牛冠狀病毒與大腸埃希氏桿菌混合感染的實驗室診斷

彭 龍，苗書魁，陸桂麗，汪 萍，夏 俊，米曉云，魏 婕，魏玉榮，沙依蘭·卡依扎，馬文戈*

（1.新疆農業大學動物醫學院，烏魯木齊 830052；2.新疆畜牧科學院獸醫研究所＆新疆畜牧科學院動物臨床醫學研究中心，烏魯木齊 830013）

犢牛腹瀉是牛場常見疾病，該病的高發病率與高死亡率是養牛業發展的重大阻礙[1，2]。 發病犢牛的臨床癥狀表現為體溫升高、食欲廢絕、精神不佳、糞便惡臭稀軟，常伴有不同程度脫水等[3，4]。造成犢牛腹瀉的原因較為復雜，通常為混合感染，防控難度增加。 常見的病原感染有冠狀病毒、輪狀病毒、病毒性腹瀉病毒、致病性大腸埃希氏桿菌等。其中冠狀病毒既可以感染呼吸道，也可以感染腸道，常導致犢牛腹瀉、成年牛冬痢和呼吸道疾病，攜帶病毒的牛長期帶毒，病毒顆粒隨著糞便排出體外后仍具有感染性。由于新疆的天氣冬季較長適合病毒存活，所以牛群易發生大范圍的感染。 致病性大腸埃希氏桿菌是引起多種嚴重疾病的主要致病菌，該菌借助食物、水源等傳播途徑進行傳播。 研究表明，與人類疾病相關的致病性大腸埃希氏桿菌在不少動物的糞便中被檢測到，嚴重威脅人類與動物的健康[5～8]。喀什地區某牛場發生犢牛腹瀉，通過臨床檢查并做流行病學調查后，初步懷疑犢牛死亡的原因為病毒或細菌感染所致。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病料

采集病死犢牛的新鮮糞便共8 份，健康犢牛糞便2 份，4 ℃冰盒保存，盡快轉移到實驗室進行后續檢測。

1.1.2 試劑

RNA/DNA 提取純化試劑盒、DNA 膠回收試劑盒（寶日醫生物技術有限公司），LB 固體培養基、麥康凱瓊脂（生工生物工程（上海）股份有限公司）。……