母種培養(yǎng)
母種培養(yǎng)是指用組織分離或孢子分離得到的菌種。母種培養(yǎng)基的制備通常用土豆洋菜培養(yǎng)基。配制1000ml培養(yǎng)基,用土豆200g、瓊脂18~20g、葡萄糖20g。
做法:先將土豆洗凈去皮,切成蠶豆粒小塊,放入1000ml水中煮沸30分鐘,用6~8層紗布過(guò)濾,補(bǔ)足損失水分。將瓊脂加入溶化后,加進(jìn)溶解的糖,補(bǔ)充水分至1000ml。以后分裝試管,每管裝量1/5~1/4,并加棉塞、包紙。在1.2kg壓力下滅菌30分鐘,趁熱擺成斜面。冷卻后置于25~27℃條件下觀察無(wú)雜菌即可接種。一支母種可轉(zhuǎn)管25~30支。
在無(wú)菌操作下接種的試管置于25℃左右恒溫條件下培養(yǎng),半個(gè)月左右菌絲可長(zhǎng)滿試管。培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)注意除掉雜菌污染的試管。培養(yǎng)好的母種移入冰箱,在4℃條件下保存半年,或室溫下保存3個(gè)月。
原種培養(yǎng)
原料可用木屑或棉籽皮。木屑培養(yǎng)基配方:木屑78%、麥麩或米糠20%、糖1%、石膏1%。棉籽皮培養(yǎng)基配方:用50kg棉籽皮加土豆浸出汁水3%(1.5kg土豆切成泥煮沸30分鐘的濾液),糖0.1%、硫酸鎂0.1%。
做法:培養(yǎng)料加水拌均勻,濕度以用手緊握料,指縫內(nèi)見(jiàn)水珠而滴不下來(lái)為宜,一般料水比1:1.2或1:1.3。然后裝瓶,裝瓶方法是邊裝邊將瓶輕輕地抖動(dòng),使瓶上下部緊密適中,裝至瓶肩部將料壓平,洗凈瓶口內(nèi)外的培養(yǎng)料,加棉塞、包紙捆好放進(jìn)高壓消毒鍋內(nèi)進(jìn)行滅菌,在1.5kg壓力下滅菌一小時(shí)。冷卻后,在無(wú)菌操作條件下接種。將試管中母種接入瓶中,一支母種可接4~5瓶原種,接種后置于25℃恒溫條件下培養(yǎng)一個(gè)月左右菌絲可長(zhǎng)滿瓶,即為原種。
栽培種培養(yǎng)
栽培種的制備實(shí)際上就是原種進(jìn)行一次擴(kuò)大培植?!?br>