廣西地區男性不育患者精液質量與工作壓力的相關性研究

鐘慧芝 檀大羨 李征 黃霞梅

1.廣西壯族自治區生殖醫院 廣西 南寧 530029；2.廣西醫科大學第一附屬醫院 廣西 南寧 530021

在過去幾十年里，男性精液質量成下降逐漸趨勢，而男性不育發病率卻上升趨勢，這已成為一個重要的公共衛生問題。盡管男性精液質量逐年下降的原因還未能明確，但越來越多的研究表明不良的生活習慣，環境因素等會影響的男性精液質量[1]。

有研究表明，不同工作時間長度及不同工作壓力會對人的免疫系統和心血管等方面造成影響[2-4]。然而，工作壓力對男性精液質量存在的影響，目前尚未清楚。男性精液質量是評價男性生育能力的一項重要指標，同時也是人類輔助生殖技術（ART）成功與否的重要因素之一[5,6]。因此，本研究選取我院就診的廣西地區男性不育患者為研究對象，比較在不同程度的工作壓力下，患者精液常規參數、精子形態和精子頂體酶活性是否存在差異，進而判斷工作壓力對精液質量是否存在影響，為男性不育患者的治療提供相關依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2017年7月至2019年12月來我院就診的795例廣西地區男性不育患者為研究對象。納入標準：男性患者與其配偶在未避孕的情況下進行正常性生活1年仍為懷孕，排除性功能障礙、無精子癥、遺傳病、生殖系統嚴重疾病以及吸煙 酗酒不良生活習慣的患者。

1.2 問卷調查

設計調查問卷，對研究對象進行問卷調查和詳細的病歷資料收集。工作壓力問題內容包括：1覺得手上工作太多，無法完成；2感覺時間不夠用，必須爭分奪秒；3感覺沒有娛樂時間，只想著工作；4想著工作的事情，夜晚難以入睡；5感覺不能完美的完全工作；6感覺未能被上司和同事認可；7平時容易煩躁生氣；8與人交流時，喜歡打斷別人說話；9擔心工作做不好，會被開除；10擔心自己的經濟狀況。每個問題都有從未、偶爾、經常3個選項，其對應的分值分別是0分、1分、2分，將分值總和分為3個檔次：0～6分、7～12分和＞12分，分別對應3個等級的工作壓力：無壓力、壓力小和壓力大，并將所有研究對象按照工作壓力大小分為3組，即Ⅰ組，無工作壓力；Ⅱ組，工作壓力小；Ⅲ組，工作壓力大。

1.3 精液的采集和分析

精液常規分析按照世界衛生組織（WHO）所規定的方法和標準檢測要求患者禁欲2～7天，通過手淫方式取精，將收集到的精液標本放入37℃水浴箱中等待液化。采集的精液標本在1h內完成常規分析。采用西班牙計算機輔助分析系統（CASA）對精子濃度、精子活動率、精子前向運動等參數進行分析，同時測量室精液量。

1.4 精子形態

采用Diif-Quik 快速染色法，按照試劑盒說明對精子標本進行染色。在油鏡下觀察精子形態，觀察精子數不少于200條，并計算出精子正常形態百分率。

1.5 精子頂體酶活性的檢測

精子頂體酶活性檢測按照深圳華康生物醫學工程有限公司頂體酶試劑盒說明書中的改良Kennedy法進行：將精液標本充分混勻并調節精液濃度使得每個反應管的精子個數為7.5106 條，并且每份標本設置反應管和對照管，將抑制劑和反應液同時加入反應管和對照管內，并在對照管內先加入反應終止液，將反應管和對照管置于24℃水浴箱中反應1h后向反應管加入終止液，使其終止反應并用酶標儀進行比色，計算出結果。正常精子頂體酶活性為48.2～218.7μU/106。

1.6 統計學方法

采用SPSS23.0進行數據的統計分析。計量資料用表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用兩獨立樣本的t檢驗，檢驗水準設為 P＜0.05。

2．結果

2.1 患者的工作壓力及精液常規參數、精子形態和精子頂體酶活性比較

通過對795例患者進行的工作壓力問卷調查得出，其中Ⅰ組有69例，占研究人數的8.7%；Ⅱ組有386例，在研究人數的48.6%；Ⅲ組有340例，占研究人數的42.7%。統計顯示，三組患者年齡、精液量、精子濃度和精子正常形態百分率差異均無統計學意義,但Ⅲ組患者的精子活動率、前向運動精子、精子頂體酶活性顯著低于Ⅰ組和Ⅱ組，差異有統計學意義(P＜0.05)，如表1所示 。

表1 工作壓力程度精液參數比較（±s）

*表示P值＜0.05

Ⅰ組 Ⅱ組 Ⅲ組 F值 P值N=69 N=386 N=340年齡（歲） 34.45±4.47 34.85±5.94 34.08±5.47 1.7 0.183精液量（ml） 2.98±1.28 2.98±1.42 2.91±1.55 0.19 0.822精子濃度（106/ml） 67.58±57.82 63.85±50.80 65.80±55.06 0.208 0.812精子活動率（%） 51.91±16.47 48.92±16.34 43.69±12.96 15.06 0.000*前向運動精子（%） 43.63±20.84 38.99±15.80 34.77±15.53 22.54 0.000*頂體酶活性（μU/106） 137.61±27.78 124.70±43.21 115.77±42.91 9.24 0.000*精子正常形態（%） 4.50±2.04 4.26±2.1 4.25±1.8 0.66 0.510

2.2 各組中正常睡眠患者與難以入睡患者精液參數的比較

通過統計分析，結果顯示，Ⅲ組患者相比于Ⅰ、Ⅱ組患者，其夜晚難以入睡的比例明顯增高，所占各組比例分別為26.8%、15.9%和15.5%，差異有統計學意義（P＜0.05）。分別對各組正常睡眠患者與難以入睡患者精液參數進行比較，結果顯示相比于正常入睡的患者，難以入睡患者的精子活動率、前向運動精子和精子正常形態都成下降趨勢，并且Ⅰ組和Ⅲ組中，難以入睡患者精子正常形態顯著低于正常入睡的患者，差異有統計學意義（P＜0.05），如表2所示。

表2 3個組中正常睡眠患者與難以入睡患者精液參數的比較(±s)

表2 3個組中正常睡眠患者與難以入睡患者精液參數的比較(±s)

*表示P值＜0.05

精子正常形態（%）Ⅰ組N=69 正常睡眠 58 34.94±4.54 2.81±0.89 67.42±62.72 52.47±17.29 44.34±16.69 138.89±29.58 4.78±2.03難以入睡 11 31.91±3.17 3.87±2.35 68.40±19.17 49.89±14.29 40.83±14.86 131.00±14.56 3.82±1.81 t值 2.115 -1.475 -0.051 0.441 0.649 0.86 2.173 P值 0.038 0.169 0.959 0.661 0.519 0.393 0.033*Ⅱ組N=386 正常睡眠 326 35.29±5.89 2.95±1.35 62.70±53.25 52.31±12.35 43..29±12.70 123.92±43.94 4.33±2.24難以入睡 60 32.48±5.74 3.21±1.78 70.21±34.16 48.3.0±16.91 39.30±15.81 129.77±37.99 3.93±1.53 t值 3.409 -1.292 -1.052 1.753 1.846 -0.107 1.734 P值 0.001 0.197 0.293 0.080 0.066 0.228 0.086Ⅲ組N=340 正常睡眠 249 34.20±5.36 2.95±1.50 68.21±58.76 43.85±13.38 34.42±12.18 120.22.±48.31 4.4±1.86難以入睡 91 33.75±5.78 2.82±1.47 59.15±42.80 43.26±11.78 33.03±10.01 114.12±40.73 3.36±1.74 t值 0.665 0.681 1.345 0.373 0.973 1.16 2.628 P值 0.506 0.490 0.180 0.709 0.331 0.248 0.009*N年齡（歲） 精液量（ml） 精子濃度（106/ml）精子活動率（%）前向運動精子（%）頂體酶活性（μU/106）

3 討論

精液常規檢查已成為評估男性生育能力的一項最直接和最常用的指標，精液質量的優劣直接影響夫婦雙方自然受孕的成功率[7-9]。此外，精液質量的優劣同樣會對ART的結局造成影響[6]。然而，男性精液質量會受到吸煙，飲酒，熬夜等不良行為習慣以及諸多環境因素的影響[10,11]。通過本次研究，我們發現在所研究的對象中，將近一半的研究對象存在有工作壓力大的現象。并且，隨著工作壓力水平的增加，男性不育患者精子的活動率、前向精子百分率以及精子頂體酶活性呈下降的趨勢。這一結果與以往的研究結果是相似的。例如，有研究表明男性在壓力較大的環境中生活，其精子活力會降低[12]，Bigelow等研究發現不孕不育夫婦人群中，男性患者的精液質量與工作壓力水平呈負相關水平{58}。Jurewicz等[13]研究也發現工作壓力與精子直線速率、精子平均路徑速率成負相關，而與精子DNA碎片成正相關。還有研究顯示，工作壓力水平只影響男性的精液濃度和精子總數，而不影響精子的活率及精子前向運動[14]。本次的研究并未發現工作壓力水平對精液濃度及精子總數造成影響。這一結果很可能是由于本次的研究人群與之前的研究所選擇的人群不同所導致，本次所選擇的研究對象為男性不育患者，而Zou[14]等人所選擇研究對象為健康男性。工作壓力水平增加對精液質量造成負面影響，可能的原因是在高水平的工作壓力下，人體內分泌系統很大的幾率會造成紊亂[15]。有研究報道，在受到外界心里壓力的刺激下，體內糖皮質激素水平會大大增加，高水平的糖皮質激素會抑制睪丸中支持細胞合成和分泌睪酮，進而影響精子的正常發生，同時，高水平的糖皮質激素還會導致支持細胞和早期生精細胞的凋亡[16,17]。

此外，本次研究還發現隨著工作壓力水平的增加男性不育患者夜晚難以入睡的比例也顯著增加。有研究表明，工作壓力是影響睡眠質量的重要因素[18]。而低質量的睡眠質量會對人體諸多方面造成負面影響,例如高質量的睡眠是維持和修復機體的免疫功能的重要環節，而低質量的睡眠不僅會大大增加患心血管疾病的風險，而且還會對新陳代謝和神經系統造成負面影響[2,3]。此外，許多研究還顯示，低質量的睡眠對生殖系統也會造成負面影響。例如睡眠受到干擾的小鼠，其局部生精小管間質減少，生精上皮細胞變薄，精子活率及精子正常形態率降低[19,20]。此外，還有研究報道相比于熬夜人群，早睡的男性人群會有更好精液質量，而長期睡眠時間不足的男性，其精子濃度、精子活率及其精子正常形態率顯著下降，精子DNA碎片明顯增高[21,22]。本次研究也得到相似的結果，我們發現3個組的研究對象中，夜晚難以入睡患者相比于正常入睡患者，其精子活動率、前向精子百分率和精子正常形態百分率都呈下降趨勢，其中精子正常形態百分率顯著降低。這一現象表明，睡眠質量很可能是影響精子形態的重要因素，因為本次研究發現，只有夜晚難以入睡患者的精子正常形態顯著低于正常入睡患者的精子正常形態，并未因為工作壓力程度的不同而出現不同結果。因此，工作壓力不僅對精液質量造成負面影響，同時還對睡眠質量造成負面影響，而睡眠質量很可能通過另一種與工作壓力不同的機制對精液造成負面的影響，這一現象有待我們進一步研究。

本次研究也存在著不足，如樣本量的不足，研究的對象僅限于來我院就診的男性不育患者，而沒能獲健康男性數據，此外，本研究是通過調查問卷的形式取得研究對象的工作壓力情況，而未能完全避開其他一些混雜因素的影響，如不育患者本身可能存在著一定的心里壓力，社會壓力等，這些壓力很可能都會對工作壓力造成影響，因此會對所獲取的數據造成一定的影響。

綜述所述，盡管本次研究存在著一些不足的地方，但是通過本次研究可以發現本地區男性不育患者中，認為工作壓力大的患者比例較多，并且隨著工作壓力水平的增加，患者精子活動率、前向運動精子百分率和精子頂體酶活性均成下降趨勢；同時，隨著工作壓力水平的增加難以入睡患者比例也隨之增加，嚴重影響患者睡眠質量。而低質量的睡眠進一步對患者的精液質量造成負面影響。通過這一研究，為今后男性不育患者的治療提供新思路和理論依據。