化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測乙肝病毒感染標(biāo)志物比較

羅純生，展秀君

（1.佳木斯市中心血站，黑龍江 佳木斯 154002；2.佳木斯市中醫(yī)醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154002）

乙型肝炎（hepatitis B）是臨床常見的一種傳染性疾病，會發(fā)展為肝硬化、肝衰竭、原發(fā)性肝癌，嚴(yán)重威脅患者的健康安全[1]。乙型肝炎病毒（以下簡稱乙肝病毒）為經(jīng)血液傳播疾病中比例最高的病原體，乙肝病毒標(biāo)志物是檢測乙型肝炎的重要指標(biāo)，臨床檢測方法種類較多，其中酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測操作簡單、快速，費用較低，是血站系統(tǒng)各單位普遍使用的檢測手段[2，3]。化學(xué)發(fā)光免疫分析法是免疫反應(yīng)和化學(xué)發(fā)光反應(yīng)相結(jié)合的檢測方法[4]。不同檢測方法檢測乙肝病毒感染標(biāo)志物結(jié)果存在差異[5]。本研究結(jié)合2020 年1 月-2021 年5 月在我站血液采集過程中篩查出的70 例乙肝病毒陽性樣本，比較化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測乙肝病毒感染標(biāo)志物的價值，為經(jīng)血傳染病檢測方法的選擇提供一定的參考依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020 年1 月-2021 年5 月在佳木斯市中心血站血液采集過程中經(jīng)實時熒光定量PCR 確診篩查出的70 例乙肝病毒陽性樣本為研究對象，采用隨機數(shù)字表法分為對照組和觀察組，各35 例。對照組男19 例，女16 例；年齡23～63 歲，平均年齡（44.20±3.11）歲。觀察組男20 例，女15 例；年齡24～65 歲，平均年齡（45.01±2.96）歲。兩組年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）,研究可行。本研究患者均知情且簽署同意書。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合乙肝病毒感染臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；②經(jīng)實時熒光定量PCR 確診[7，8]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并肝、腎、心腦血管系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病者；②合并惡性腫瘤者；③合并其他肝臟疾病者；④隨訪資料不完善者。

1.3 方法

1.3.1 對照組 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測，取凍存樣本3 ml，室溫復(fù)融，以2200 g/min 離心15 min，分離血清[9]，采用哈米爾頓-費米全自動酶標(biāo)加樣檢測系統(tǒng)（澳斯邦公司）進(jìn)行檢測，檢測試劑盒為北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，所有操作均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3.2 觀察組 采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測，采血方法同對照組，采用化學(xué)發(fā)光儀（天津博奧賽斯生物科技股份有限公司，型號：Axccd400T）與配套試劑盒測定乙肝病毒感染標(biāo)志物，所有操作均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行[10]。

1.4 觀察指標(biāo) 比較兩組乙肝病毒感染標(biāo)志物（HBeAb、HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBcAb）檢測陽性率、兩組乙肝病毒感染標(biāo)志物的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度。

1.4.1 陽性標(biāo)準(zhǔn)[11，12]當(dāng)HBsAb≥10 mIU/ml、HBsAg≥0.3 IU/ml、HBeAg≥0.5 PEIU/ml、HBcAb≥10 PEIU/ml、HBeAb≥1.5 PEIU/ml 時，可判定乙肝病毒感染性標(biāo)志物為陽性。

1.4.2 診斷效能[13]靈敏度=真陽性/（真陽性＋假陰性）×100%；特異度=真陰性/（真陰性＋假陽性）×100%。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用統(tǒng)計軟件包SPSS 21.0 對本研究的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料采用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料采用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗；P＜0.05 說明差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組乙肝病毒感染指標(biāo)檢出陽性率比較 觀察組HBeAb、HBsAg、HBeAg 陽性檢出率均高于對照組（P＜0.05），HBsAb、HBcAb 陽性檢出率高于對照組（P＞0.05），見表1。

表1 兩組乙肝病毒感染指標(biāo)檢出陽性率比較[n（%）]

2.2 兩組乙肝病毒感染診斷效能比較 觀察組乙肝病毒感染靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度均高于對照組（P＞0.05），見表2。

表2 兩組患者乙肝病毒感染診斷效能比較（%）

2.3 兩組低水平HBsAg 檢測結(jié)果比較 當(dāng)HBsAg 低水平檢測值≤1.00 ng/ml 時，觀察組乙肝病毒感染標(biāo)志物檢出率高于對照組（P＜0.05），見表3。

表3 兩組低水平HBsAg 檢測結(jié)果比較[n（%）]

3 討論

乙肝病毒會長期潛伏于人體內(nèi)，部分乙肝病毒攜帶者可能由于乙肝病毒被激活而發(fā)生乙型肝炎[14]。乙型肝炎具有反復(fù)發(fā)作、病情遷延不愈的特點，其發(fā)生與多種因素相關(guān)，并且近年來發(fā)病率呈上升趨勢，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[15]。乙型肝炎初期無顯著特點，容易出現(xiàn)漏診、誤診，耽誤病情的發(fā)展[16]。因此，早期診斷具有至關(guān)重要的作用。臨床常用的乙肝病毒感染檢測方法有化學(xué)發(fā)光免疫分析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗法等。但相關(guān)研究顯示[17]，酶聯(lián)免疫吸附試驗法在血清較低濃度下容易出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象，可能會影響臨床檢驗的準(zhǔn)確性。例如檢驗過程中抗體與抗體試劑產(chǎn)生差異可出現(xiàn)檢驗誤差，影響檢驗結(jié)果[18]。但化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測乙肝病毒感染志物的準(zhǔn)確性和價值方面尚存在爭議[19]。

本研究結(jié)果顯示，觀察組HBeAb、HBsAg、HBeAg 陽性檢出率均高于對照組（P＜0.05），HBsAb、HBcAb 陽性檢出率高于對照組（P＞0.05），表明采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法HBeAb、HBsAg、HBeAg 乙肝病毒感染標(biāo)志物陽性檢出率相對較高，可一定程度降低誤差。因此，化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測更具一定的優(yōu)勢。同時，觀察組乙肝病毒感染標(biāo)志物靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度均高于對照組（P＞0.05），該結(jié)論提示以上兩種方法對乙肝病毒感染標(biāo)志物診斷具有較高的診斷效能。與張守彩等[20]的研究結(jié)果相似。分析認(rèn)為，化學(xué)發(fā)光免疫分析法應(yīng)用免疫反應(yīng)技術(shù)和化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)，可以發(fā)揮互補優(yōu)勢的特點，并且對多種逃逸變異株有效識別，有助于避免人為因素對臨床檢驗結(jié)果產(chǎn)生的干擾，進(jìn)一步提高檢測的準(zhǔn)確性。此外，當(dāng)HBsAg 低水平檢測值≤1.00 ng/ml 時，觀察組乙肝病毒感染標(biāo)志物檢出率高于對照組（P＜0.05），提示采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測可有效避免酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測低水平HBsAg 的假陰性情況，進(jìn)一步確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗法在檢測乙肝病毒感染標(biāo)志物中均具有良好的診斷效能；但是相對而言，化學(xué)發(fā)光免疫分析法對乙肝病毒感染標(biāo)志物檢出陽性率更高，尤其是對于低水平HBsAg 具有較顯著的應(yīng)用優(yōu)勢。有利于提升乙肝病毒感染標(biāo)志物檢出率，減少經(jīng)血液傳播的機率，減少漏診、誤診情況，有助于患者及時診治，并進(jìn)一步防止病情的進(jìn)展。