臨床聯合檢測降鈣素原于白細胞總數在小兒肺炎診斷中的應用價值

柳建強 張敏強

山東省平度市第五人民醫院，山東 青島 266742

小兒肺炎是我國嬰幼兒常見的呼吸道疾病之一，多發生于冬春寒冷季節及氣候驟變時，但夏季并不例外。甚至有些華南地區反而在夏天發病較多。患病后免疫力不持久，容易再受感染。引起小兒肺炎的病原體主要有細菌、病毒和肺炎支原體，按病理形態的改變可分為一般支氣管肺炎和間質性支氣管肺炎兩類。前者多由細菌所致，后者則以病毒為主，臨床上常籠統地診斷為支氣管肺炎。近年來確定病原體的可能性日漸增加，不同病原體的臨床表現也各有其特點。隨著人員流動性加強，抗生素濫用等諸多因素，近年來小兒肺炎發病率有不斷增高的趨勢，是發展中國家尤其是相對貧窮的國家或地區小兒死亡的主要原因。另外，在治療上，引起小兒肺炎的病原體不同，對藥物的敏感性也截然不同。因此，準確及時辨別患兒肺炎的類型，對指導臨床醫生正確及時選擇用藥至關重要，這將直接影響到患兒的治療效果，尤其是對重癥支氣管肺炎應爭取做出病原體診斷，及時合理應用抗生素，有效降低病死率，同時，也能有效防范濫用抗生素。我們觀察我院在2018年10月至2019年10月一年內收治的184例小兒肺炎患者檢測降鈣素原和白細胞總數的數據，提示檢測血漿降鈣素原濃度結合白細胞總數水平，能幫助兒科臨床醫生對小兒肺炎患者病情作出準確及時診斷。現將分析結果報道如下。

1 資料和方法

1.1 臨床資料 通過收集2018年10月－2019年10月期間我院收治嬰幼兒并且最終確診為小兒肺炎264例，其中確診為細菌性肺炎102例，男孩54例，女孩48例，月齡1～32個月不等，住院日期4～10天不等；最終確診支原體肺炎52例，男孩27例，女孩25例，月齡1～33個月不等，住院日期3～8天不等；最終確診病毒性肺炎患兒110例，男孩56例，女孩54例，月齡1～31個月不等，住院日期2～9天不等。所有患兒相關診斷大部分符合參考文獻的標準，其中發熱者189例，伴有咳嗽者162例，有氣促癥狀者75例，呼吸困難者26例，重癥者5例。以上患兒采集末梢血104例，采集靜脈血160例。

其中大部分細菌性肺炎患兒痰培養或支氣管分泌物培養致病菌呈陽性；診斷為支原體肺炎患兒其肺炎支原體抗體(膠體金法)均呈陽性；而診斷為病毒性肺炎患兒血漿學檢查以及病毒抗原檢測均為陽性。本研究所選擇的健康對照群體80例，均取自我院同時期兒保科免費體檢嬰幼兒，其中男孩38例，女孩42例，月齡1～30個月不等，考慮家長可接受情況，健康查體幼兒均采集末梢血。以上各群組在性別與年齡構成比較均無明顯統計學意義上的差異(P＞0.05)。

1.2 方法 所有住院患兒采集清晨空腹末梢靜脈血0.5毫升或者清晨空腹靜脈血2毫升，健康對照組則采隨機末梢血0.5毫升，采血過程嚴格按照采血規范執行。冬季氣溫較低時，囑患兒保暖后采末梢血。采血部位優先選擇左手中指或無名指指端內側，嬰幼兒也可選大母趾及足底內外側緣，使用專用采血針，穿刺深度2～3毫米，切忌用力擠壓[2]，末梢血采血后立即打入EDTA抗凝管并輕輕敲擊管壁混勻6～8次。靜脈采血通常采用肘部靜脈，嬰幼兒可以采用頸外靜脈，使用EDTA真空管準確吸取靜脈血2毫升，采血后立即顛倒混勻6～8次。血液樣本在采血后2小時內完成檢測。

實驗檢測順序如下:首先混勻檢測白細胞計數，然后將剩余標本3000轉每分鐘進行高速離心得到血漿，用血漿檢測降鈣素原濃度。

測定白細胞總數采用日本Sysmex公司的XN－550全自動五分類血細胞分析儀，使用原裝配套試劑測定，該設備在檢測白細胞通道中使用半導體激光得到側向熒光和側向散射光來對白細胞進行五分類，在試劑中的表面活性劑可溶解或破壞紅細胞和血小板，并在白細胞的細胞膜上打出小孔，使得試劑中的聚次甲基染料可以進入白細胞內與核酸及細胞器結合，經633納米的激光照射，所產生的熒光強度與細胞核酸含量成一定比例。該設備是目前對白細胞計數最先進的方法之一，同時為了保證檢測數據的準確性，我們每天堅持做室內質控，所有室內質控均在控。嬰幼兒白細胞總數正常值上限為12×109/L，白細胞總數超過12×109/L被認為陽性。

降鈣素原檢測采用膠體金免疫層析法，應用北京樂普全自動免疫層析分析儀，所用試劑由北京樂普醫療科技有限責任公司提供，檢測試紙采用高度特異性的抗體抗原反應及免疫層析分析技術，將定量測試標本滴入試劑盒加樣空，樣本中的降鈣素原與預先包被在聚氨酯膜上的熒光標記的降鈣素原單克隆抗體結合，結合物在毛細效應下向上層析，隨后與被固定在膜上的測試區降鈣素原的單克隆抗體結合捕獲，從而在測試區右熒光物質聚集。通過儀器可以檢測出熒光強度，其熒光強度與血漿降鈣素原濃度成正比。該設備運行穩定，測試試紙自帶質控區，結果可靠。嬰幼兒降鈣素原正常值上限為2ng/m L，血漿降鈣素原超過2ng/m L被認為陽性。

另外，靜脈血和末梢血在同一個體采血可能檢測結果存在差異，但是這種差異不影響個體間的檢測結果比較。所以我們在研究過程中沒有對靜脈血和末梢血的結果進行單獨評價。

1.3 統計學方法 本研究的實驗數據采用SPSS 13.0統計軟件來分析，比較方法采用t檢驗，以P＜0.05考慮差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 各組降鈣素原檢測結果和白細胞總數比較 經過對各患兒組的檢測結果進行比較，我們發現臨床診斷為細菌性肺炎的患兒其降鈣素原水平及白細胞總數明顯高于臨床診斷為支原體肺炎和病毒性肺炎的患兒以及兒保科健康查體的嬰幼兒對照組，(P＜0.05)其差異均有統計學意義。而臨床診斷為支原體肺炎患兒降鈣素原水平也明顯高于診斷為病毒性肺炎患兒和兒保科健康查體嬰幼兒，(P＜0.05)其差異具有統計學意義。而白細胞總數在診斷為病毒性肺炎患兒和同期兒保科健康查體嬰幼兒對照之間比較(P＞0.05)差異無統計學意義。見表格1。

表1 各組降鈣素原檢測結果與白細胞總數比較(±s)

表1 各組降鈣素原檢測結果與白細胞總數比較(±s)

注:與兒保科健康查體比較，a P＜0.05；與病毒性肺炎患兒比較，b P＜0.05；與支原體肺炎患兒比較，c P＜0.05。

組別 例數 降鈣素原(ng/m L) 白細胞總數(×109/L)健康查體幼兒 80 4.51±1.89 8.96±3.85細菌性肺炎患兒 102 2.56±1.52 14.25±4.17支原體肺炎患兒 52 1.86±1.02 9.25±4.28病毒性肺炎患兒 110 1.06±0.62 8.87±4.19

2.2 各組降鈣素原陽性率及白細胞總數陽性率比較經過對各患兒組的檢測結果進行比較，我們發現臨床診斷為細菌性肺炎的患兒降鈣素原和白細胞總數陽性率均顯著高于診斷為病毒性肺炎和支原體肺炎的患兒以及兒保科健康查體嬰幼兒，認為差異(P＜0.05)均具有統計學意義。而診斷為支原體肺炎患兒降鈣素原陽性率明顯高于診斷為病毒性肺炎患兒及兒保科健康查體對照組。而在白細胞總數陽性率方面，診斷為病毒性肺炎和支原體肺炎患兒及兒保科健康查體嬰幼兒相比較，其差異(P＞0.05)均無統計學意義。見表格2。

表2 各組白細胞總數和降鈣素原陽性率比較[例(%)]

3 討 論

血漿降鈣素原是一種膿毒癥誘導蛋白，它是無激素活性的降鈣素前肽物質，由116個氨基酸組成，分子量約為12.7k D.降鈣素原由神經內分泌細胞(包括甲狀腺，肺和胰腺組織的C細胞)表達，它可被特殊的蛋白酶分解成3部分。羧基末端21個氨基酸多肽的抗鈣素，位于中央的33個氨基酸多肽的非成熟降鈣素和1個氨基末端的57個氨基酸多肽的降鈣素。降鈣素原的血漿濃度在健康個體非常低，半衰期為25～30h，在體內外穩定性很好。由于其在體外擁有良好的穩定性，因此極便于檢測。血漿降鈣素原主要是由甲狀腺C細胞進行分泌的，因為其在正常的情況下不會釋放進人體的血液中，因此在健康人的血漿中降鈣素原的含量非常小，一般是低于0.1ug/ml，所以一般是不會被檢驗出來的。在細菌性感染時，細菌內部的毒素正是誘導血漿降鈣素原產生的最主要的刺激因子，只要人體中有細菌內毒素的釋放，則必然導致血液中血漿降鈣素原的濃度升高。降鈣素原選擇性升高，并與感染的嚴重程度成正比；而在病毒性肺炎時，則保持較低水平。

據研究國內外大量的臨床資料顯示，血漿降鈣素原在人體全身發生炎癥早期的2小時左右就會升高，因此為早期的診斷能夠提供可靠、有效的幫助[3]。并且在病毒性的感染、慢性非特異性炎癥、自身免疫性疾病發生時，統計的結果是血漿降鈣素原的濃度不會增加或者是輕微的增加，這說明只有當細菌內的毒素釋放引起了感染后血漿降鈣素原的濃度才會增加。

血常規檢測中的白細胞總數是臨床上判斷細菌性感染存在的傳統指標，但是其易受日間變化、年齡、性別、藥物治療等因素的影響[4]。有專業人士觀察研究[5][6]白細胞總數檢測在診斷小兒肺炎中的應用價值，作者指出支原體肺炎患兒白細胞總數升高變化不大，但是單核細胞及中性粒細胞的比例和絕對值有所升高而淋巴相對降低，提示這種變化應該有助于臨床醫師對患兒支原體肺炎的診斷。對比本次研究結果提示，在白細胞總數方面細菌性肺炎患兒組明顯高于其他各患兒組，其差異(P＜0.05)具有統計學意義，而觀察比較其他各組的白細胞總數水平其差異(P＞0.05)均提示無統計學意義。

通過觀察本次研究結果，診斷為細菌性肺炎患兒的降鈣素原濃度水平和陽性率明顯高于診斷為病毒性肺炎、支原體肺炎的患兒及兒保科健康查體對照，其差異(P＜0.05)均具有統計學意義；而診斷為支原體肺炎患兒的降鈣素原濃度水平均略高于診斷為病毒性肺炎患兒及兒保科健康查體嬰幼兒對照(P＜0.05)，提示通過對降鈣素原的檢測結果結合白細胞總數檢測綜合分析能夠幫助對小兒細菌性肺炎、病毒性肺炎、支原體肺炎進一步做出鑒別診斷。

綜上所述，通過對降鈣素原及白細胞總數檢測有助于臨床醫生對小兒肺炎作出早診斷診斷、早治療，合理選擇抗生素，有利于患兒早日康復，同時能有效減少濫用抗生素，降低細菌耐藥性的發生。