中草藥添加劑對生茸期梅花鹿生長性能、血清生化、抗氧化和免疫功能的影響

魏倩倩，楊乾龍，常忠娟，吳 炎，馬 琳，劉興醫，趙 蒙*

（1.中國農業科學院特產研究所，吉林長春 130112；2.中國農業科學院研究生院，北京 100081）

梅花鹿是重要的藥用經濟動物，具有較高的藥用價值和養生保健功能。梅花鹿生性膽小，飼養過程中易受到環境的應激，嚴重時伴隨疾病的產生。在畜禽養殖過程中，疾病的預防往往比疾病的治療更為重要。為達到保健、促生長的效果，飼料中常會添加大量抗生素，導致抗生素的濫用，對土壤、水源以及人類健康造成威脅。隨著禁抗時代的到來，天然植物中草藥已成為抗生素替代品研究的熱點，中草藥是天然植物，富含多種有機物，可作為營養物質促進動物健康生長，起到提高免疫力的作用。目前，中草藥添加劑主要應用于單胃動物家禽和豬養殖生產中，在梅花鹿中的研究較少，因此，本試驗以生茸期梅花鹿為研究對象，在日糧中添加中草藥添加劑，研究中草藥對生茸期梅花鹿的生長性能、血清生化指標、抗氧化及免疫指標的影響，為中草藥添加劑的研發及梅花鹿的健康養殖提供新方案。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 中草藥購自安徽亳州中藥材市場，由當歸、人參、枸杞、五味子、益母草、黃芪、黨參、熟地黃、丹參、淫羊藿按一定比例超微粉碎組成中草藥添加劑。

1.2 試驗設計與飼養管理 單因素隨機區組實驗設計，選取頭茬茸收割時間集中在7月13日左右的3歲齡健康雄性梅花鹿[平均體重為（74.79±0.78）kg]12頭，分為2組，每組6個重復，每個重復1頭，組間初始體重差異不顯著（P＞0.05），見表2。其中對照組（SC）飼喂基礎日糧，試驗組（ST）額外每日飼喂10 g/頭的中草藥添加劑，基礎飼糧配方及營養含量見表1。頭茬茸收割時開始預飼，預飼期7 d，傷口愈合時正試飼喂，正式飼喂7周至梅花鹿二杠茸收割。動物試驗在農業部長白山野生生物資源重點野外科學觀測試驗站進行，每天4：30和15：30定量飼喂，自由飲水。

表1 基礎飼糧組成及營養水平（風干基礎） %

1.3 樣品采集和保存 試驗最后1 d晨飼前對梅花鹿麻醉并進行頸靜脈采血，3500 r/min離心10 min分裝入1.5 mL Eppendorf管中，-80℃低溫保存，待測。

1.4 指標測定及方法

1.4.1 飼料營養物質含量的測定

飼料中的干物質含量參照GB/T6435—2014測定；粗蛋白質含量利用凱氏定氮法參照GB/T6432—2018測定；粗脂肪含量利用索氏脂肪浸提法參照GB/T6433—2006測定；中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維含量使用范式（Van Soest）方法參照GB/T20806—2006測定。

1.4.2 生長性能的測定

試驗第1 d和最后1 d晨飼前麻醉并進行空腹稱重，用于計算總增重（TWG）和平均日增重（ADG）。每天記錄投料量和剩料量，用于計算試驗期間干物質采食量（DMI）和料重比（F/G）。

1.4.3 血清樣品測定

血清葡萄糖（GLU）、總蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、乳酸脫氫酶（LDH）、膽固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）采用中生北控生物科技有限公司的試劑盒測定。

過氧化氫酶（CAT）、總超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MAD）的測定均采用南京建成科技有限公司的試劑盒測定。鹿免疫球蛋白A（IgA）、鹿免疫球蛋白G（IgG）、鹿免疫球蛋白M（IgM）采用上海酶聯生物科技有限公司的試劑盒測定。

1.5 數據處理 試驗數據先由Excel 2019進行初步整理，然后采用 SPSS 26.0 進行獨立樣本t 檢驗（t test），P ＜ 0.01，表示差異極顯著 ；P＜0.05，表示差異顯著；P＞0.05，表示差異不顯著。

2 結果

2.1 中草藥添加劑對生茸期梅花鹿生長性能的影響 由表2可知，兩組間終末體重、總增重、平均日增重、平均日采食量和料重比無顯著性差異（P＞0.05）。

表2中草藥添加劑對生茸期梅花鹿生長性能的影響

2.2 中草藥添加劑對生茸期梅花鹿血清生化指標的影響 由表3可知，ST組的血清葡萄糖含量顯著高于SC組（P＜0.05）；血清膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白含量兩組之間差異不顯著（P＞0.05）。兩組血清白蛋白和總蛋白含量差異不顯著（P＞0.05），血清谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶和乳酸脫氫酶活力兩組之間差異不顯著（P ＞ 0.05）。

表3 中草藥添加劑對生茸期梅花鹿血清生化指標的影響

2.3 中草藥添加劑對生茸期梅花鹿抗氧化功能的影響 由表4可知，與SC組相比，ST組血清過氧化氫酶和總超氧化物歧化酶的活性顯著升高（P＜0.05）；與SC組相比，ST組血清谷胱甘肽過氧化物酶活性升高，但差異不顯著（P＞0.05），ST組與SC組血清丙二醛含量差異不顯著（P＞0.05）。

表4 中草藥添加劑對生茸期梅花鹿抗氧化功能的影響

2.4 中草藥添加劑對生茸期梅花鹿免疫功能的影響 由表5可知，與SC組相比，ST組的免疫球蛋白G含量顯著升高（P＜0.05），免疫球蛋白A和免疫球蛋白M含量兩組之間無顯著差異（P＞0.05）。

表5 中草藥添加劑對生茸期梅花鹿免疫功能的影響

3 討論

3.1 中草藥添加劑對生茸期梅花鹿生長性能的影響 梅花鹿日糧中營養物質被高效消化吸收是實現快速增重的關鍵。研究表明，中草藥飼料添加劑在動物飼養中，對于提高采食量、改善消化能力以及提高生產性能等方面具有巨大優勢（王旭東等，2019）。在動物機體代謝過程中，能夠為動物提供蛋白質、氨基酸、糖、脂肪、淀粉、維生素、礦物質和微量元素等豐富的營養物質，達到促進動物生長和提高生產性能的作用（駱雪等，2021，盧世杰等，2021）。本試驗中，ST組總增重、平均日采食量均較SC組有所增加，料重比有所降低，但差異均不顯著。中草藥添加劑雖未顯著提高生長性能，至少表明中草藥對生茸期梅花鹿的生長性能無負面影響。也可能是3歲齡梅花鹿已達到體成熟，體重變化較穩定。部分中草藥適口性較差，如五味子、當歸等中草藥含有揮發油、多糖、單糖等物質，可以改善飼料風味，加之本試驗中所有梅花鹿均限飼，所以中草藥添加劑并沒有對生茸期梅花鹿的平均日采食產生顯著性變化。具體的原因有待于進一步研究。

3.2 中草藥添加劑對生茸期梅花鹿血清生化指標影響 血液的生理生化指標是反映動物機體的物質代謝和組織器官機能的重要指標。本試驗中，在生茸期梅花鹿飼糧中添加中草藥添加劑對血清TP、ALB、GLB、CHO、TG、LDL和 HDL的含量未產生顯著影響。但SC組的GLU含量比SC組顯著提高38.65%。表明中草藥添加劑能夠增強生茸期梅花鹿合成蛋白質的能力，鹿茸中含有豐富的蛋白質，其中干鹿茸含有50%～76%的粗蛋白質（Li等，1999），可能中草藥對鹿茸的生長具有明顯的促進作用，值得我們進一步研究。中草藥促進血清中GLU含量的提高可能是因為改善了線粒體功能，線粒體是能量產生與代謝的重要場所，研究表明黃芪—當歸藥對能調節線粒體生物能，可誘導線粒體膜電位增加、上調線粒體相關基因的表達并調節線粒體自噬、改善線粒體損傷（Kwan等，2019，袁嘉婧等，2020）。高輝等（2013）研究表明，復方中草藥對犢牛的血液生化指標未產生不利影響。本試驗結果與之類似，ST組血清ALP、AST和LDH含量高于SC組，但未達到顯著性水平，表明本試驗使用的中草藥添加劑對生茸期梅花鹿的蛋白代謝、肝功能和心肌無不利影響。因此，中草藥添加劑在一定合理范圍內對動物機體可能不會產生不利影響。

3.3 中草藥添加劑對生茸期梅花鹿抗氧化功能的影響 中草藥具有清除機體氧自由基和增強抗氧化的功能，可以從多個環節阻斷自由基的損傷。武晉孝等（2002）報道，使用由山楂、神曲、丹參、首烏、蒲黃、玉竹、枳殼等組成的飼料添加劑，極顯著提高肉雞體內SOD和GSH-Px的活性。閆先峰等（2021）研究發現，飼喂不同水平中草藥飼料添加劑對蛋雞血清T-AOC、GSH、SOD和MDA含量影響差異顯著。本試驗中，ST組血清CAT和SOD酶活性顯著升高，GSH-PX酶活性升高，但差異不顯著，表明中草藥具有提高梅花鹿機體抗氧化的能力。中草藥的抗氧化作用與多糖和黃酮類有關，推測可能是當歸多糖通過減輕過氧化氫引起的細胞氧化反應損傷，減弱細胞凋亡和活性氧的產生（Zhang等，2019）或淫羊藿中的黃酮類成分發揮抗氧化作用，它能夠通過結構中的酚羥基阻斷自由基鏈反應，減少自由基的產生（Chen等，2020）。也可能是丹參單體成分（如丹酚酸A、丹酚酸B、丹參素、迷迭香酸等）發揮作用，研究表明其可以通過調控核因子-κB（NF-κB）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、Janus酪氨酸蛋白激酶（JAK）/信號轉導及轉錄激活因子（STAT）等多種信號通路，發揮抗炎、抗氧化藥理作用（陳璐等，2021）。有關中草藥不同成分的抗氧化具體作用機制，還需進一步研究。

3.4 中草藥添加劑對生茸期梅花鹿免疫功能的影響 免疫球蛋白是反映機體免疫功能的重要指標。因此，血清中免疫球蛋白的濃度與梅花鹿的免疫力密切相關。IgG在抗體介導的防衛機理中占主要地位，IgG比其他免疫球蛋白更易逸出血管，參加體表和組織間的防衛（邱時秀等，2020）。鄧培華等（2021）報道，由黃芪、黨參、山楂、熟地等組成的中草藥添加劑顯著提高血清IgG含量。本試驗中，ST組IgG含量顯著高于SC組，表明中草藥添加劑提高生茸期梅花鹿的免疫功能。推測免疫功能的改善可能與中草藥的多糖成分有關，枸杞多糖能使免疫系統中的NK細胞殺傷活性提高，并進一步推測枸杞多糖提高免疫作用與Band-3蛋白表達水平的恢復相關（黃振華等，2018）。另有研究表明，枸杞多糖通過調節腸道微生物菌群來增強先天免疫，腸道菌群可以通過直接或間接的方式來阻止外源病原微生物侵染機體，枸杞多糖又能對腸道菌群起到一定的保護和調節作用，進而提高有益菌水平（Zhu等，2020）。黃芪多糖可通過多種途徑發揮免疫調節的作用，例 如 TLR4-NF-κB、Ca2+-cAMP通 路 等（Song等，2007，Song等，2007）。

4 結論

本試驗條件下，飼糧中每日添加10g/頭中草藥添加劑可以顯著提高生茸期梅花鹿的血清CAT、T-SOD活力和IgG含量，提高機體抗氧化和免疫功能。