2個(gè)小蘑菇屬中國(guó)新記錄種

劉偉　陳言柳　張林平　梁俊峰

摘? 要：對(duì)采自廣東省的2份小磨菇屬Micropsalliota標(biāo)本進(jìn)行鑒定，采用形態(tài)鑒定和ITS序列比對(duì)相結(jié)合的方法，最終將這2份標(biāo)本鑒定為二瓣小蘑菇（Micropsalliota bifida R.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde）和亞白小蘑菇（Micropsalliota subalba Heinem. & Little Flower），前者的模式產(chǎn)地在泰國(guó)，后者在印度，二者在我國(guó)均為首次發(fā)現(xiàn)。二瓣小蘑菇主要的識(shí)別特征為子實(shí)體小型，菌蓋成熟后純白色;菌褶離生，不等長(zhǎng)，密，幼時(shí)白色，成熟后褐色，菌環(huán)白色;擔(dān)孢子橢圓形至杏仁形，光滑;褶緣囊狀體17.6～32.0??m×4.6～7.4??m，頂部有時(shí)分裂成兩瓣，簇生，光滑，薄壁，側(cè)生囊狀體缺失;菌蓋皮層由平伏的菌絲組成。亞白小蘑菇的主要識(shí)別特征為子實(shí)體小型，菌蓋表面被輻射狀纖毛;菌褶離生，不等長(zhǎng)，具小菌褶，密;菌環(huán)上位，白色;擔(dān)孢子橢圓形，光滑，薄壁;褶緣囊狀體25.6～56.5??m×7.1～12.6??m，成簇，棒狀至槌形，無(wú)色，光滑，側(cè)生囊狀體缺失，菌蓋皮層由平伏的菌絲組成。本研究提供了二者詳細(xì)的形態(tài)描述、顯微線條圖及與它們相關(guān)的系統(tǒng)發(fā)育樹，并分析其與相近種在形態(tài)上的區(qū)別。本研究結(jié)果增加了該屬在我國(guó)分布的種類和地理區(qū)域。

關(guān)鍵詞：小蘑菇屬;分類學(xué);分子系統(tǒng)學(xué);新紀(jì)錄中圖分類號(hào)：S324 ?????文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

Two New Records of the GenusMicropsalliota from China

LIU Wei CHEN Yanliu ZHANG Linping LIANG Junfeng

1. Lishui Baiyunshan Ecology Forest Farm， Lishui， Zhejiang 323000， China; 2. Research Institute of Tropical Forestry， Chinese Academy of Forestry， Guangzhou， Guangdong 510520， China; 3. Key Laboratory of State Forestry Administration on Forest Ecosystem Protection and Restoration of Poyang Lake Watershed / Key Laboratory of Bacteria Resources Conservation and Utilization in Jiangxi Province / Jiangxi Agricultural University， Nanchang， Jiangxi 330045， China

Abstract： In this paper， two samples ofMicropsalliota collected from Guangdong Province were classified and identified. A method of combining morphological comparison and gene sequence was used. Finally， the two specimens were identified as Micropsalliotabifida R.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde andMicropsalliota subalbaHeinem. & Little Flower， both of them are new record species in China.M. bifidais characterized in its small fruiting body， pure white pileus when mature， free and crowded lamellae， white when young， then brown when mature， white annulus， oval to almond-shaped and smooth basidiospores， hyaline and smooth cheilocystidia， sometimes bifid with two toe-like lobes， 17.6～32.0??m×4.6～7.4??m， absent pleurocystidia， and pileipellis composed of creeping hyphae.M. subalbais characterized in its small fruiting body， pileus surface with radial cilia， free and crowded lamellae， white and superior annulus， oval and smooth basidiospores， 25.6～56.5??m×7.1～12.6??m， clustered， hyaline， and smooth cheilocystidia， absent pleurocystidia， and pileipellis composed of creeping hyphae. Furthermore， the detail description， illustrations and phylogenetic tree are provided， and the differences in morphology with similar species are analyzed in this paper. To this end， the species and geographical regions of this genus in China are added.

Keywords： Micropsalliota; taxonomy; phylogeny; new records

DOI： 10.3969/j.issn.1000-2561.2022.04.006

小蘑菇屬（MicropsalliotaH?hn.）是蘑菇科（Agaricaceae）中較小的成員之一，與磨菇屬（Agaricus）親緣關(guān)系較近，但該屬的擔(dān)子果更小而細(xì)長(zhǎng)^[1]。截至2020年，世界范圍內(nèi)分布63種（http：//www.speciesfungorum.org/Names/Names.asp），大部分分布于熱帶地區(qū)。目前，我國(guó)共報(bào)道11種，即Micropsalliota arginophaeaHeinem.、M. brunneosperma var. cortinataHeinem.、M. furfuraceR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde、M. globocystisHeinem.、M. gracilisHeinem.、M. lateritiaHeinem.、M. megarubescensR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde、M. megasporeR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde、M. pseudoargineaHeinem.、M. pseudoglobocystisLi Wei & R.L. Zhao、M. rubrobrunnesceR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde ^[1-9]。

在對(duì)粵港澳大灣區(qū)大型真菌資源調(diào)查中，發(fā)現(xiàn)了2個(gè)小蘑菇屬中國(guó)新記錄物種，二瓣小蘑菇（Micropsalliota bifida R.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde）和亞白小蘑菇（Micropsalliota subalba Heinem. & Little Flower），擴(kuò)大了該屬在我國(guó)的分布種類和區(qū)域范圍，為其從熱帶區(qū)過渡至亞熱帶區(qū)提供了數(shù)據(jù)支持。

1 ?材料與方法

1.1 標(biāo)本采集

標(biāo)本于2020年8月采自廣東省惠州市羅浮山風(fēng)景區(qū)和南山公園，采集時(shí)拍攝新鮮子實(shí)體

生境照，用錫箔紙包裹放入采集盒，室內(nèi)記錄宏觀形態(tài)后，將標(biāo)本放入50℃的烘箱內(nèi)烘干，最后用自封袋保存。標(biāo)本保存于中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院熱帶林業(yè)研究所真菌標(biāo)本館（RITF）。

1.2 形態(tài)研究

宏觀形態(tài)依據(jù)野外觀察記錄和生境照片;微觀形態(tài)描述依據(jù)干燥標(biāo)本徒手切片觀察，使用5%的KOH溶液進(jìn)行樣品形態(tài)的復(fù)原和固定，1%剛果紅溶液進(jìn)行染色，隨機(jī)選取成熟的擔(dān)孢子、擔(dān)子、囊狀體和菌蓋皮層菌絲進(jìn)行測(cè)量和繪圖。描述孢子時(shí)以字母x表示平均值，Q表示長(zhǎng)寬比，Q_m表示Q±標(biāo)準(zhǔn)差，n表示測(cè)量個(gè)數(shù)^[1]。

1.3分子系統(tǒng)研究

采用Ezup柱式真菌基因組DNA抽提試劑盒（上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司）提取總DNA，ITS4/ITS5為目的片段擴(kuò)增引物^[10]，PCR產(chǎn)物送往上海生工生物科技有限公司進(jìn)行測(cè)序，所獲基因序列與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)并上傳。構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹所用的序列信息見表1。利用ContigExpress軟件進(jìn)行序列拼接^[11];使用在線MAFFT version 7軟件進(jìn)行序列比對(duì)^[12];BioEdit軟件用于序列的手動(dòng)調(diào)整^[13];借助RaxML v7.2.6軟件進(jìn)行最大似然（maximum likelihood，ML）分析，經(jīng)1000次重復(fù)獲得統(tǒng)計(jì)學(xué)支持^[14];利用MrModeltest 2.3軟件計(jì)算出序列矩陣的最佳模型為GTR+I+G^[15];采用MrBayes 3.1軟件進(jìn)行貝葉斯分析^[16]運(yùn)行一百萬(wàn)代;Hymenagaricus epipastus和三硫色蘑菇（Agaricus trisulphuratus）作為外類群^[1]。

2? 結(jié)果與分析

2.1形態(tài)學(xué)特征描述

2.1.1? 二瓣小蘑菇（Micropsalliota bifidaR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde，圖1）? 子實(shí)體小型;菌蓋直徑6～21 mm，幼時(shí)斗笠形或鐘形，成熟后凸鏡形至平展或平凹，幼時(shí)淡黃色，中間褐色，表面干，無(wú)毛或被白色細(xì)纖毛，具條紋，成熟后光滑，純白色，邊緣略內(nèi)卷，在KOH中變紅褐色;菌肉薄，白色，不變色;菌褶離生，不等長(zhǎng)，具小菌褶，密，幼時(shí)蒼白色、淺灰色至淡黃褐色，成熟后灰褐色、褐色至深褐色;菌柄長(zhǎng)30～46?mm，粗1～2?mm，圓柱形，白色，近光滑或稍被絨毛;菌環(huán)白色，膜質(zhì)，上位，易脫落;無(wú)明顯的氣味和味道。

擔(dān)孢子3.8～4.7??m×2.3～2.8??m，[x=（4.2± 0.21）?m×（2.6±0.14）?m，Q=1.4～1.9，Q_m=1.59±0.09，n=40]，橢圓形至杏仁形，有時(shí)頂部變厚，褐色，光滑，薄壁，無(wú)芽孔;擔(dān)子9.8～12.3??m×3.9～ 5.6??m，短棒狀，具4個(gè)小梗，有時(shí)具2個(gè)，無(wú)色，薄壁;褶緣囊狀體17.6～32??m×4.6～7.4??m，寬棒狀至近槌形，頂部有時(shí)分裂成兩瓣，簇生，無(wú)色，光滑，薄壁;側(cè)生囊狀體缺失;菌蓋皮層由平伏菌絲組成，菌絲直徑1.6～5.6??m，圓柱形，無(wú)色，薄壁;鎖狀聯(lián)合缺失。

生境：群生于闊葉林中地上或枯枝上。

分布：泰國(guó)（模式產(chǎn)地）、中國(guó)廣東。

研究標(biāo)本：2020年8月22日，廣東省惠州市羅浮山風(fēng)景區(qū)，23°15′54″N，114°3′27″E，海拔90 m，張錦花、潘雪玉（RITF4915，RITF4917）。

2.1.2? 亞白小蘑菇（Micropsalliota subalbaHeinem. & Little Flower，圖2）? 子實(shí)體小型;菌蓋8～18?mm，凸鏡形至近平展，中央具小的臍突，蓋表被輻射狀纖毛，白色至淺褐色;菌肉白色，薄，不變色;菌褶離生，不等長(zhǎng)，具小菌褶，菌褶中間略寬，密，白色至灰褐色;菌柄長(zhǎng)20～30?mm，粗1～1.5?mm，圓柱形，中空，褐色，被白色細(xì)微纖毛;菌環(huán)脫落，上位，白色;無(wú)明顯的氣味和味道。

擔(dān)孢子4.9～6.8??m×2.9～4??m，[x=（5.6± 0.40）??m×（3.3±0.19） ?m，Q=1.5～1.8，Q_m=1.69±0.07，n=40]，橢圓形，在KOH溶液中呈褐色，光滑，薄壁;擔(dān)子11.5～17??m×4.9～6.8??m，棒狀，具4個(gè)小梗，偶具2個(gè)，無(wú)色，具顆粒，稍厚壁（>0.5??m）;褶緣囊狀體25.6～56.5??m×7.1～ 12.6??m，成簇，棒狀至槌形，無(wú)色，光滑，稍厚壁（>0.5??m）;側(cè)生囊狀體缺失;菌蓋表皮由平伏菌絲組成，末端細(xì)胞近棒狀至近紡錘形，23.2～69.2??m×4.8～ 9.6??m，菌絲直徑2.7～16??m，無(wú)色，薄壁;鎖狀聯(lián)合缺失。

生境：群生于地上。

分布：印度（模式產(chǎn)地）、泰國(guó)、中國(guó)廣東。

研究標(biāo)本：2020年8月21日，廣東省惠州市南山公園，23°3′40″N，114°24′2″E，海拔30 m，陳言柳（RITF4594）。

2.2 系統(tǒng)發(fā)育研究

基于ITS序列，采用最大似然法和貝葉斯法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，二者形成的拓?fù)湟恢?，僅僅在支持率上略有不同，因此，本研究?jī)H展現(xiàn)最大似然法結(jié)果（圖3）。從圖3可見，本研究的自采標(biāo)本與泰國(guó)的標(biāo)本聚在一起形成獨(dú)立的分支，并獲得較高的支持率。自采標(biāo)本二瓣小蘑菇（M. bifida，RITF 4915和RITF 4917）與來自泰國(guó)的標(biāo)本二瓣小蘑菇（M. bifida）聚在一起，獲得較高的支持率（82%的靴帶支持和1.0的后驗(yàn)概率），并與來自泰國(guó)的標(biāo)本亞白小蘑菇（M. subarginea）有較近的親緣關(guān)系。自采標(biāo)本亞白小蘑菇（M. subalba，RITF4594）與來自泰國(guó)的標(biāo)本亞白小蘑菇（M. subalba）聚在一起，獲得96%的靴帶支持和1.0的后驗(yàn)概率，并與來自老撾的M. gracilis有較近的親緣關(guān)系。

3 ?討論

基于ITS的系統(tǒng)發(fā)育結(jié)果，自采標(biāo)本二瓣小蘑菇（M. bifida，RITF4915和RITF4917）和亞白小蘑菇（M. subalba，RITF4594）均屬于小蘑菇屬的類群，并分別與來自泰國(guó)的標(biāo)本亞白小蘑菇（M. subalba）和二瓣小蘑菇（M. bifida）聚在一起，其形態(tài)特征也與小蘑菇屬的特征相符合。

二瓣小蘑菇（M. bifida，RITF4915和RITF4917）與ZHAO等^[1]對(duì)其模式標(biāo)本的描述無(wú)明顯差異，該種的主要識(shí)別特征為菌蓋白色、光滑，擔(dān)孢子小及緣生囊狀體兩頭膨大^[1]。還有一些具有白色菌蓋的物種，如亞白小蘑菇（M. subarginea）、M. arginea、磚紅小蘑菇（M. lateritia）、擬白色小蘑菇（M. pseudoarginea）、白小蘑菇（M. alba），宏觀特征不易與二瓣小蘑菇區(qū)分。但M. subarginea有更長(zhǎng)、彎曲、圓柱形至近頭狀的緣生囊狀體（30～60??m×4～8??m）^[17];M. arginea有膨大近頭狀的緣生囊狀體^[1];M. lateritia有更長(zhǎng)的孢子（4.5～5.8??m×2.6～3.2??m）、近頭狀的緣生囊狀體（20～40??m×9～18??m）及菌蓋成熟后變紅褐色^[17];M. pseudoarginea的擔(dān)子更長(zhǎng)（17～19??m×6～6.7??m），有橢球形至寬棒狀的緣生囊狀體^[18];M. alba有更小的子實(shí)體、更大的擔(dān)孢子（5.8～6.6??m×3.3～3.6??m）及寬頭狀的緣生囊狀體^[19]。

亞白小蘑菇（M. subalba）的主要形態(tài)特征為子實(shí)體小型，菌蓋中央具小的臍突，表面被輻射狀纖毛，有3種小菌褶，擔(dān)孢子橢圓形，緣生囊狀體多頭狀，簇生，菌蓋皮層毛皮型，遇氨水呈橄欖灰色，遇KOH呈褐色。采自我國(guó)的標(biāo)本（RITF4594）與源自印度的模式標(biāo)本及ZHAO等^[1]采自泰國(guó)的標(biāo)本在菌柄顏色上略有差異，但在顯微特征上無(wú)明顯區(qū)別;并且基于ITS的系統(tǒng)發(fā)育樹結(jié)果顯示，自采標(biāo)本亞白小蘑菇（M. subalba，RITF4594）與泰國(guó)的標(biāo)本聚在一支，其序列同源性高達(dá)99%。

基于上述原因，將我國(guó)的標(biāo)本鑒定為亞白小蘑菇。M. subalba與M. gracilis具有較近的親緣關(guān)系，區(qū)別在于后者的菌蓋被淡紅褐色的鱗片或糠麩和更窄的緣生囊狀體（27～43??m×5～9??m）。

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