEs的合成，從而預防或緩解糖尿病并發癥。

1.2.4 保護心血管

針對糖尿病患者的大型心血管實驗，恩格列凈心血管預后試驗（Empa-reg Outcome）[30]、卡格列凈心血管評估研究（CANVAS）[31]和達格列凈心血管評估研究（Declare-timi 58）[32]結果顯示，SGLT2抑制劑恩格列凈、卡格列凈以及達格列凈可以降低主要不良心血管事件（major adverse cardiovascular events，MACE）的風險，改善心血管和腎臟狀態，該結果同樣適用于非糖尿病患者，因此Pht可能也是一種潛在的心血管保護藥物。Xia Yong等[3]通過實驗證明低劑量的Pht對STZ誘導的糖尿病Apoe－/－小鼠有一定的動脈粥樣硬化保護作用，為Pht作為日常飲食改善糖尿病患者的動脈粥樣硬化提供依據。Ying Yin等[33]研究證明，Pht對高糖誘導的糖尿病心肌病損傷具有保護作用，Pht不僅可以通過上調沉默調節蛋白1（sirtuin1，SIRT1）表達來減輕心肌細胞H9C2的損傷，還改善了糖尿病小鼠的心臟生化指標，減緩心肌纖維化。

1.2.5 肝臟以及腎臟保護

高尿酸血癥（hyperuricemia，HUA）是腎臟疾病的重要危險因素，會導致腎臟纖維化。Cui Danli等[34]研究證明Pht可以降低HUA小鼠的尿素氮、尿蛋白以及肌酐含量，通過抑制NOD樣受體熱蛋白結構域相關蛋白3（NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3，NLPR3）炎癥小體以及尿酸（uric acid，UA）的重吸收來有效減輕UA引起的腎損傷。胡義陽等[35]研究發現用Pht治療的MRL/Lpr小鼠腎臟損傷明顯減輕，顯著降低IL-1β和腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α，對狼蒼性腎炎有保護作用。左愛仁等[36]以槲皮素為陽性對照，探究了在對乙酰氨基苯酚誘導小鼠急性肝損傷的模型中，Pht對小鼠急性肝損傷的保護作用，實驗結果證明，Pht灌胃后的小鼠血清中谷丙轉氨酶（glutamic-pyruvic transaminase，GPT）、谷草轉氨酶（glutamic-oxaloacetic transaminase，GOT）、γ-谷氨酰轉肽酶（γ-glutamyl transpeptidase，γ-GT）、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）和總膽紅素（total bilirubin，TB）均明顯降低，而且通過小鼠肝組織病理學觀察發現肝組織病理學病變也得到了明顯改善。

1.2.6 其他

除了以上生理功能外，張曉寒等[37]研究了Pht對秀麗隱桿線蟲壽命的影響，結果表明，Pht可以顯著延長線蟲的壽命，當Pht質量濃度為75 μg/mL時，線蟲平均壽命延長21.52%。此外，張曉寒等[38]研究了Pht對雌性果蠅壽命的影響，發現Pht可以通過提高機體抗應激能力，維持腸道穩態，延長雌性果蠅壽命，當Pht的濃度為4.6 mmol/L時，雌性果蠅平均壽命延長了23.98%。Pht還可以改善AD模型大鼠在巴恩斯迷宮測試中的記憶能力[39]、改善MPTP誘導的帕金森小鼠[40]。Xu Xiaojiao等[41]研究證明Pht可以通過刺激下丘腦攝食中樞以及抑制膽囊收縮素（cholecystokinin，CCK）以增加胃排空來增加小鼠的進食量。Takeno等[42]研究證明Pht通過抑制磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）/Akt通路來抑制由骨形態發生蛋白-2（bone morphogenetic protein-2，BMP-2）誘導的成骨發生和礦化。

2 Pht應用過程中存在的問題及解決辦法

Pht具有廣泛的生理功能，在食品、化妝品、保健品、藥品等領域都有很好的市場前景，但是Pht在這些領域的應用卻常常受到限制，存在以下問題：1）Pht的分子結構使其分子間存在強烈的氫鍵作用，從而導致其水溶性較差（室溫條件下，在水中的溶解度僅為（21.34f0.67）μg/mL）[43]，一般認為當物質溶解度低于100 μg/mL時，不能有效發揮其生物活性[44]；2）Pht的生物利用度較低，一般難溶性藥物的口服生物利用度也較低。這些問題使得Pht的應用受到限制，因此，想要拓寬Pht的應用領域迫切需要提高其溶解度。目前國內外針對Pht增溶的手段不多，主要包括化學修飾法和物理修飾法。

2.1 化學修飾法

研究者以Pht為原料，對Pht A、B環的酚羥基以及酮羰基進行化學修飾，以獲得利用價值更高的Pht衍生物，如Pht糖苷類衍生物、Pht席夫堿類衍生物等。雖然Pht經化學修飾后抗氧化或抑制酪氨酸酶等活性提高，但其作用機制、對其他生物活性的影響以及安全性仍需進一步研究，光照穩定性等問題也仍需解決，因此Pht的化學衍生物在實際中應用仍需更多研究的支持。

2.1.1 糖苷化

Pht在根皮苷-2-O-糖基轉移酶（phlorizin 2-O-glycosyltransferase，P2-GT）及二磷酸尿苷葡糖（uridine diphosphate glucose，UDP-glucose）的作用下生成Phz，其合成路線如圖3所示[45]。相較于Pht，Phz的抗氧化能力增強，但是Phz口服吸收率低，而且在小腸中易受Phz水解酶的影響分解生成葡萄糖，在胃腸道內不穩定。且有研究表明，Phz也是SGLT1和SGLT2的抑制劑，但對二者的選擇性不高[46]，而腎對葡萄糖重吸收的90%都是通過SGLT2轉運蛋白轉運，這使得Phz無明顯降血糖作用。

圖3 根皮苷的合成路線[45]Fig. 3 Synthesis of Phz[45]

因此，為了提高化學穩定性及其對SGLT2的抑制作用，研究者不斷對Pht及其糖苷類衍生物進行化學修飾，最終合成了穩定性好、對SGLT2選擇性高的Pht衍生物，并作為治療T2DM的治療藥物，如恩格列凈（圖4）、達格列凈（圖5）等。

圖4 恩格列凈的結構Fig. 4 Structure of empagliflozin

圖5 達格列凈的結構Fig. 5 Structure of dapagliflozin

2.1.2 醚化

Wei Lina等[43]通過引入親水基團胺乙基生成Pht胺乙基醚（合成路線如圖6所示），其水溶性相較于Pht提高430 倍，且具有較好的抑菌能力，30 d的經口亞急性毒性實驗結果表明，其屬于實際無毒物，適合開發為一種新型食品防腐劑或保鮮劑[46]。

圖6 根皮素胺乙基醚的合成路線[43]Fig. 6 Synthesis of aminoethyl-Pht[43]

Wang Li等[47]對Pht進行烷基醚化修飾，合成路線如圖7所示，合成的Pht烷基醚可以抑制人肺癌細胞SPC-A1、人乳腺癌細胞MDA-MB-231、人食道癌細胞EC10等多種癌細胞的增殖，且在MDA-MB-231細胞中的抑制作用強于抗腫瘤藥物多西他賽，因此該衍生物作為新型抗癌藥物有很廣闊的發展前景。

圖7 根皮素烷基醚的合成路線[47]Fig. 7 Synthesis of Pht alkyl ethers[47]

2.1.3 酯化

李翠萍等[48]以阿魏酸（ferulic acid，FA）和Pht等為原料，通過引入阿魏酸來提高修飾物的藥效作用（合成路線如圖8所示），并合成了3種根皮素乙酰阿魏酸酯Pht-A、Pht-B及Pht-C，同時測定其抗氧化能力，其中DPPH自由基清除能力依次為FA＞Pht-B＞Pht-C＞Pht＞Pht-A。

圖8 3種根皮素乙酰阿魏酸酯的合成路線[48]Fig. 8 Synthesis of three Pht acetylferulic acid esters[48]

2.1.4 席夫堿化

酰腙類衍生物、縮氨基硫脲類衍生物及氨基酸型席夫堿等物質因具有抗氧化、殺菌、抗炎癥、抗腫瘤等生理功能，在醫學、化學、農學等領域應用廣泛。

左愛仁[49]以Pht和異煙肼為原材料，合成根皮素異煙酰基腙（合成路線如圖9所示），并比較了其與Pht、槲皮素的DPPH自由基清除能力、ABTS陽離子自由基清除能力以及脂質過氧化活性，結果表明，活性由強到弱依次為根皮素異煙酰基腙＞槲皮素＞Pht，但是異煙酰基腙衍生物對酪氨酸酶的活力顯著低于Pht（P＜0.05）。

圖9 根皮素異煙酰基腙的合成路線[49]Fig. 9 Synthesis of Pht isonicotinyl hydrazones[49]

杜鵬[50]以酰肼和Pht為原料生成根皮素酰腙衍生物（合成路線如圖10所示），生成的3種酰腙的DPPH自由基、ABTS陽離子自由基清除能力顯著大于Pht，通過研究三者與Pht對酪氨酸酶抑制能力發現，與Pht一樣，其酰腙衍生物均是酪氨酸酶的混合型可逆抑制劑，其中酰腙2及3對酪氨酸酶的抑制活性強于Pht。

圖10 根皮素酰腙衍生物的合成路線[50]Fig. 10 Synthesis of Pht acyl hydrazones[50]

許賓賓[51]以氨基硫脲分子取代了Pht的羰基氧原子，生成縮胺基硫脲席夫堿（合成路線如圖11），明顯改善了水溶性，并表現出更強的抗氧化性以及酪氨酸酶抑制活性。

圖11 3種根皮素縮胺基硫脲席夫堿的合成路線[51]Fig. 11 Synthesis of three Pht thiosemicarbazone Schiff bases[51]

萬平紅等[52]以Pht為母體，通過半合成法引入蛋氨酸殘基（合成路線如圖12所示）從而提高Pht的水溶性、抗氧化活性。生成的根皮素蛋氨酸席夫堿安全無毒（半致死量高于5 000 mg）并且可以抑制巴氏殺菌奶中微生物的增殖，有望開發為一種新型的食品添加劑。雖然其在不同pH值介質中的穩定性有所提高，但光照穩定性仍需改善。

圖12 根皮素蛋氨酸席夫堿的合成路線[52]Fig. 12 Synthesis of Pht methionine Schiff bases[52]

2.1.5 乙酰化

彌樂[53]通過Pht與乙酸酐加熱回流合成乙酰化根皮素（合成路線如圖13所示），經藥物代謝動力學研究發現Pht乙酰化后在體內分布更均衡，在器官中的作用時間更長，對心臟的靶向性增強，生物利用度提高。

圖13 乙酰化根皮素的合成路線[53]Fig. 13 Synthesis of 2’,4’,6’,4-tetra-acetyl-Pht[53]

2.1.6 成鹽反應

Shin等[54]用硫酸（質量分數98%）對Pht磺化生成Pht-3’,3-二磺酸鹽（合成路線如圖14所示），研究表明該衍生物可以減少環丁烷嘧啶二聚體（cyclobutane pyrimidine dimers，CPDs）的形成、谷胱甘肽（glutathione，GSH）的消耗以及由紫外線B（ultraviolet B，UVB）誘導的細胞凋亡，并且對IL-6及PGE2的釋放具有抑制作用，其光保護作用與核苷酸切除修復基因的表達上調密切相關，該研究為該衍生物在護膚尤其是皮膚光保護方面的應用提供理論依據。

圖14 根皮素-3’,3-二磺酸鹽的合成路線[54]Fig. 14 Synthesis of phloretin 3’,3-disulfonate[54]

2.2 物理修飾

近年來，很多研究者采用環糊精及其衍生物包合、固體分散系、納米載藥體系及膠束系對Pht進行了增溶，但是使用的增溶材料可能會限制其可應用的領域，因此，用安全無毒的增溶材料有效地提高Pht的水溶性以及生物利用度至關重要。

2.2.1 環糊精包合物

何曉玲等[55]研究發現Pht能與α-環糊精（α-cyclodextrin，α-CD）形成穩定的包合物，在水溶液中可自組裝形成直徑為396 nm的納米粒子。相較于Pht，Pht/α-CD包合物對結腸癌HCT-8細胞的抑制活性顯著提高，這可能是因為包合物提高了Pht的水溶性及釋放速率從而提高了其抗癌效果。

李姝靜等[56]通過冷凍-干燥法成功制備了Pht與甲基-β-環糊精（methyl-β-cyclodextrin，Me-β-CD）、羥丙基-β-環糊精（(2-hydroxy)propyl-β-cyclodextrin，HP-β-CD）物質的量比1∶1的包合物，其水溶性增加，抗氧化能力也顯著提升，這是因為Pht的酚羥基與環糊精的羥基形成了分子內氫鍵，增加了羥基化程度，更有利于清除DPPH自由基，但是環糊精也將Pht部分酚羥基包裹在空腔內部，減弱了其與酪氨酸酶分子中Cu2＋的螯合作用，這使其抑制酪氨酸酶的作用弱于Pht。Wei Yongqin等[57]制備的Pht-HP-β-CD包合物水溶性較Pht增強5 808 倍，穩定性也顯著提高，且還具有一定的DPPH自由基清除能力。

2.2.2 固體分散增溶體系

王凡等[58-59]采用溶劑揮發法制備了負載Pht的甜菊糖苷的固體分散增溶體系，其中Pht以非晶態（無定型形態）分散，因此該體系中Pht能以游離形式存在，這使得Pht更容易與生物活性蛋白相互作用而發揮生物活性。

2.2.3 納米載藥體系

Mariadoss等[60]以殼聚糖為壁材，焦磷酸硫胺素（thiamine pyrophos phate，TPP）為交聯劑，成功合成了具有抗癌潛力的Pht納米粒子。其中Pht以非晶態分散，使用納米粒子包埋后，增強了細胞攝取以及藥物釋放，并提高了Pht的生物利用度，對口腔癌KB細胞的體外增殖有明顯抑制作用，其作用機理與上調Bax、Cyt c、Caspase-3和Caspase-9表達，下調Bcl-2表達有關。其對由7,12-二甲基苯并[a]蒽（7,12-dimethylbenz[a]anthracene，DMBA）誘導的金黃地鼠口腔癌也有治療作用[61]。王記蓮[62]以小麥醇溶蛋白為載體，阿拉伯膠為穩定劑合成了Pht-小麥醇溶蛋白-阿拉伯膠納米顆粒，該納米粒子包封率達到88.9%，并且穩定性增強，耐鹽耐酸堿性強。Payne等[63]以Pht乙醇溶液和KAuCl4溶液在一定溫度下混合合成Pht-Au納米粒子，通過此方法合成的Pht納米粒子對宮頸癌HeLa細胞的抑制作用增強17.45 倍，抑制癌細胞增殖的能力顯著增強。

2.2.4 膠束增溶體系

王凡等[58-59]研究發現甜菊糖苷能自組裝成典型的膠束結構，并通過將Pht包裹在疏水核中形成負載Pht的甜菊糖苷膠束，并增加其水溶性，且其增溶能力隨溫度、甜菊糖苷濃度以及攪拌時間的增大而提升。但是膠束結構一定程度上減弱了Pht與生物活性蛋白之間的相互作用，并影響其正常生理功能的發揮。

3 結 語

研究人員圍繞著Pht展開了豐富的研究，但Pht的開發應用中仍存在一些問題：1）缺少簡單高效的化學修飾方法，且經化學修飾后，在食品領域中的應用可能受到限制；2）環糊精包合物、甜菊糖苷膠束系等增溶方法雖然增強了Pht的水溶性，但是減弱了Pht的自由基清除能力、酪氨酸酶抑制活性以及與其他生物活性蛋白之間的相互作用；3）雖然Pht糖苷類衍生物的降血糖藥物已經在國內外上市，但是Pht及其物理或化學修飾物在抗癌、心血管保護等領域仍處于研究階段，缺少臨床數據的支持。

Pht經物理或化學修飾后，其水溶性、穩定性與生物利用度有所改善，除此之外，抗氧化、抑制酪氨酸酶、抗腫瘤等生理活性也有一定的提高。本文對Pht常見的增溶方式及其特點進行總結，希望為今后研究更高效、安全的增溶方法以及開發不同種類的Pht功能性產品提供理論參考和科學依據，隨著科研工作者研究的不斷深入，Pht在各領域會有更加廣闊的應用前景。