lncRNA PTENP1 通過miR-142-5p/PTEN 分子軸調控結直腸癌HCT116細胞增殖、遷移和侵襲的分子機制①

凌旭坤 謝文鴻 張 喆 胡 琛 （惠州市中心人民醫院胃腸外科，惠州 516200）

結直腸癌（colorectal cancer，CRC）是世界范圍內常見的癌癥，其高侵襲性是導致患者死亡的主要原因之一，患者五年生存率低于10%［1］。因此，研究與侵襲轉移相關的分子機制具有重要意義。研究發現，腫瘤抑制基因PTEN 的假基因lncRNA PTENP1 參 與 調 控 多 種 腫 瘤 的 發 展 進 程［2-4］。PTENP1 位于 9p 13.3，與 PTEN 的 3'UTR 上游區域存在高度同源性，它可以通過競爭性內源RNA（competitive endogenous RNA，ceRNA）機制結合PTEN 上游 miRNAs 調控 PTEN 的表達［3，5］。例如，PTENP1 通過海綿吸附miR-19b 調控PTEN 的表達，進而抑制乳腺癌細胞增殖、遷移和侵襲［6］。研究發現，miR-142-5p 作為致癌基因在CRC 組織和細胞中高表達，沉默miR-142-5p 顯著抑制CRC 細胞增殖和遷移［7］。同時也有研究表明，PTEN 是miR-142-5p的下游靶基因，miR-142-5p 能夠通過調控PTEN 發揮其功能［8］。但 PTENP1 通過 miR-142-5p/PTEN 軸調控HCT116 細胞增殖、遷移和侵襲的研究尚未有文獻報道。本研究將從細胞水平探討PTENP1/miR-142-5p/PTEN 分子軸調控HCT116 細胞增殖、遷移和侵襲的分子機制，為尋找抑制CRC 腫瘤細胞增殖、侵襲和遷移的手段提供一定的理論依據。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料 收集 2015 年 3 月至 2017 年 8 月手術切除的CRC組織和配對癌旁組織22例，樣本收集后立刻放入液氮中保存。納入標準：病理學診斷為CRC，術前未行任何放化療治療或輔助治療；排除標準：病理學診斷為非CRC。本研究經惠州市中心人民醫院倫理委員會批準，患者或其家屬均簽署知情同意書。

1.1.2 試劑和儀器 人正常腸上皮細胞FHC（貨號：KCB2017068YJ）及 CRC 細胞系 HCT116（貨號：KCB 200706YJ）、SW620（貨號：KCB201198YJ）和SW480（貨號：KCB200848YJ）購自中國科學院昆明動物所；胎牛血清、RPMI1640 購自Thermo Scientific HyClone 公 司 ；Lipofectamine3000 購 于 Invitrogen 公司；miR-142-5p inhibitor 及 RT-qPCR 引物由北京金唯智生物技術公司合成；……