輪狀病毒NSP1和NSP3蛋白真核表達載體構建、表達及其調控Ⅰ型干擾素信號通路的功能

李鳳迪，王嘉瑞，劉新宇，黃海巖，葉麗萍，曾 艷，曹 欣

(1.西北民族大學生物醫學研究中心，生物工程與技術國家民委重點實驗室，蘭州 730030；2.西北民族大學生物醫學研究中心，甘肅省動物細胞技術創新中心，蘭州 730030；3.西北民族大學生命科學與工程學院， 蘭州 730030；4.吉林農業大學動物科學技術學院，吉林省動物微生態制劑工程研究中心，長春 130118)

【研究意義】輪狀病毒(Rotavirus, RV)屬呼腸孤病毒科，輪狀病毒屬，基因組由11段dsRNA組成，共編碼12種蛋白，包括6種結構蛋白(VP1～VP4,VP6及VP7)和6種非結構蛋白(NSP1～NSP6)[1-2]。其中結構蛋白構成病毒的3層衣殼，而非結構蛋白影響病毒的復制和基因表達調控過程[3]。輪狀病毒是引起幼兒和動物幼畜病毒性腹瀉的重要病原體[4-5]。結合RV的基因組結構和抗原性將其分為7個組即A～G，其中A～C組能引起人畜感染，D～G組主要引起動物感染，而A組輪狀病毒又是導致幼兒和動物幼畜腹瀉的主要病原體。人和動物在感染輪狀病毒后，輕者癥狀為嘔吐、厭食、腹瀉、脫水等，嚴重者可導致死亡[6-7]?！厩叭搜芯窟M展】NSP1蛋白由RV的第5段基因編碼，在RV蛋白質組中保守程度最低，不同來源毒株的NSP1差異較大。NSP1通過多種途徑拮抗干擾素應答。NSP1通過蛋白酶體途徑可使IRF3快速降解，缺乏IFN啟動子活性[8-9]。NSP3蛋白通常由RV7，8或9基因片段編碼，具體的基因片段與病毒株的種類有關，一般由313個氨基酸殘基組成，為非糖基化蛋白。Trujillo-Alonso等[10]研究發現輪狀病毒感染誘導了UPR(Unfolded protein response，未折疊的蛋白反應)，而UPR在翻譯水平上被病毒非結構蛋白NSP3抑制。這種反應似乎是……