食用亞麻籽油中9種抗氧化劑的測定

◎ 趙俊美，崔瑞霞，謝珊珊

（河南中測技術檢測服務有限公司，河南 鄭州 450000）

亞麻籽油分為工業亞麻籽油和食用亞麻籽油，在我國西北地區，人們食用麻籽油已有悠久歷史。亞麻籽油是從胡科植物脂麻種子中榨取的脂肪油。根據胡麻的生長特性，適合在西部、北部高寒干旱地區生長。

食用亞麻籽油中營養成分豐富[1-4]，尤其是其中的反式脂肪酸含量、微量元素含量較高，有較高的推廣價值。作為食用油，如何更好地保存其中的有益物質成為近年來研究的重點和熱點[5-8]。抗氧化劑[9]可有效阻止食用亞麻籽油中的營養成分被氧化，目前常用在食用油中的氧化劑有9種，但是針對亞麻籽油中含有的抗氧化劑含量測定研究較少[10-12]。基于此，本文主要利用固相萃取結合高效液相色譜串聯二極管檢測器的方法，對亞麻籽油中9種抗氧化劑含量進行測定，以供參考。

1 材料與方法

1.1 材料和試劑

甲酸、甲醇、乙腈和正己烷（色譜級，Fisher公司）；

0.22 μm PTFE Hydrohpilic濾膜（默克公司）；PuriTest C18固相萃取柱（500 mg/6 mL，默克公司）；Robussil C18-L色譜柱（4.6 mm× 250 mm，5 μm）。

樣品為購于山西省晉城市各農貿市場和超市不同生產批號的亞麻籽油，共33批。

1.2 儀器

LC-Waters E2695-2996高效液相色譜儀（沃特世公司）；氮吹儀（日本Eyela公司）；高速離心機SIGMA1-15K（德國SIGMA希格瑪離心機公司）；MS205DU型電子天平（瑞典METTLER TOLEDO）；渦旋振蕩器（德國伊卡公司）；Milli-QDirect-Q10超純水機（美國默克密理博公司）。

9種抗氧化劑標準溶液信息如表1所示，濃度為1 000 mg·L-1，購自壇墨質檢，貨號80861JH，溶劑是乙腈，冷藏保存。

表1 乙腈中9種抗氧化劑標準溶液信息表

1.3 實驗方法

1.3.1 提取

準確稱取已混合均勻的食用亞麻籽油1.00 g，置于50 mL離心管中，加入10 mL乙腈，渦旋振蕩2 min，超聲10 min，3 000 r·min-1離心5 min，收集上清液于另一離心管中，離心管中油樣用10 mL乙腈重復提取1次，渦旋振蕩2 min，超聲10 min，3 000 r·min-1離心5 min，合并上清液，待凈化。

1.3.2 凈化

先將小柱依次用5 mL甲醇，再用5 mL乙腈活化平衡，然后將待凈化液傾入柱中，收集流出液，再用10 mL乙腈∶甲醇=2∶1（V/V）進行洗脫，并收集洗脫液，30 ℃水浴氮吹蒸發至干，用2 mL乙腈溶解定容，過0.22 μm PTFE Hydrohpilic濾膜后待測。

1.3.3 標準曲線繪制

把標準溶液用乙腈逐級稀釋成濃度分別為5 mg·L-1、10 mg·L-1、20 mg·L-1、50 mg·L-1、100 mg·L-1、200 mg·L-1、300 mg·L-1、400 mg·L-1和500 mg·L-1的混合標準溶液，繪制標準曲線。

1.3.4 高效液相色譜條件

色譜柱：Robussil C18-L，4.6 mm×250 mm，5 μm；流動相A：0.5%（V/V）甲酸水；流動相B：甲醇；柱溫：35 ℃；波長：280 nm；進樣量：10 μL；流速：1.0 mL·min-1；梯度洗脫見表2。

表2 梯度洗脫程序表

1.3.5 外標法計算結果含量

峰面積外標法計算食用亞麻籽油中抗氧化劑各組分含量。檢測結果保留3位有效數字。

2 結果與分析

2.1 加標實驗結果

設 置 添 加 水 平1、2、3分 別 為20.0 mg·kg-1、50.0 mg·kg-1、100.0 mg·kg-1，由表3可知，采取固相萃取結合液相色譜法檢測9種抗氧化劑，其加標回收率為91.8%～102.1%，RSD均小于6.7%，能夠滿足標準《實驗室質量控制規范 食品理化檢測》（GB/T 27404—2008）[13]中相關內容要求。實驗過程中發現TBHQ易降解，建議標準品現用現配，實驗樣品處理完及時上機檢測。

表3 9種抗氧化劑的加標回收率及RSD表

2.2 方法穩定性

以亞麻籽油為基質連續4 d做加標回收，以驗證本方法穩定性，結果如表3所示。結果表明，本方法在不同時內實驗方法相關系數在0.998以上，回收率、精密度均滿足要求，相對目前已有的檢測方法，該方法定性定量準確、重復性好、檢測結果可信、前處理快速，適合亞麻籽油中抗氧化劑含量的測定。

2.3 實際樣品的測定

2021年11月運用本研究方法對山西省33批次食用亞麻籽油進行檢測。通過對實際樣品的檢測結果分析，其中5批亞麻籽油檢出TBHQ，檢出濃度在12～116 mg·kg-1范圍內；有2批檢出BHA，在一定程度上抗氧化劑在食用亞麻籽油中存在添加。

3 結論

本實驗建立了食用亞麻籽油中9種抗氧化劑的前處理方法，并結合高效液相色譜對食用亞麻籽油中9種抗氧化劑的含量進行了測定。對于加標量分別為20.0 mg·kg-1、50.0 mg·kg-1、100.0 mg·kg-1的食用亞麻籽油樣品，回收率為91.8%～102.1%，RSD均小于6.7%，符合實驗要求，且方法穩定。