不同病因所致老年間質(zhì)性肺疾病血清炎性因子表達(dá)水平對比研究

蘇菁 楊雅婷 賈聚娟 項保利 錢海紅 支學(xué)軍 李琛 趙建清

間質(zhì)性肺疾病(interstitial lung disease, ILD)種類較多并且復(fù)雜，部分病人表現(xiàn)不典型，尤其是老年病人，由于年齡、體質(zhì)等原因，起病較為隱匿[1]。與健康人群相比，ILD病人的炎癥反應(yīng)狀態(tài)更加突出[2]。而ILD可由多種病因?qū)е拢虼?，探究不同病因?qū)е碌腎LD中血清炎性因子表達(dá)水平有助于改善不同病因所致ILD的治療效果，提高病人生存質(zhì)量[3]。目前國內(nèi)外對ILD的研究，大多是針對其治療方法、危險因素等方面，很少研究血清IL-6和TNF-α在不同病因?qū)е碌腎LD病人中表達(dá)水平的差異[4]。因此，本研究分析了不同病因所致ILD老年病人的血清IL-6、TNF-α表達(dá)水平的差異，現(xiàn)報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 回顧性收集2018年1月至2020年1月河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院收治的64例老年ILD病人的臨床資料，其中男33例，女31例，年齡55～67歲，平均(63.52±1.85)歲；平均病程(4.23±2.03)年；疾病分為Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期，分別為17例、16例、16例、15例。按照病因?qū)⑵浞譃椋禾匕l(fā)性肺纖維化組(A組，n=21)、非特異性間質(zhì)性肺炎組(B組，n=28)、結(jié)締組織病或藥物所致肺間質(zhì)病變組(C組，n=15)。根據(jù)癥狀和胸部影像表現(xiàn)分為：早期：臨床癥狀輕微，影像上有少許磨玻璃陰影；中期：臨床癥狀明顯，影像上有多發(fā)磨玻璃陰影；晚期：臨床癥狀嚴(yán)重，影像上有大片磨玻璃影及實變。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合特發(fā)性肺纖維化[5]、非特異性間質(zhì)性肺炎[6]、結(jié)締組織病肺間質(zhì)病變[7]等肺間質(zhì)疾病的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)所有病人均通過高分辨率CT、病理檢查等明確診斷，臨床資料完整；(3)年齡>60歲；(4)無其他肺部疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他呼吸性疾??；(2)全身感染；(3)嚴(yán)重的心、肝、腎功能不全。

1.3 炎性因子檢測方法 所有病人均于入院后第2天早晨空腹時采集靜脈血5 mL，室溫靜置2 h，以500 r/min的速度離心10 min后吸取上層血清，將檢測樣本置于-80 ℃的冰箱內(nèi)保存。選用美國 BioTek 公司生產(chǎn)的 Synergy 2 型多功能酶標(biāo)儀以ELISA法測定IL-1β、IL-8、TNF-α、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β1)水平。酶聯(lián)免疫試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.4 肺功能檢測方法 采用美國 Senders 廠生產(chǎn)的 6200 體描箱檢查所有病人的肺活量 (VC)、殘氣量 (RV)、肺總量 (TLC)、肺一氧化碳彌散量 (Dlco)，肺毛細(xì)血管有效血流量 (pulmonary capillary blood flow，CO),均以實測值/預(yù)計值>80%為正常。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 3組病人性別、年齡、病程、BMI、疾病分期等比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P> 0.05)，具有可比性。見表1。

表1 3組病人一般資料比較

2.2 血清炎性因子及肺功能 A組血清IL-6、TNF-α、IL-1β、TGF-β1水平明顯高于B組、C組，B組明顯高于C組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。A組VC、RV、TLC、Dlco、CO水平顯著低于B組、C組，且B組顯著低于C組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組病人血清炎性因子水平及肺功能指標(biāo)比較

2.3 3組病人早、中、晚期肺功能異常檢出率比較 A組病人早、中期VC、Dlco、CO異常檢出率顯著高于B組、C組， 且C組病人在疾病早期VC、Dlco、CO均無異常檢出，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 3組病人早中晚期肺功能異常檢出率比較(n，%)

3 討論

ILD也叫彌漫性實質(zhì)性肺疾病(DPLD)，它是一種呼吸系統(tǒng)疾病，其主要表現(xiàn)為呼吸困難、干咳，按病因可分為有明確病因和病因未明的ILD兩大類，病變主要累及肺間質(zhì)和肺泡腔，造成肺泡-毛細(xì)血管功能單位喪失，出現(xiàn)肺順應(yīng)性受限[8]。ILD的主要發(fā)病過程是由肺泡炎性病變導(dǎo)致肺部炎性介質(zhì)釋放，進(jìn)而引起病灶的炎性損傷。因此，可以假設(shè)炎性因子在不同病因?qū)е碌腎LD中表達(dá)存在差異。

IL-6是一種多效應(yīng)細(xì)胞因子，主要由活化的巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及上皮細(xì)胞分泌，在正常機體的血清中含量極少，幾乎檢測不到，可以調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，和機體免疫防御功能存在著密切關(guān)聯(lián)性。TNF-α來自單核巨噬細(xì)胞，是具有重要生物活性的細(xì)胞因子，可促炎癥的發(fā)生。IL-1β是單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等在應(yīng)答感染時產(chǎn)生的細(xì)胞因子，能刺激集落刺激因子、血小板生長因子等細(xì)胞因子的產(chǎn)生和使T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2，在免疫應(yīng)答和組織修復(fù)中起作用[9]。TGF-β1屬于生長、分化因子，在任何過程中都有著重大意義。趙芳哲等[10]的研究表明，M2型巨噬細(xì)胞通過促進(jìn)成纖維細(xì)胞分泌IL-6，從而誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞活化及遷移，影響特發(fā)性肺纖維化發(fā)展。孫盼盼等[11]的研究表明，苦參堿通過抑制白細(xì)胞水平的變化以及IL-1β和TNF-α的表達(dá)來改善呼吸障礙綜合征病毒和脂多糖共刺激誘導(dǎo)的間質(zhì)性肺炎。本研究表明，A組病人血清炎性因子水平明顯高于B組、C組，且B組明顯高于C組，表明血清炎性因子IL-6、TNF-α、IL-1β、TGF-β1在特發(fā)性肺纖維化病人中存在高表達(dá)，且表達(dá)水平顯著高于非特異性間質(zhì)性肺炎和結(jié)締組織病或藥物所致肺間質(zhì)病變病人，原因可能在于：肺組織受到損傷時會激活組織周圍的巨噬細(xì)胞，使 TNF-α大量釋放，加重炎癥反應(yīng)，促進(jìn)纖維細(xì)胞激活增生，引起IL-6、TNF-α、IL-1β、TGF-β1水平上升，而特發(fā)性肺纖維化病人的肺部損傷及纖維化程度更高，使得激活的巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞數(shù)量顯著多于非特異性間質(zhì)性肺炎和結(jié)締組織病或藥物所致肺間質(zhì)病變病人，造成血清炎性因子IL-6、TNF-α的高表達(dá)。

趙玉月等[12]研究發(fā)現(xiàn)，特發(fā)性肺纖維化病人的血清B細(xì)胞活化因子濃度顯著低于自身免疫性疾病引起的非特異性間質(zhì)性肺炎病人，表明特發(fā)性肺纖維化病人肺功能受損程度高于非特異性間質(zhì)性肺炎病人。本研究結(jié)果顯示，A組病人肺功能指標(biāo)VC、RV、TLC、Dlco、CO水平顯著低于B組、C組，A組病人早、中期的VC、Dlco、CO異常檢出率顯著高于B組、C組，表明特發(fā)性肺纖維化病人的肺功能顯著低于非特異性間質(zhì)性肺炎和結(jié)締組織病或藥物所致肺間質(zhì)病變病人，原因在于特發(fā)性肺纖維化常見蜂窩肺，其代表了不可逆和終末肺改變，導(dǎo)致肺彌散功能障礙，加上肺間質(zhì)病變損害了肺毛細(xì)血管結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致血管炎性改變，引起血清炎性因子IL-6、TNF-α水平提高，毛細(xì)血管有效血流量降低，導(dǎo)致肺限制性通氣功能障礙。

綜上所述，不同病因所致老年ILD病人間血清炎性因子IL-6、TNF-α表達(dá)水平具有顯著差異，在特發(fā)性肺纖維化中的表達(dá)水平顯著高于非特異性間質(zhì)性肺炎和結(jié)締組織病或藥物所致肺間質(zhì)病變。然而本研究尚存在一定的局限性，本研究未對不同分期及病情嚴(yán)重程度的病人血清炎癥指標(biāo)進(jìn)行分析，同時本研究樣本量較小，結(jié)果仍需大樣本、多中心的研究加以證實。