堿性纖維母細胞生長因子與P16蛋白在乳腺癌組織中表達的臨床意義研究

李慧芳

（1.江蘇大學附屬武進醫院病理科，江蘇常州 213004；2.徐州醫科大學武進臨床學院，江蘇常州 213002）

乳腺癌是婦科女性常見病，調查顯示，我國乳腺癌發病率逐年增加，且呈年輕化趨勢[1]。近年來，隨著醫療技術進步，乳腺癌治療方案不斷優化，預后得到改善，但研究顯示，乳腺癌不良預后差異顯著。尤其是中晚期乳腺癌患者，預后較差，5年生存率僅30%[2]。因此，準確評估乳腺癌病情，對乳腺癌進行早期篩查和治療具有重要臨床價值。堿性纖維母細胞生長因子（bFGF）是具有加快腫瘤組織分裂增殖的癌癥相關蛋白分子，含146個氨基酸，既往已有報道顯示，bFGF表達水平與乳腺癌預后相關[3]。P16蛋白位于人染色體9p21，既往研究顯示P16蛋白屬細胞周期蛋白依賴性激酶4抑制因子，調節腫瘤細胞增殖[4]。本研究收集84例乳腺癌患者臨床資料，探討bFGF和P16表達的臨床意義，為臨床診療提供參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年7月至2021年7月江蘇大學附屬武進醫院收治的84例乳腺癌患者作為研究對象，患者年齡35~75歲，平均年齡（57.29±13.76）歲；病理分型：浸潤性導管癌69例，導管內癌10例，浸潤小葉癌5例；腫瘤直徑1~5 cm，平均直徑（3.27±1.33）cm；淋巴結轉移：有27例，無57例。本研究經江蘇大學附屬武進醫院倫理委員會批準。納入標準：①符合《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范(2015版)》[5]中乳腺癌的診斷標準，并經病理組織活檢確診，且均在江蘇大學附屬武進醫院接受治療；②患者年齡≥18歲；③臨床資料完整。排除標準：①妊娠或哺乳期患者；②有嚴重心、肺基礎疾病或肝、腎功能不全者；③既往接受乳腺手術治療者。

1.2 檢測方法 取乳腺癌和癌旁組織各1.0cm×1.0 cm×1.0 cm作為檢測標本，以蘇木精-伊紅常規染色，石蠟切片。采用全自動免疫組化染色系統（上海三崴醫療設備有限公司，國械備20160026號，型號：BenchMark ULTRA型）檢測bFGF和P16蛋白表達水平。bFGF試劑盒購自上海彩佑實業有限公司，P16試劑盒購自上海信裕生物科技有限公司。隨機選取10個視野，在高倍鏡（×400）下計數1 000個乳腺癌細胞進行結果判斷，分別按著色強度和陽性細胞數進行評分[6]，見表1。根據兩項評分結果，計算乘積，以評分≤1分為陰性（-），2~3分為弱陽性（+），4~6分為陽性（++），≥7分為強陽性（+++）。

表1 免疫組化染色結果

1.3 觀察指標 ①不同組織中bFGF和P16表達水平。包括癌組織和癌旁組織bFGF和P16表達水平。②比較不同bFGF表達水平患者病理特征。③比較不同P16表達水平患者病理特征。④比較不同bFGF和P16蛋白表達水平患者預后。所有患者均隨訪半年，記錄半年生存率。⑤分析bFGF和P16蛋白判斷患者短期預后價值。

1.4 統計學分析 采用SPSS 20.0軟件進行數據處理，計量資料以（）表示，兩兩比較行t檢驗；計數資料以[例(%)]表示，兩兩比較行χ2檢驗，預測價值采用受試者工作曲線（ROC）分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同組織中bFGF和P16表達水平比較 84例患者中，癌組織內bFGF陽性率顯著高于癌旁組織，P16陽性率顯著低于癌旁組織，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表2。

表2 不同組織中bFGF和P16表達水平比較[例(%)]

2.2 不同bFGF表達水平患者病理特征比較 84例患者中bFGF陽性者73例，陽性率為86.90%，其中弱陽性（+）19例，陽性（++）24例，強陽性（+++）30例。不同bFGF表達水平患者腫瘤分期和淋巴結轉移情況比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。不同bFGF表達水平患者病理分型和腫瘤直徑情況比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05），見表3。

表3 不同bFGF表達水平患者病理特征比較[例(%)]

2.3 不同P16表達水平患者病理特征比較 84例患者中P16陽性者48例，陽性率為57.14%，其中弱陽性（+）24例，陽性（++）15例，強陽性（+++）9例。不同P16蛋白表達水平患者腫瘤分期、腫瘤直徑及淋巴結轉移情況比較，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表4。

表4 不同P16表達水平患者病理特征比較[例(%)]

2.4 不同bFGF和P16蛋白表達水平患者預后比較 不同bFGF和P16蛋白表達水平患者半年生存率比較，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表5。

表5 不同bFGF和P16蛋白表達水平患者半年生存率比較[例(%)]

2.5 bFGF和P16蛋白判斷乳腺癌患者短期預后價值分析 分別以免疫組化檢測結果評分為檢驗變量，以半年內是否發生死亡為狀態變量，繪制ROC曲線，分析結果顯示，bFGF和P16判斷乳腺癌患者半年生存率的AUC分別為0.782和0.761（P＜0.05），見圖1、表6。

表6 bFGF和P16判斷短期預后的ROC分析

圖1 bFGF和P16判斷乳腺癌患者短期預后的ROC曲線

3 討論

目前臨床對乳腺癌的發病機制尚未完全闡明，但普遍認為腫瘤血管的生成增長是維持腫瘤增殖、促進腫瘤進展的重要條件[7]。而腫瘤生長相關蛋白因子的表達可調節血管通透性，促進纖維蛋白原在細胞基質沉淀[8]，為腫瘤新生毛細血管網絡的生長創造條件。因此，明確腫瘤相關蛋白因子將為腫瘤治療提供新的靶點。bFGF為多肽生長因子，既往已有關于bFGF調節腫瘤生長的報道，bFGF可通過誘導VEGF合成，并與細胞膜特異性受體FGFR結合，調節腫瘤生長[9]。本研究也顯示，癌組織中bFGF陽性率顯著高于癌旁組織，且不同bFGF表達水平患者腫瘤分期和淋巴結轉移情況比較，差異有統計學意義，提示bFGF在乳腺癌腫瘤病理進程中發揮重要作用。劉晨旭等[10]研究也證實bFGF可促進內皮細胞的有絲分裂過程，并通過降解細胞外基質，促進腫瘤細胞向瘤區外增殖遷移，形成新的腫瘤新生血管，促進腫瘤生長和轉移。bFGF具有胞吞作用，內化后的bFGF可通過調節RNA聚合酶1，促進乳腺癌腫瘤細胞G0期向G1期轉換，并經Ras、JAK/STAT細胞通路，調節乳腺癌分裂增殖[11]。因此，bFGF表達水平有助于評估腫瘤病理狀態，為判斷預后提供依據。

P16蛋白由3個外顯子和2個內含子構成，通過與CDK結合，抑制催化真核細胞由G1向S期轉化，從而達到抑制腫瘤細胞增殖的目的[12]。本研究顯示，癌組織中P16陽性率顯著低于癌旁組織，且不同P16表達水平患者腫瘤直徑和腫瘤分期比較，差異有統計學意義，說明P16具有抑癌作用，P16表達缺失可能引起腫瘤增殖加速，促進腫瘤生長。本研究還顯示，不同P16表達水平的患者半年生存率差異有統計學意義，bFGF和P16判斷患者短期預后的AUC值均超過0.75，且敏感度分別達0.909和0.818，提示P16還有助于判斷患者短期預后，這對于指導臨床進行早期干預具有重要作用。但本研究未對bFGF和P16進行定量檢測，還有待今后大樣本研究證實。

綜上，bFGF和P16表達水平與乳腺癌病理特征相關，監測bFGF和P16水平有助于評估腫瘤病情和判斷預后。