3種微生物菌劑處理三七種子對(duì)其生長(zhǎng)及種苗品質(zhì)的影響

羅 成 郭力維 李佳洲 楊 寬 王慧玲 張 帥 粟 珊 朱有勇 何霞紅,2*

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 云南生物資源保護(hù)與利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650201； 2.西南林業(yè)大學(xué) 園林園藝學(xué)院，昆明 650224)

三七[

Panax

notoginseng

(Burk.) F. H. Chen]又名田七、金不換，為五加科人參屬植物，是我國(guó)特有的傳統(tǒng)名貴中藥材，享有“參中之王”“南國(guó)神草”等美譽(yù)，其根、莖和葉皆可入藥，具有活血化瘀和消腫定痛等多種功效。三七栽培模式包括種苗培育和大田生長(zhǎng)2個(gè)時(shí)期，種苗培育期為種子播種至種苗移栽所經(jīng)歷時(shí)期，大田生長(zhǎng)期為種苗移栽至三七采收所經(jīng)歷時(shí)期。大田生長(zhǎng)期中三七的生長(zhǎng)和發(fā)育直接受種苗質(zhì)量的影響，且2個(gè)時(shí)期的三七都存在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)和生殖生長(zhǎng)2個(gè)生長(zhǎng)高峰期，一年生三七5—7月為營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)高峰期，10月為生殖生長(zhǎng)高峰期；兩年生三七4—6月為營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)高峰期，10—12月為生殖生長(zhǎng)高峰期；三年生三七6月為營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)高峰期，10—12月為生殖生長(zhǎng)高峰期。近年來(lái)，隨著三七需求暴漲，三七藥材難以滿足市場(chǎng)需求，不得不進(jìn)行大規(guī)模的人工栽培。當(dāng)前，大面積的人工栽培主要套用農(nóng)田大水大肥的種植模式，大量化肥農(nóng)藥的施用使得三七生產(chǎn)面臨嚴(yán)峻的高產(chǎn)低質(zhì)、病害加重、農(nóng)殘和重金屬超標(biāo)一系列問(wèn)題。此外，由于三七生長(zhǎng)喜溫暖陰濕，極易發(fā)生多種病害，并且隨著栽種時(shí)間的延長(zhǎng)田間病害逐年增加，其中三七根腐病是危害三七產(chǎn)量和品質(zhì)的重要病害之一，亦是導(dǎo)致三七連作障礙的主要因素之一。目前生產(chǎn)上主要采用化學(xué)農(nóng)藥防控，該方法不僅導(dǎo)致土壤理化性質(zhì)惡化，土壤養(yǎng)分平衡被破壞，土壤中有害微生物大量繁殖，而且還造成生態(tài)環(huán)境污染等問(wèn)題。微生物菌劑因其具有對(duì)環(huán)境、生態(tài)、人類健康友好及促進(jìn)農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展等優(yōu)勢(shì)，因而在三七生產(chǎn)中有潛在的應(yīng)用價(jià)值。

微生物菌劑是一種活體有機(jī)生物質(zhì)，通過(guò)微生物代謝活動(dòng)不僅能為植物提供所需養(yǎng)分促進(jìn)植物生長(zhǎng)發(fā)育，而且還能改善土壤結(jié)構(gòu)，提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)。目前，微生物菌劑在糧食和果蔬類作物上已有大量研究報(bào)道，但在三七上的研究主要集中在一年生以上三七，而關(guān)于微生物菌劑處理三七種子后對(duì)三七生長(zhǎng)及種苗品質(zhì)的研究鮮有報(bào)道。因此，本研究擬以三七種子為研究材料，對(duì)一年生三七進(jìn)行研究，利用哈茨木霉菌劑、植物益生菌液1號(hào)菌劑和寧盾菌劑3種不同微生物菌劑直接處理三七種子，分析微生物菌劑處理三七種子后對(duì)其出苗、存苗、根腐病發(fā)生情況、農(nóng)藝性狀以及種苗皂苷含量的影響，探明微生物菌劑處理三七種子對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育及種苗品質(zhì)的影響，為微生物菌劑在三七產(chǎn)業(yè)上的推廣應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)及科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2019—2020年在云南省尋甸縣云南農(nóng)業(yè)大學(xué)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)教育科研基地內(nèi)進(jìn)行。供試三七種子購(gòu)買于云南省文山市三七國(guó)際交易中心，種植株行距為5 cm×5 cm。試驗(yàn)共設(shè)置7個(gè)處理，各微生物菌劑具體處理方式及來(lái)源見(jiàn)表1，小區(qū)面積1.5 m×4 m=6 m，6次重復(fù)。

1.2 試劑及儀器

1

.

2

.

1

供試試劑

純度≥98%的皂苷標(biāo)品(人參皂苷Rg、人參皂苷Rb、人參皂苷Re、人參皂苷Rd和三七皂苷R)購(gòu)于貴州迪大生物科技有限公司，色譜純的甲醇和乙腈購(gòu)于德國(guó)默克公司，超純水由德國(guó)默克公司MIlli-Q超純水系統(tǒng)生產(chǎn)。

1

.

2

.

2

供試儀器

葉綠素儀為柯尼卡美能達(dá)控股株式會(huì)社公司生產(chǎn)的SPAD-502型，磨粉機(jī)為中國(guó)溫嶺市林大機(jī)械有限公司生產(chǎn)的DF-20型，分析天平為德國(guó)賽多利斯集團(tuán)生產(chǎn)的BSA124S-CW型，55 kHz超聲波清洗機(jī)為上海聲源超聲波儀器有限責(zé)任公司生產(chǎn)的SY3100DH型，冷凍高速離心機(jī)為日本日立公司生產(chǎn)的CR22GⅢ型，超高效液相色譜儀為美國(guó)安捷倫科技有限公司生產(chǎn)的1290 Infinity Ⅱ型。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目和方法

1)出苗及存苗調(diào)查：每小區(qū)劃取1 m×1 m的樣方統(tǒng)計(jì)出苗和存苗，4月進(jìn)行出苗調(diào)查，11月進(jìn)行存苗調(diào)查。計(jì)算公式如下：

出/存苗=(調(diào)查株數(shù)/播種數(shù))×100%

(1)

表1 種子處理及用法用量
Table 1 Seed treatment and usage and dosage

處理Treatment供試菌劑Test fungicide用量Dosage處理方法Processing method來(lái)源SourceT1哈茨木霉8 g/100 g種子拌種T2哈茨木霉16 g/100 g種子拌種山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院T3植物益生菌液1號(hào)100倍稀釋液浸種T4植物益生菌液1號(hào)200倍稀釋液浸種T5寧盾包衣劑200 g/1 000 g種子包衣南京農(nóng)業(yè)大學(xué) T6寧盾水劑100倍稀釋液浸種對(duì)照CK咯菌腈1 mL/1 000 g種子包衣實(shí)驗(yàn)室提供

表2 三七根腐病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)
Table 2 Classification criteria for root rot of

等級(jí)Grade分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)Grading standard0健康,無(wú)癥狀;1腐爛僅發(fā)生在塊根表面、且0<腐爛面積占比≤10%,或腐爛已擴(kuò)展至內(nèi)部且5%<腐爛面積占比≤10%;2腐爛已擴(kuò)展至內(nèi)部、且10%<腐爛面積占比≤40%,支須根無(wú)腐爛;3腐爛已擴(kuò)展至內(nèi)部、且40%<腐爛面積占比≤50%,支須根腐爛;4腐爛已擴(kuò)展至內(nèi)部、且50%<腐爛面積占比≤70%,支須根腐爛脫落;5腐爛已擴(kuò)展至內(nèi)部、且腐爛面積占比>70%直至整個(gè)塊根完全腐爛,支須根腐爛。

2)根腐病發(fā)病調(diào)查：采用五點(diǎn)取樣法，于6、8和10月對(duì)三七植株根腐病發(fā)病情況進(jìn)行調(diào)查。每點(diǎn)調(diào)查20株，每小區(qū)共調(diào)查100株，參考根腐病發(fā)病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)調(diào)查統(tǒng)計(jì)(表2)。

發(fā)病率=發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100%

(2)

病情指數(shù)=[ ∑(各級(jí)病株數(shù)×各級(jí)代表值)

/

(最高級(jí)代表值×調(diào)查總株數(shù))]×100

(3)

3)葉綠素含量：利用葉綠素儀于6、8和10月測(cè)定三七葉綠素含量。每個(gè)小區(qū)中隨機(jī)選擇30株三七植株，每株選擇中間葉片進(jìn)行測(cè)定，每片葉子重復(fù)測(cè)定3次。

4)株高：于6和8月，利用直尺在每個(gè)小區(qū)中隨機(jī)選擇25株三七植株進(jìn)行株高測(cè)定，11月采收時(shí)隨機(jī)選取20株測(cè)定株高。

5)生物量測(cè)定：在收獲期采用五點(diǎn)取樣法采樣，各處理每點(diǎn)取10株三七植株(共50株)帶回實(shí)驗(yàn)室，洗凈泥土，晾干水分后稱取三七鮮重。采用烘干法將三七放入60 ℃烘箱烘干至恒重，取出冷卻至室溫，稱取三七干重。

6)皂苷含量測(cè)定：每處理有6個(gè)小區(qū)作為重復(fù)，隨機(jī)選擇其中3個(gè)小區(qū)的三七植株進(jìn)行皂苷測(cè)定。將三七主根烘干后磨碎，過(guò)100目篩，精確稱取0.2 g，加75%的甲醇15 mL，超聲提取30 min，離心10 min(12 000 r/min)，取上清液1 mL放入棕色進(jìn)樣瓶中，使用超高效液相色譜儀測(cè)量三七中R、Rg、Rb、Re和Rd這5種皂苷的含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理及分析

利用Microsoft Excel 2013進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，用IBM SPSS 19進(jìn)行單因素方差分析和多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 微生物菌劑處理三七種子對(duì)出苗和存苗的影響

三七齊苗(4月)后調(diào)查不同微生物菌劑處理三七種子對(duì)三七出苗的影響(圖1)。結(jié)果表明，除T1處理外，各微生物菌劑處理三七種子出苗差異不顯著，但均顯著低于CK。出苗依次為：CK(84.00%)>T4(78.33%)>T3(77.92%)>T6(76.21%)>T5(76.08%)>T2(73.92%)>T1(68.08%)。同一種微生物菌劑不同用量處理三七種子對(duì)出苗影響不同，其中低濃度植物益生菌液1號(hào)菌劑和高濃度哈茨木霉菌劑有利于三七種子出苗。

隨著生育期的延長(zhǎng)(11月)，除了T1處理(56.33%)的三七存苗顯著低于CK(64.45%)外，其他處理均高于CK，但未達(dá)到顯著水平(圖1)。T4、T3、T5、T2、T6和CK存苗分別較T1提高了26.56%、25.60%、22.40%、19.09%、18.28%和14.42%。

綜上所述，不同微生物菌劑處理三七種子有利于三七后期存苗，其中低濃度植物益生菌液1號(hào)菌劑和高濃度哈茨木霉菌劑效果較好，以T4處理效果最優(yōu)。

T1，哈茨木霉8 g/100 g種子；T2，哈茨木霉16 g/100 g種子；T3，植物益生菌液1號(hào)100倍稀釋液；T4，植物益生菌液1號(hào)200倍稀釋液；T5，寧盾包衣劑；T6，寧盾水劑100倍稀釋液；CK，咯菌腈。相同顏色柱子上的不同字母表示不同處理間差異顯著(P<0.05)。下同。 T1, Trichoderma harzianum 8 g/100 g seeds; T2, Trichoderma harzianum 16 g/100 g seeds; T3, 100 times diluent of plant probiotics No. 1; T4, 200 times diluent of plant probiotics No. 1； T5, Ningdun coating agent; T6, 100 times diluent of Ningdun water agen； CK, Fludioxonil. The different letters on the same color column indicate that the difference reach a significant level (P<0.05) among different treatments. The same below.圖1 微生物菌劑對(duì)三七出苗和存苗的影響Fig.1 Effect of microbial agents on the germination and survival of Panax notoginseng

2.2 微生物菌劑處理三七種子對(duì)根腐病發(fā)病的影響

三七根腐病是影響三七生長(zhǎng)的主要因素之一。通過(guò)調(diào)查各微生物菌劑處理不同時(shí)間段根腐病發(fā)生情況發(fā)現(xiàn)(表3)，該病害8月份危害最為嚴(yán)重，各微生物菌劑處理發(fā)病率均低于CK，且T1處理與CK有顯著差異；T1、T2、T3、T4、T5和T6處理分別較CK降低了87.64%、56.18%、37.45%、31.46%、25.09%和18.73%。10月，各微生物菌劑處理發(fā)病率與CK均無(wú)顯著差異。其中，T1和T2處理后的發(fā)病率較CK降低了80.24%和59.88%。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，不同微生物菌劑處理對(duì)三七根腐病病情指數(shù)變化趨勢(shì)與發(fā)病率類似，其中，哈茨木霉菌劑處理下整個(gè)生育期平均病情指數(shù)最低。以上結(jié)果表明，哈茨木霉菌劑在防治三七根腐病發(fā)生和減輕發(fā)病效果上優(yōu)于其他2種菌劑，且低濃度處理(哈茨木霉8 g/100 g種子)最優(yōu)，使得整個(gè)生育期發(fā)病率控制在1%以內(nèi)。

表3 微生物菌劑對(duì)三七根腐病發(fā)生的影響
Table 3 Effect of microbial agents on the occurrence of root rot

處理Treatment發(fā)病率/%Disease rate病情指數(shù)Disease index發(fā)病率/%Disease rate 病情指數(shù)Disease index發(fā)病率/%Disease rate 病情指數(shù)Disease index6月8月10月T10.50±0.34 b0.23±0.17 b0.33±0.21 b0.33±0.21 b0.33±0.21 a0.33±0.21 aT20.83±0.54 b0.57±0.36 b1.17±0.48 ab1.03±0.50 a0.67±0.33 a0.63±0.33 aT32.67±0.84 a2.40±0.71 a1.67±0.61 ab1.63±0.59 a2.17±0.79 a2.03±0.79 aT40.83±0.54 b0.47±0.36 b1.83±1.08 ab1.43±0.98 a1.50±0.56 a 1.50±0.56 aT51.50±0.71 ab1.17±0.62 ab2.00±0.77 ab1.83±0.73 a1.67±0.61 a 1.67±0.61 aT60.67±0.33 b0.53±0.27 b2.17±0.60 ab1.80±0.67 a1.83±1.05 a1.70±1.05 aCK0.67±0.33 b0.57±0.33 b2.67±0.76 a2.53±0.76 a1.67±0.49 a1.53±0.49 a

注：同列不同小寫字母表示處理間差異顯著(<0.05)。下同。

Note: Different letters in the same column indicate the differences reach a significant level (<0.05) among different treatments. The same below.

2.3 微生物菌劑處理三七種子對(duì)農(nóng)藝性狀的影響

微生物菌劑處理三七種子有助于三七植株生長(zhǎng)(表4)。與CK相比，8月三七株高除T1處理與CK無(wú)顯著差異外，其他處理均顯著高于CK；株高排序依次為：T6(11.32 cm)>T4(11.10 cm)>T3(10.97 cm)>T5(10.85 cm)>T2(10.76 cm)>T1(10.29 cm)>CK(9.72 cm)。進(jìn)一步分析微生物菌劑處理間的差異發(fā)現(xiàn)，除T4、T6與T1有顯著差異外，其他微生物菌劑處理間均無(wú)顯著差異。11月時(shí)，所有微生物菌劑處理株高均高于CK，其中，T6和T4處理與CK有顯著差異，分別較CK增加了12.25%和10.33%，而T5、T3、T2和T1處理則分別比CK增加了7.25%、7.08%、6.67%和4.92%。以上結(jié)果表明，供試所用的3種微生物菌劑處理三七種子后均有利于促進(jìn)三七植株生長(zhǎng)，其中以T6和T4處理效果最優(yōu)。

檢測(cè)生育期葉綠素含量變化發(fā)現(xiàn)，隨著生育期延長(zhǎng)，3種微生物菌劑處理對(duì)葉綠素含量影響總體呈現(xiàn)遞增趨勢(shì)，但各處理間均無(wú)顯著差異(

P

>0.05)(表5)。

表4 微生物菌劑對(duì)三七株高的影響

Table 4 Effects of microbial agents on the plant height of cm

處理Treatment株高 Plant height6月8月11月T18.34±0.29 a10.29±0.25 bc12.59±0.36 abT28.40±0.26 a10.76±0.15 ab12.80±0.25 abT38.98±0.17 a10.97±0.23 ab12.85±0.35 abT48.50±0.15 a11.10±0.19 a13.24±0.30 aT58.99±0.19 a10.85±0.28 ab12.87±0.14 abT68.98±0.19 a11.32±0.35 a13.47±0.25 aCK8.62±0.19 a9.72±0.17 c12.00±0.23 b

表5 微生物菌劑對(duì)三七葉綠素含量(SPAD值)的影響
Table 5 Effects of microbial agents on the chlorophyll content (value of SPAD) of

處理Treatment葉綠素含量 Chlorophyll content6月8月10月T138.8±2.40 a50.3±1.88 a51.0±0.62 aT238.6±1.43 a51.1±0.92 a51.3±0.31 aT339.0±0.98 a52.1±1.15 a52.6±0.90 aT439.0±1.37 a50.9±1.10 a51.5±0.94 aT538.3±1.14 a51.2±1.28 a50.9±1.48 aT638.7±1.90 a51.6±1.81 a51.0±0.92 aCK38.8±1.54 a53.0±1.25 a52.1±1.09 a

2.4 微生物菌劑處理三七種子對(duì)生物量的影響

微生物菌劑對(duì)三七生物量的影響見(jiàn)表6，3種微生物菌劑處理對(duì)三七地上部鮮重、地上部干重、地下部鮮重和地下部干重均無(wú)顯著影響(

P

>0.05)。其中地上部鮮重以T6處理最重(0.66 g/株)，地下部鮮重以CK最高(0.98 g/株)。以上結(jié)果表明，微生物菌劑處理三七種子不能增加地下部生物量積累，但能促進(jìn)地上部的生長(zhǎng)。

表6 微生物菌劑對(duì)三七生物量的影響
Table 6 Effects of microbial agents on the biomass of

處理Treatment地上部鮮重/(g/株)Overground freshweight地上部干重/(g/株)Overground dryweight 地下部鮮重/(g/株)Undergroundfresh weight地下部干重/(g/株)Underground dryweightT10.60±0.03 a0.10±0.02 a0.82±0.06 a0.17±0.02 aT20.62±0.02 a0.10±0.01 a0.85±0.04 a0.18±0.01 aT30.64±0.03 a0.10±0.01 a0.87±0.06 a0.18±0.01 aT40.63±0.04 a0.10±0.02 a0.88±0.10 a0.18±0.02 aT50.63±0.04 a0.10±0.01 a0.86±0.07 a0.17±0.02 aT60.66±0.03 a0.10±0.01 a0.89±0.07 a0.18±0.02 aCK0.58±0.02 a0.09±0.01 a0.98±0.04 a0.20±0.01 a

2.5 微生物菌劑處理三七種子對(duì)皂苷含量的影響

進(jìn)一步分析3種微生物菌劑處理對(duì)三七皂苷積累的影響(表7)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與CK處理相比，3種微生物菌劑處理除了對(duì)人參皂苷Re影響不顯著外，均能在不同程度上影響三七皂苷R、人參皂苷Rg、Rb、Rd及總皂苷含量的積累。其中T4和T6處理能顯著促進(jìn)皂苷R、Rg、Rb和Rd積累，較CK分別增加30.90%和21.97%、32.13%和21.16%、45.65%和47.35%、27.87%和30.14%；T1、T2和T3處理后皂苷含量與CK均無(wú)顯著差異，而T5處理僅人參皂苷Rb與CK有顯著差異，比CK增加了26.94%，其他類型皂苷含量與CK無(wú)顯著差異。此外，3種微生物菌劑處理對(duì)藥典規(guī)定的總皂苷含量趨勢(shì)同皂苷單體一致，總皂苷含量較CK增加比率從高到低依次為T4(36.96%)>T6(30.97%)>T5(16.79%)>T1(14.22%)>T3(12.43%)>T2(9.76%)。

同種微生物菌劑不同濃度處理對(duì)三七皂苷積累影響不同，低濃度微生物菌劑處理更有益于三七皂苷的積累。其中T1和T2處理間所有皂苷含量均無(wú)顯著差異，但低濃度T1處理更有益于R、Re、Rb、Rd及總皂苷含量的積累，較高濃度T2分別增加了15.24%、18.62%、7.08%、6.76%和4.12%；而T3和T4處理間除Re和Rb含量差異不顯著外，低濃度T4處理能顯著增加R、Rg、Rd及總皂苷含量的積累，較高濃度T3分別增加了21.36%、25.33%、30.05%和21.80%。

同種微生物菌劑不同劑型對(duì)三七皂苷含量積累影響也不同。T6處理更有益于R、Rg、Rb、Rd及總皂苷含量的積累，較T5增加了21.35%、6.41%、16.05%、19.16%和12.14%。

綜上所述，3種微生物菌劑處理三七種子均有利于三七皂苷含量的積累，且效果與微生物菌劑種類、濃度和劑型有關(guān)，其中以T4處理效果最優(yōu)。

表7 微生物菌劑對(duì)三七皂苷含量的影響
Table 7 Effect of microbial agents on the saponins content of

處理Treatment皂苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)/(mg/g) Saponins mass fractionR1Rg1ReRb1RdR1+Rg1+Rb1T11.89±0.10 cd7.20±0.71 bc1.72±0.23 a6.05±0.35 abc2.21±0.20 ab15.15±0.94 bcT21.64±0.64 d7.27±0.21 bc1.45±0.11 a5.65±0.38 bc2.07±0.08 ab14.55±0.63 cT32.06±0.10 bc6.79±0.20 bc1.54±0.10 a6.06±0.52 abc1.93±0.07 b14.91±0.80 cT42.50±0.21 a8.51±0.42 a1.50±0.22 a7.15±0.13 a2.51±0.11 a18.16±0.75 aT51.92±0.10 cd7.33±0.33 abc1.57±0.21 a6.23±0.40 ab2.14±0.25 ab15.49±0.81 bcT62.33±0.14 ab7.80±0.09 ab1.53±0.03 a7.23±0.10 a2.55±0.13 a17.37±0.16 abCK1.91±0.09 cd6.44±0.33 c1.38±0.11 a4.91±0.47 c1.96±0.11 b13.26±0.78 c

3 討 論

目前關(guān)于微生物菌劑在三七上的研究報(bào)道主要是以一年生以上三七為研究材料，而關(guān)于微生物菌劑直接處理三七種子后對(duì)其生長(zhǎng)及種苗品質(zhì)研究鮮有報(bào)道。較多研究表明微生物菌劑處理種子后對(duì)出苗有一定促進(jìn)作用，如仙豐168微生物菌劑、地衣芽孢桿菌及多粘類芽孢桿菌分別對(duì)番茄和伊犁絹蒿種子等有明顯促進(jìn)作用。本研究發(fā)現(xiàn)，微生物菌劑直接處理三七種子有利于三七后期的存苗，但對(duì)三七出苗效果不佳，這與范瑛閣等處理黃瓜研究結(jié)果一致。出苗效果不佳一方面可能與作物種類及菌劑使用濃度有關(guān)，馬賽等研究表明高濃度哈茨木霉菌劑(1.50×10CFU/mL、3.00×10CFU/mL)處理對(duì)大白菜種子出苗有抑制作用；另一方面可能與微生物菌劑-目標(biāo)作物間的定殖能力有關(guān)，良好的定殖能力是微生物菌劑發(fā)揮功能的前提，其不僅受自身生理特性、與土著微生物的相互作用及宿主植物基因型等生物因素的刺激，而且還受光照、降水、溫度和土壤類型等非生物因素的調(diào)控。

微生物菌劑具有促生和防病的作用，通過(guò)自身的固氮、溶磷和解鉀等能力或生命活動(dòng)產(chǎn)生的代謝物質(zhì)來(lái)促進(jìn)植株生長(zhǎng)和改善作物生長(zhǎng)狀況。劉雙等研究表明微生物菌劑的使用能提高玉米產(chǎn)量并改善農(nóng)藝性狀。本研究發(fā)現(xiàn)，3種微生物菌劑處理三七種子后均能促進(jìn)三七地上部生物量及株高的生長(zhǎng)，但對(duì)地下部生物量無(wú)顯著影響。研究還發(fā)現(xiàn)3種微生物菌劑對(duì)三七根腐病的防治效果能與對(duì)照組化學(xué)藥劑處理相當(dāng)，其中哈茨木霉菌劑對(duì)三七根腐病防治效果優(yōu)于其他2種菌劑且效果最為穩(wěn)定，這與前人研究報(bào)道一致。可能是微生物菌劑中的生防菌通過(guò)拮抗、競(jìng)爭(zhēng)和誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性等方式直接或間接地作用于病原菌，從而起到控制植物病害的作用。此外，近年來(lái)隨著微生物組學(xué)的快速發(fā)展，微生物菌劑中的生防菌還可通過(guò)調(diào)控土壤微生態(tài)環(huán)境來(lái)控制植物病害。Han等研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照相比，解淀粉芽孢桿菌B1408施用后土壤中的產(chǎn)黃桿菌屬(

Rhodanobacter

)、鏈霉菌屬(

Streptomyces

)及根瘤菌屬(

Rhizobium

)等有益菌群豐度增加，而鐮刀菌相對(duì)豐度降低，從而促進(jìn)黃瓜生長(zhǎng)，降低枯萎病發(fā)生率；Yu等研究也表明，施用哈茨木霉T4能顯著改變土壤微生物群落結(jié)構(gòu)，進(jìn)而間接抑制根腫病病原菌在土壤中的繁殖，從而有效防治根腫病的發(fā)生。本研究中哈茨木霉菌劑對(duì)三七根腐病的防治作用可能得益于哈茨木霉通過(guò)拮抗和競(jìng)爭(zhēng)等方式直接抑制根腐病病原菌生長(zhǎng)，同時(shí)還通過(guò)調(diào)節(jié)土壤微生態(tài)環(huán)境來(lái)抑制土壤中病原菌的增殖，從而達(dá)到穩(wěn)定的防效。

微生物菌劑因具有改善藥用植物品質(zhì)的作用被日漸重視。皂苷是三七的主要藥用活性物質(zhì)，也是衡量三七品質(zhì)的重要指標(biāo)，已有研究表明微生物菌劑的施用能提高一年生以上三七皂苷含量，而關(guān)于微生物菌劑處理三七種子后對(duì)種苗皂苷積累的影響目前尚無(wú)相關(guān)報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，3種微生物菌劑處理三七種子均能促進(jìn)三七總皂苷含量的積累，且同種微生物菌劑用量不同效果也不同，這與前人研究結(jié)果一致。本研究中以植物益生菌液1號(hào)200倍稀釋液和寧盾水劑100倍稀釋液處理效果最好，2種處理除人參皂苷Re與對(duì)照處理無(wú)顯著差異外，其他4種皂苷(三七皂苷R、人參皂苷Rb、Rg和Rd)含量均顯著高于對(duì)照，且2種微生物菌劑對(duì)不同皂苷含量積累促進(jìn)效果也不同，植物益生菌液1號(hào)200倍稀釋液有利于三七皂苷R和人參皂苷Rg含量積累，而寧盾水劑100倍稀釋液有利于人參皂苷Rb和人參皂苷Rd含量積累。綜上所述，本研究中微生物菌劑處理三七種子后可以促進(jìn)三七植株生長(zhǎng)同時(shí)還有利于三七藥用活性物質(zhì)皂苷的積累，使其品質(zhì)得到提升，但微生物菌劑使用濃度、次數(shù)和時(shí)間有待進(jìn)一步探究。

4 結(jié) 論

本研究利用3種微生物菌劑處理三七種子，評(píng)估了3種微生物菌劑對(duì)三七生長(zhǎng)、根腐病的防治效果以及對(duì)三七種苗品質(zhì)的影響。結(jié)果表明，微生物菌劑處理三七種子有利于三七皂苷含量的積累、存苗及地上部的生長(zhǎng)，其中皂苷含量以植物益生菌液1號(hào)200倍稀釋液處理效果最為顯著，而哈茨木霉菌劑處理對(duì)三七根腐病有較好的防治效果。因此在三七齊苗后可將植物益生菌液1號(hào)200倍稀釋液與哈茨木霉菌劑進(jìn)行交替或復(fù)配使用，但具體使用時(shí)間及用量還需進(jìn)一步探究。