轉移抑制因子1和上皮型鈣黏著蛋白在結直腸癌患者癌組織及癌旁組織中的表達及臨床意義

于 建，李勁松，張景航，蘇 蔚

新鄉醫學院第一附屬醫院病理科，河南 新鄉 453100

結直腸癌（CRC）是現階段臨床較為常見惡性腫瘤之一，資料顯示，隨著人們飲食結構和生活習慣的改變，我國CRC發生率逐年升高，并呈現出年輕化的趨勢［1］。CRC具有發病隱匿的特點，導致早期診斷、治療仍進展有限，隨著腫瘤生物學的發展，生物學標志物為CRC的診治開辟了新途徑。新近研究指出，轉移抑制因子1（MTSS1）、上皮型鈣黏著蛋白（E-cadherin）均為惡性腫瘤效果因子，二者在結直腸組織中表達下調，可能是CRC發生的誘因［2-3］。基于此，本研究嘗試探究MTSS1、E-cadherin在CRC患者組織及癌旁組織中的表達及臨床意義，旨在為臨床診治本病提供參考，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年6月—2020年6月新鄉醫學院第一附屬醫院收治的120例CRC患者作為研究對象，其中女48例，男72例；年齡48～82歲，平均年齡（66.37±7.81）歲；體質量指數（BMI） 18.1～28.7 kg/m2，平均體質量（24.35±2.17）kg/m2。兩組患者一般資料具有可比性（P＞0.05）。

1.2 選例標準

納入標準：（1）符合《中國結直腸癌診療規范（2017年版）》［4］中CRC診斷標準。（2）首次確診。（3）認知功能良好，無溝通交流障礙。（4）無結直腸手術史。（5）患者知曉本研究，已簽署同意書。排除標準：（1）合并其他原發性惡性腫瘤。（2）采集組織標本前接受放化療治療。（3）凝血功能障礙患。（4）嚴重感染性疾病。（5）免疫性疾病。（6）嚴重心腦血管疾病。

1.3 方法

所有患者均于確診后通過手術或結直腸鏡活檢采集癌組織、癌旁正常組織（距癌旁＞5 cm）標本，組織標本大小約0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm，嚴格遵循無菌操作原則，組織標本置入凍存管內，并做好標記，于30 min內放入液氮中保存，由專業檢測人員統一檢測，采用熒光定量PCR法檢測癌組織、癌旁正常組織MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平，取組織標本，采用磷酸緩沖鹽溶液清洗后充分研磨，隨后提取總RNA，并測定RNA含量，將RNA反轉錄為cDNA后進行基因擴增，采用2-ΔΔCt法計算MTSS1、E-cadherin蛋白相對表達量。

1.4 觀察指標

（1）比較癌組織、癌旁正常組織MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平。（2）比較不同臨床資料CRC患者癌組織中MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平，臨床資料包括性別、年齡、BMI、CRC家族史、飲酒史、腫瘤分化程度、Dukes分期、浸潤深度、淋巴結轉移。BMI評估：低于18.5 kg/m2為過輕，18.5～23.9 kg/m2為正常，24.0～27.9 kg/m2為過重，28.0～32.0 kg/m2為肥胖，高于32 kg/m2為非常肥胖。腫瘤分化程度、Dukes分期、浸潤深度和淋巴結轉移均依據《中國結直腸癌診療規范（2017年版）》［4］中相關標準判定。（3）分析癌組織中MTSS1、E-cadherin蛋白表達與CRC臨床特征的相關性。

1.5 統計學方法

采用SPSS 22.0軟件進行統計分析，計數資料以例數描述，計量資料采取Bartlett方差齊性檢驗與Kolmogorov-Smirnov正態性檢驗，均確認具備方差齊性且服從正態分布，以均數±標準差（±s）描述，多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩組間比較采用SNK-q檢驗，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，相關性分析采用Spearman相關系數模型，均采用雙側檢驗，檢驗水準α=0.05，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 癌組織、癌旁正常組織MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平情況

CRC患者癌組織中MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平均較癌旁正常組織低，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 癌組織、癌旁正常組織MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平情況（±s）

表1 癌組織、癌旁正常組織MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平情況（±s）

組別癌組織（n=120）癌旁正常組織（n=120）t值P值MTSS1 0.82±0.24 31.56±10.48 32.123＜0.001 E-cadherin 0.38±0.08 0.56±0.12 13.672＜0.001

2.2 不同臨床資料癌組織中MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平情況

不同性別、年齡、BMI、CRC家族史、飲酒史CRC患者癌組織中MTSS1及E-cadherin蛋白表達水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；不同腫瘤分化程度、Dukes分期、浸潤深度、淋巴結轉移CRC患者癌組織中MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平比較，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 不同臨床資料癌組織中MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平情況（±s）

表2 不同臨床資料癌組織中MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平情況（±s）

臨床資料性別男（n=72）女（n=48）年齡（歲）＜60（n=45）≥60（n=75）BMI過輕（n=26）MTSS1t值或F/P值0.693/0.490 E-cadherin t值或F/P值1.462/0.147 0.81±0.22 0.84±0.25 0.37±0.06 0.39±0.09 0.681/0.498 1.436/0.154 0.83±0.24 0.80±0.23 0.40±0.08 0.38±0.07 0.581/0.629 1.472/0.226 0.80±0.22 0.36±0.07

續表2

2.3 癌組織中MTSS1、E-cadherin蛋白表達與CRC臨床特征的相關性

經Spearman相關性分析，發現CRC患者癌組織中MTSS1、E-cadherin蛋白表達腫瘤分化程度呈正相關，與Dukes分期、浸潤深度、淋巴結轉移呈負相關，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 癌組織中MTSS1、E-cadherin蛋白表達與CRC臨床特征的相關性

3 討論

CRC是一種惡性程度高、預后較差的惡性腫瘤，約50%的患者確診時已經發生轉移，超過30%的患者在術后出現復發，因此積極探索CRC的發病機制及早期診斷靶標，一直是臨床研究的重點問題［5］。

MTSS1是近年來發現的抑癌因子，本研究發現，CRC患者癌組織中MTSS1蛋白表達水平明顯低于癌旁正常組織，提示MTSS1可能與CRC發生有關。MTSS1也被稱作腫瘤抑制基因，其通過與肌動蛋白結合，發揮調控肌動蛋白纖維組裝及細胞骨架的動態的作用，且能調節細胞及細胞間基質的相互作用，在腫瘤細胞運動性調節中發揮抑制作用。相關研究［6］也證實MTSS1的表達可以抑制甲狀腺癌細胞增殖，并促進腫瘤細胞凋亡，從而控制腫瘤進展，延長患者生存時間。本研究還發現CRC患者癌組織中E-cadherin蛋白表達水平明顯降低，也可能參與CRC的發生過程。E-cadherin是一種鈣依賴性的跨膜蛋白，在維持上皮細胞之間黏附作用、維持細胞內信號傳導作用方面具有重要作用，其在正常細胞組織中應保持高表達水平，從而保持細胞之間的聚集功能［7］。文獻報道［8］指出，細胞組織中E-cadherin的表達水平降低可導致細胞復合體解散，增強細胞的擴散、轉移能力，是惡性腫瘤轉移和擴散的關鍵。由此可見，MTSS1、E-cadherin在CRC發生過程中可能發揮抑癌作用。

本研究通過對比分析，發現不同腫瘤分化程度、Dukes分期、浸潤深度、淋巴結轉移CRC癌組織中MTSS1和E-cadherin蛋白表達水平存在明顯差異，進一步通過相關性分析發現二者表達水平與腫瘤分化程度呈正相關，與Dukes分期、浸潤深度、淋巴結轉移呈負相關，提示癌組織中MTSS1、E-cadherin表達缺失可能是導致CRC腫瘤細胞增殖、浸潤、轉移的因素。本研究認為，MTSS1、E-cadherin在CRC中作為腫瘤抑制型基因，其表達水平越低，對腫瘤細胞增殖、轉移的抑制作用越低，腫瘤惡性生物學行為越活躍，因此通過相關措施上調MTSS1、E-cad-herin蛋白的表達，或許能發揮抑制腫瘤進展的作用，具有較大待開發潛力。

綜上可知，CRC患者癌組織中MTSS1、E-cadherin蛋白表達水平明顯降低，其表達水平與CRC腫瘤分化程度、Dukes分期、浸潤深度、淋巴結轉移密切相關，早期檢測MTSS1、E-cadherin表達水平可能有助于臨床評估CRC患者病情，具有較高臨床應用價值。