5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑的高效液相色譜分析

葛家成，張永芳，閆欣欣，王麗穎，張立新*

（1.海利爾藥業集團股份有限公司，山東青島 266109；2.沈陽化工大學功能分子研究所，沈陽 110142)

氟氯蟲雙酰胺（Fluchlordiniliprole）是海利爾藥業集團股份有限公司自主創制的一種新型的苯甲酰胺類化合物，其IUPAC中文名稱為：3-溴-4′,6′-二氯-1-(3-氯-2-吡啶基)-3′-氟-2′-(甲基氨基甲酰基)-1H-吡唑-5-甲酰苯胺；CAS登錄號為：2129147-03-9；分子式為：C17H10BrCl3FN5O2；結構式如圖1。氟氯蟲雙酰胺作用機理獨特，對環境友好，對哺乳動物低毒，殺蟲譜廣，持效期長，對害蟲具有觸殺、胃毒作用，對多種鱗翅目害蟲高效，對纓翅目薊馬如蘭花薊馬、煙薊馬、棕櫚薊馬等也有較高的防治活性，并且合成工藝簡單，成本低，復配效果好，具有廣闊的市場前景[1-2]。有關利用高效液相色譜分析方法測定農藥有效成分的研究頗多[3-5]，但目前關于氟氯蟲雙酰胺制劑產品的分析方法尚未見報道。本文采用高效液相色譜法對5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑中的有效成分進行含量測定。該研究對生產中氟氯蟲雙酰胺有效成分的質量檢測具有指導意義。

圖1 氟氯蟲雙酰胺結構式

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

氟氯蟲雙酰胺標樣（純度98%），海利爾藥業集團股份有限公司；5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑樣品，沈陽化工大學；純凈水，娃哈哈集團有限公司；甲醇（色譜純），美國費希爾公司；冰乙酸（分析純），國藥集團化學試劑有限公司。

1.2 儀器與設備

Agilent 1260高效液相色譜儀（具有紫外檢測器），美國安捷倫公司、Diamonsil C18色譜柱（200 mm×4.6 mm（i.d.），5μm），北京迪馬科技有限公司；SG520OHE型數控超聲波清洗器，上海冠特超聲儀器有限公司；XSR205DU/A分析天平，梅特勒-托利多公司；50 mL容量瓶，北京欣維爾玻璃儀器有限公司；0.22μm有機相針式過濾器，上海安普實驗科技股份有限公司。

1.3 液相色譜操作條件

流動相：pH值3.0甲醇-酸水（70.0∶30.0，V/V）；檢測波長：230 nm；流速：1.0 mL/min；進樣體積：5μL；柱溫：（30.0±2）℃；氟氯蟲雙酰胺的保留時間為5.7 min。氟氯蟲雙酰胺標樣及5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑的高效液相色譜圖分別見圖2和圖3。

圖2 氟氯蟲雙酰胺標樣高效液相色譜圖

圖3 5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑高效液相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1 標準溶液的配制

用分析天平稱取氟氯蟲雙酰胺標樣0.040 g（精確至0.000 2 g），將稱取好的樣品放置在50 mL容量瓶中，以甲醇為溶劑，并用超聲波輔助使樣品溶解完全，定容至刻度線，用0.22μm有機相針式過濾器過濾到進樣小瓶中，備用。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑試樣0.800 g（精確至0.000 2 g）置于50 mL容量瓶中，其余操作步驟與1.4.1標準溶液配制相同。

1.4.3 測定

在1.3色譜操作條件下，等待數分鐘使儀器穩定。當基線基本平穩時，首先注入標準品溶液，接連注入幾次，每注入一次計算相應的響應值；當相鄰2針標準品之間響應值變化小于1.5%時，再進行下一步測定。分別測定標樣溶液、連續2針試樣溶液、標樣溶液。

1.5 數據分析

根據標樣溶液和試樣溶液的峰面積，按式（1）計算樣品中氟氯蟲雙酰胺的質量分數w。

式中：A1、A2分別為標樣和試樣溶液中氟氯蟲雙酰胺峰面積的平均值，mAU·min；m1、m2分別為標樣和試樣的稱樣質量，g；P為標樣中氟氯蟲雙酰胺的質量分數，%。

2 結果與討論

2.1 檢測波長的選擇

通過對氟氯蟲雙酰胺進行紫外掃描，發現在230 nm的波長條件下有較強的吸收峰，同時雜質的響應值小，因此將檢測波長定位為230 nm。

2.2 流動相的選擇

為了得到更準確的檢測結果，在反相色譜分析時采用C18色譜柱，流動相選擇甲醇-水時，氟氯蟲雙酰胺的色譜峰發生拖尾，用冰醋酸將水的pH調節為3.0時，被測物的峰形對稱性好。通過系列比例試驗，流動相為pH=3.0的甲醇-酸水（70∶30，V/V），流速1.0 mL/min時，氟氯蟲雙酰胺的峰形較好，可以得到很好的分離。

2.3 方法線性相關性的測定

用甲醇溶解標樣，分別配制0.2、0.4、0.8、1.2、1.6 mg/mL 5個濃度梯度的氟氯蟲雙酰胺標準溶液，在1.3描述的色譜條件下進行分析，以氟氯蟲雙酰胺標準溶液的質量濃度為橫坐標，對應的峰面積為縱坐標，獲得氟氯蟲雙酰胺的標準曲線。氟氯蟲雙酰胺的線性方程為y=10.176 5x＋0.329 7，線性相關系數R2=0.997 6。可以看出，氟氯蟲雙酰胺在測定的濃度區域范圍內具有良好的線性關系。

2.4 方法精密度的測定

在1.3色譜操作條件對同一樣品稱取6個試樣，方法精密度結果見表1。氟氯蟲雙酰胺的標準偏差為0.0237%，變異系數為0.47%，該分析方法的重現性好、精密度高。

表1 精密度試驗結果

2.5 方法準確度的測定

稱取一定量的氟氯蟲雙酰胺標樣加入已知質量的5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑樣品中，在1.3的色譜操作條件，對5個氟氯蟲雙酰胺懸浮劑樣品進行分析測定，計算回收率。試驗結果見表2。可以看出，氟氯蟲雙酰胺的平均回收率為98.79%，則該分析方法準確度高、重復性好。

表2 氟氯蟲雙酰胺的準確度試驗結果

3 結 論

本研究建立了高效液相色譜法快速測定氟氯蟲雙酰胺含量的分析方法。試驗結果表明，該方法線性關系良好、準確度和精密度較高，并且操作簡便、快速，是一種可行的分析方法，可以用于氟氯蟲雙酰胺制劑產品的有效成分的定量分析。