抗可溶性抗原檢測在系統性紅斑狼瘡診斷中的應用價值

錢芳

北京市宣武中醫醫院檢驗科 （北京 100050）

系統性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種多發于青年女性的可累及多臟器的自身免疫性炎癥性結締組織病，發病率較低，但危害性較大。據我國衛生部門統計，該病在我國的發病率為（30.13～70.41）/10萬，發病早期患者癥狀并不明顯，容易被忽略，直至病情嚴重時才被發現，對患者身體健康造成極大的危害[1]。隨著免疫學的持續發展以及臨床對SLE 研究的深入，發現SLE患者血清中存在較多的標志性抗體，因此，早期開展相應抗體檢測對SLE 的診斷具有重要的意義。現代醫療領域關于SLE 的檢測方法有病理檢查、抗可溶性抗原（extractable nuclear antigen，ENA）檢測等，其中，ENA 檢測是早期診斷SLE 效果較好的一種方法。為了進一步驗證ENA 檢測的臨床應用價值，本研究選取我院收治的49例SLE 患者及49名健康體檢者進行了回顧性分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年1月至2021 年1月我院收治的49例SLE患者作為試驗組，另選取同期來醫院的49名健康體檢者作為對照組。試驗組男8例，女41例；年齡22～48歲，平均（35.46±3.25）歲。對照組男9名，女40名；年齡24～47歲，平均（35.47±4.32）歲。兩組一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

納入標準：試驗組符合SLE 臨床診斷標準；試驗組診療資料完整；受試者或家屬自愿簽署知情同意書。排除標準：伴腎衰竭等重癥疾病；精神異常；存在語言功能障礙。

1.2 方法

兩組均行ENA 檢測，具體流程如下。（1）采集樣本：采集受試者空腹外周靜脈非抗凝血（2.5±0.5）ml，以4 000 r/min 離心4 min，取血清，用于ENA 檢測，需要注意的是，待制備出血清樣本后，盡量立即對其進行檢測，若無法第一時間檢測，則應將其放置于-20 ℃的環境下存儲[2]。（2）選擇試劑：在進行ENA 檢測時，選擇歐蒙公司生產的型號為DL-1590-1601-2G 的免疫印記試劑。（3）測定步驟：在反應槽內鋪設一層印跡膜，之后分別倒入1.5 ml 的樣本緩沖液，并添加15 μl 的待測血清，將其放置到搖床內在室溫條件下均勻搖晃30 min，去除槽內的液體，再次添加1.5 ml 的洗滌液，通過5 min 洗滌后，去除槽內的液體，按照相同方法洗滌3次后，利用吸水紙將樣本中的液體吸出；在反應槽內加入1.35 ml 的緩沖液，并倒入150 μl 的酶聯試劑，利用上述相同的方式對樣本處理3次并吸干液體；在反應槽內滴加1.5 ml 的底物液，將其放置到搖床內均勻搖晃10 min，對樣本進行顯色處理，當樣本質控帶與陽性區帶顯色清晰后，倒出槽內液體，用蒸餾水清洗3次，1.5 ml/次，取出印跡膜，利用吸水紙去除其中附著的水分，當印跡膜干燥后，用EUROLINE 軟件判讀結果，進而得到最終的ENA 檢測結果[3]。

1.3 觀察指標

比較兩組各項ENA 檢測指標的陽性檢出率，并分析各項ENA 檢測指標診斷SLE 的效能，其中，ENA 檢測指標包含抗狼瘡細胞抗體（抗Sm 抗體）、抗U1小核糖核蛋白抗體（抗nRnp/Sm 抗體）、抗干燥綜合征A 抗體（抗SSA 抗體）、抗干燥綜合征B 抗體（抗SSB 抗體）、抗核糖體P 蛋白抗體（抗Rib 抗體）、抗Robert52抗體（抗RO-52抗體）、抗硬皮病抗原70抗體（抗Scl-70抗體）、抗多發性肌炎/皮肌炎標記抗體（抗Jo-1抗體）。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 兩組各項ENA 檢測指標的陽性檢出率比較

試驗組抗Sm 抗體、抗SSA 抗體與抗RO-52抗體的陽性檢出率均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；兩組其他抗體的陽性檢出率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），見表1。

2.2 各項ENA 檢測指標診斷SLE 的效能比較

與各項ENA 檢測指標的診斷靈敏度比較，各項ENA 檢測指標的診斷特異度更高，且除抗nRnp/Sm 抗體外，其他抗體的診斷特異度均為100.00%，見表2。

表2 各項ENA檢測指標診斷SLE的效能比較（%）

3 討論

SLE 是一種發病率較低，但會對患者身體健康造成極大危害的自身免疫性疾病。現代醫療領域雖并未給出準確的SLE 的發病原理，但認為誘發該病的原因包括以下幾個方面。（1）基因遺傳：通過對SLE 患者家屬進行調查，發現近50%患者的近親家屬患有SLE 或其他免疫系統疾病，且在同卵雙胞胎中，若有一人患有SLE，則另一人患SLE 的概率近70%，而在異卵雙胞胎中，兩人均患SLE 的概率僅有4%左右；此外，與SLE 相關的遺傳基因有很多（共包含50余個），如DR2、DR3、C4AQ 等。（2）雌激素：通過對現有SLE 患者進行調查，發現大部分患者的年齡為20～40歲，其中，妊娠期女性更易患SLE，但具體原因并不清楚。（3）環境因素：長期處于高紫外線的環境中，受紫外線的照射，人體免疫功能會出現損傷，可能誘發SLE。（4）藥物或感染：服用青霉素等藥物，或被鏈球菌等感染，均可能誘發SLE[4]。對于SLE 患者，輕則會出現一些輕微的癥狀，干擾生活，重則會對身體各個組織或系統造成損傷，危害身體健康，因此，及早明確診斷對疾病的治療具有重要的意義。

現代醫療領域針對SLE 的檢測方法有很多，其中ENA 是應用效果較好的一種方法。在ENA 檢測中，抗Sm 抗體為主要的檢測指標，其所作用的抗原是U 族小分子細胞核核糖核蛋白顆粒，通過檢測該抗體，可及時發現癥狀并不明顯的SLE，此外，SLE 患者若出現了抗Sm 抗體陽性，將會對人體的中樞神經造成損傷[5]。有研究指出，SLE 患者出現抗Sm 抗體陽性時，一般會出現明顯的神經系統癥狀，對SLE 的初步診斷具有重要的意義[6]。本研究結果顯示，SLE 患者抗Sm 抗體的陽性檢出率為30.61%，與以往研究結果相似[7]。

理論上，在檢測抗Sm 抗體的基礎上，還應檢測抗nRnp/Sm 抗體。當SLE 患者處于疾病活動期時，通常會出現一定的抗nRnp/Sm 抗體，待病情改善后，該抗體不會立即消失，在1～3年后該抗體的檢測值才會顯示為0，且檢測出抗nRnp/Sm 抗體的患者很少會出現腎病。本研究中，SLE 患者抗nRnp/Sm 抗體的陽性檢出率為18.37%，低于現有研究成果[8]，出現這一差異的原因可能與病例數、操作流程存在差異有關。

另外，有研究表明，通過對抗SSA 抗體檢測結果的判斷，可初步評估患者是否患有SLE[9]。本研究中，SLE 患者抗SSA 抗體的陽性檢出率高于健康體檢者，證實了上述觀點。另有研究表明，SLE患者的抗RO-52抗體檢測多呈陽性，而當患者經過治療完全康復后，該指標則轉為陰性[10]。本研究中，SLE患者抗RO-52抗體的陽性檢出率為46.94%，而健康體檢者為0，證實了上述觀點。

本研究最終結果顯示，試驗組抗Sm 抗體、抗SSA 抗體與抗RO-52抗體的陽性檢出率均高于對照組，兩組其他抗體的陽性檢出率比較無顯著差異；與各項ENA 檢測指標的診斷靈敏度比較，各項ENA 檢測指標的診斷特異度更高，且除抗nRnp/Sm 抗體外，其他抗體的診斷特異度均為100.00%。

綜上所述，相較于健康體檢者，SLE 患者行ENA 檢測的抗Sm 抗體、抗SSA 抗體與抗RO-52抗體的陽性檢出率更高，且相較于其他診斷價值評估項，各項ENA 檢測指標的診斷特異度更高。