RhCcEe 抗原配合性輸血在多次輸血患者中的應用

江 靈，王 華，王 靜，王雨涵，楊 倩，吳世梅，黃遠帥

（1.西南醫科大學附屬醫院輸血科，四川 瀘州 646000；2.雅安市人民醫院輸血科，四川 雅安 625000；3.四川大學華西醫院龍泉醫院檢驗科，四川 成都 610000）

Rh 是最復雜的血型系統，是除ABO 血型系統以外最重要的一個血型系統，共有54 個抗原，其中最具有臨床意義的是C、c、D、E、e 五種抗原[1]，而D抗原免疫原性最強。臨床血液系統疾病患者、呼吸與危重癥患者、消化道大出血及危重癥患者多數存在出血、貧血、凝血功能障礙等情況，需要反復多次輸血；而患者多次輸注Rh 表型不同的紅細胞后，紅細胞同種免疫問題隨之出現，增加不規則抗體產生概率，且產生的不規則抗體不僅會引起急性以及遲發性的溶血性輸血反應[2]，還會增加輸血科交叉配血的難度，延長配血輸血時間，影響患者輸血的安全性和有效性。因此，Rh 血型系統（RhCcEe）抗原配合性輸血對反復多次輸血的患者至關重要。本研究結合2017 年6 月-2020 年6 月在西南醫科大學附屬醫院接受多次輸血治療的155 例患者臨床資料，分析RhCcEe 抗原配合性輸血在多次輸血患者中的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017 年6 月-2020 年6 月在西南醫科大學附屬醫院接受多次輸血治療的患者155例作為研究對象。納入標準：①住院期間需要多次輸注懸浮紅細胞者；②不規則抗體篩查陰性；③無過敏反應史。排除標準：①住院期間輸注懸浮紅細胞的次數≤2 次；②首次檢測不規則抗體篩查陽性者。根據隨機數字表法將研究對象分為試驗組77 例和對照組78 例。試驗組女39 例，男38 例；年齡15～79 歲，平均年齡（52.10±19.60）歲；對照組中女33 例，男45例；年齡16～78 歲，平均年齡（53.60±18.70）歲。兩組年齡、性別比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準，患者及其家屬知情同意，并簽署知情同意書。

1.2 試劑與儀器 ABO/RhD 血型定型檢測試劑卡、IgM 抗D 血型定型試劑、Rh 血型分型檢測卡、抗球蛋白（IgG）檢測卡、抗球蛋白試劑（江蘇力博醫藥生物技術股份有限公司）；抗A，抗B 血型定型試劑（北京金豪制藥股份有限公司）；抗體鑒定細胞（上海血液生物醫藥有限責任公司）；ABO 血型反定型試劑盒、不規則抗體篩選紅細胞（長春博迅生物技術有限責任公司），所有試劑均為批檢合格產品且在有效期內使用。離心機（Baso 2005-1，臺灣BASO 企業有限公司）；KA-2200 久保田離心機（日本），微柱凝膠板式離心機（TD-3A，長春博研科學儀器有限責任公司），試劑卡孵育器（LB-37）（江蘇力博醫藥生物有限公司），全自動血型及配血分析系統（IH-1000，Bio-Rad 中國公司）。

1.3 方法

1.3.1 ABO、RhCcEe 血型抗原鑒定 患者輸血前采集標本進行輸血前血型鑒定，輸血時再次采集交叉配血標本進行血型復查，2 次鑒定結果一致者錄入系統。

1.3.2 不規則抗體篩選和鑒定 將患者標本離心后，取上清液25 μl 加入抗人球蛋白微柱凝膠卡中，分別加入不規則抗體篩選紅細胞或抗體鑒定細胞，37 ℃孵育15 min，離心等待結果。

1.3.3 交叉配血 試驗組進行ABO、RhCcEe 抗原配合性輸血，無法找到抗原一致的獻血者時進行相容性輸血，即按照Rh 表型匹配優先級別進行配血（表1），對照組僅進行ABO、RhD 相合性輸血。每次輸血后對患者進行輸血后療效評估和輸血不良反應的反饋，并在下一次交叉配血之前進行不規則抗體篩查，抗篩陽性者進行不規則抗體鑒定。

表1 Rh 表型匹配優先級

1.4 統計學方法 采用SPSS 20.0 統計學軟件進行數據分析。計量資料以（）表示，采用t檢驗；計數資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗。以P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 患者Rh 抗原表型分型情況 Rh 抗原表型分布為 CCDee（47.74%）、CcDEe（31.61%）、CcDee（9.03%）、ccDEE（6.45%）、ccDEe（3.87%）、CCDEe（1.30%），見表2。

表2 Rh 抗原表型分布情況（n）

2.2 試驗組不規則抗體檢測結果分析 試驗組不規則抗體陽性率為1.30%（1/77），低于對照組的10.26%（8/78），差異有統計學意義（P＜0.05）。對照組8 例不規則抗體分別為4 例抗-E、2 例抗-cE、1 例抗-Ce、1 例抗-Le。試驗組僅1 例抗-M。最早產生不規則抗體的為第3 次輸血后。試驗組未觀察到輸血不良反應發生，對照組有6 例輸血不良反應發生（主要是遲發性免疫性溶血反應和遲發性血清學反應），組間比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

輸血在臨床診療當中發揮著越來越重要的作用，尤其是對于血液系統疾病、消化道大出血以及危重癥大出血患者，輸血已經成為了一種不可替代的療法。在輸血診療中，ABO 和Rh 血型系統是最重要的兩大系統，具有臨床意義的抗原有A、B、D、C、c、E、e 等，抗原A、B、D 的抗原性最強，一直被列為常規檢測項目，因而抗-A、抗-B、抗-D 引起的輸血不良反應相對較少[3]。而其余抗原并沒有進行常規檢測，其免疫原性都較強，均可刺激機體產生相應的不規則抗體。血液系統疾病患者、消化內科大出血患者以及危重癥大出血患者對血液的需求量較大，需要反復多次輸血，從而增加抗原刺激機體產生不規則抗體的幾率。因此，為減少和避免輸血所致不規則抗體的產生，提高臨床輸血的安全性，為患者進行RhCcEe 抗原相合性輸血具有重要的臨床意義。

本研究中Rh 抗原表型主要分布為CCDee（47.74%）、CcDEe（31.61%）、CcDee（9.03%）、ccDEE（6.45%）、ccDEe（3.87%）、CCDEe（1.30%），受血患者Rh 系統5 個主要抗原分布頻率由高到低分別為D、e、C、c、E，與既往研究報道相符[4-7]。在研究期間，試驗組僅有1 例檢測出抗-M 的不規則抗體，屬于MNS 系統的常見抗體，多為自然產生，較少引起輸血不良反應。而同期對照組患者的抗篩陽性率為10.26%，不規則抗體經鑒定為4 例抗-E、2 例抗-Ec、1例抗-Ce、1 例抗Le，與文獻報道類似[8，9]。可以看出對照組患者未進行RhCcEe 抗原配合性輸血時，在反復多次輸血后產生不規則抗體的概率增加，產生的抗體主要是抗-E 和抗-Ec，這與Rh 抗原分布與對應不規則抗體產生的比例相吻合[10-12]，是因為我國人群中c、E 抗原的抗原性較強且頻率分布的陰陽性接近[13]，在反復多次輸血的情況下，高頻次的輸入c、E 抗原陽性的血液會刺激Ec 陰性患者產生相應的抗-E、抗-c 抗體，并且隨著輸注次數的增加，抗體的滴度也會逐漸增加[14-17]。此外，因患者體內不規則抗體一旦產生，只可能隨著時間的推移而逐漸降低，但不會完全消失。當再次輸血接觸到相應抗原，便會激活機體的“回憶性輸血反應”，使體內抗體效價迅速升高，造成嚴重的溶血反應[18]。本研究中試驗組未出現輸血不良發應，而對照組患者因反復輸注Rh 抗原不匹配的異體血液，引起紅細胞同種免疫反應，其發生輸血不良反應的概率明顯增加，以遲發性血清學反應和遲發性免疫性溶血反應為主。近年國內研究表明，針對Rh 血型系統的E、C、c、e 抗原所產生的不規則抗體是引起遲發型溶血性輸血反應[19-22]和新生兒溶血病等的主要原因[23-26]。

綜上所述，對需要反復多次輸血的臨床患者進行RhCcEe 抗原配合性輸血可有效地降低因輸血產生Rh 血型系統不規則抗體的概率，提高輸注紅細胞的有效性，同時還可以解決既往存在不規則抗體導致交叉配血不合的問題，降低“回憶性輸血反應”，是預防輸血患者發生Rh 免疫的重要策略，對保障用血安全和療效具有重要意義。