膀胱癌病人癌組織中Dickkopf相關蛋白2的表達及與預后的相關性

李玉柱 夏連杰

膀胱癌是臨床中常見的泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤，其具有多病灶、易復發(fā)、易轉移等特點，預后較差，病死率較高[1-2]。Dickkopf相關蛋白2(DKK2)是近年來新發(fā)現(xiàn)的與膀胱癌緊密相關的一種癌基因，在細胞內可通過激活拮抗Wnt通路發(fā)揮抑癌活性[3-4]。有研究表明，DKK2表達與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展關系密切[5]。本研究探討膀胱癌病人DKK2的表達及與預后的關系。現(xiàn)將結果報道如下。

對象與方法

一、對象

2016年5月～2018年6月我院收治的行手術治療的膀胱癌病人86例，其中男54例，女32例；年齡42～76歲，平均年齡(52.75±10.72)歲。本研究經(jīng)本院醫(yī)學倫理委員會批準同意。納入標準：符合膀胱癌診斷標準[6]，并經(jīng)組織病理學檢查確診；符合手術指征并均擬行全膀胱切除治療；術前未進行放療、化療等治療；臨床資料完整。排除標準：心、肝、腎等重要臟器功能障礙；合并肝癌、胃癌等其他腫瘤疾病；妊娠或哺乳期女性；合并精神疾病或認知功能障礙；合并免疫系統(tǒng)或血液系統(tǒng)疾病。

二、方法

1.DKK2檢測：術中收集所有研究對象膀胱癌組織及癌旁組織(距癌組織≥5 cm)，并快速進行病理檢查。采取免疫組化法對膀胱組織DKK2表達進行檢測，標本石蠟包埋后切片，行HE染色和免疫組織化學染色；染色結果判斷[7]：陽性細胞數(shù)得分×染色強度得分≤3分為DKK2表達陰性，若陽性細胞數(shù)得分×染色強度得分>3分為DKK2表達陽性。

2.觀察指標：術后隨訪，截止時間2021年5月31日，所有膀胱癌病人術后以門診、電話等多種方式進行隨訪，每3個月1次，以研究對象失訪、死亡或隨訪時間截止為終點事件。收集影響膀胱癌病人預后的臨床資料，包括性別、年齡、體質量指數(shù)(body mass index，BMI)、腫瘤最大徑、吸煙、飲酒、臨床分期、淋巴結轉移、分化程度、脈管侵犯。

三、統(tǒng)計學方法

結果

1.膀胱癌組織、癌旁組織中DKK2表達情況比較見表1。結果表明，膀胱癌組織DKK2陰性表達率高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表1 膀胱癌組織、癌旁組織中DKK2表達比較

2.癌組織中DKK2表達與臨床病理特征的關系見表2。結果表明，不同性別、年齡、BMI、吸煙、飲酒、腫瘤數(shù)量膀胱癌病人癌組織中DKK2陰性表達率比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；腫瘤最大徑≥3 cm、臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移、低分化、脈管侵犯膀胱癌病人癌組織中DKK2陰性表達率分別高于腫瘤最大徑<3 cm、臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結轉移、中/高分化、無脈管侵犯病人，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表2 癌組織中DKK2在不同臨床病理特征中的表達情況(例，%)

3.影響膀胱癌病人預后的多因素分析見表3。86例膀胱癌病人術后隨訪期間共失訪5例，81例病人中19例死亡，病死率23.46%(19/81)；Cox回歸分析顯示，臨床分期、淋巴結轉移、分化程度、DKK2陰性表達是影響膀胱癌病人預后的獨立影響因素，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表3 影響膀胱癌病人預后的單因素、多因素分析

4.癌組織中DKK2表達與膀胱癌病人預后的關系見圖1。截止隨訪結束，DKK2陽性病人失訪1例，剩余18例，其中死亡1例，總存活率為94.44%(17/18)；DKK2陰性病人失訪4例，剩余63例，其中死亡18例，總存活率為71.43%(45/63)。DKK2陽性表達病人與DKK2陰性表達病人生存曲線比較，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=4.131，P=0.042)。

圖1 膀胱癌組織DKK2陽性表達、DKK2陰性表達病人生存曲線

討論

膀胱癌具有浸潤性生長的特征，手術切除后部分病人會出現(xiàn)復發(fā)、遠處轉移等，嚴重影響了病人的預后[8-9]。有研究表明，膀胱癌細胞的異常增殖、侵襲致使病灶浸潤性生長的惡性生物學行為是腫瘤復發(fā)、轉移的病理基礎，不利于病灶的徹底清除，直接影響了病人的預后[10-11]。有研究表明，DKK2表達與膀胱癌的增殖、侵襲相關，其參與病灶的生長[12]。

本研究結果表明，膀胱癌組織DKK2陰性表達率高于癌旁組織，提示膀胱癌組織DKK2陰性表達率較高。本研究結果表明，腫瘤最大徑≥3 cm、臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移、低分化、脈管侵犯膀胱癌病人癌組織中DKK2陰性表達率分別高于腫瘤最大徑<3 cm、臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結轉移、中/高分化、無脈管侵犯病人，提示DKK2表達與腫瘤最大徑、臨床分期、淋巴結轉移、分化程度及脈管侵犯病理特征具有一定的相關性。DKK2為DKK家族的主要成員之一，其已被證實與胃癌等多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關[13-15]。有研究表明，DKK2表達水平增加可使膀胱癌細胞的細胞周期、增殖及侵襲發(fā)生停滯，對膀胱癌細胞的生物學行為具有一定的調控作用[16]。Cox回歸分析顯示，臨床分期、淋巴結轉移、分化程度、DKK2陰性表達率是影響膀胱癌病人預后的獨立影響因素，提示在臨床中需逐一對以上危險因素進行防控。癌細胞的異常增殖是膀胱癌病灶內主要的生物學特征，其增殖過程受多種基因的調控，其中細胞周期素D1(CyclinD1)、癌癥myc基因(c-myc)等相關基因的產(chǎn)物可通過促進細胞周期由G0期向G1期的轉化，加速細胞周期的進程，促進細胞的增殖；增殖抑制基因(HSG)對癌細胞增殖具有抑制作用，可通過阻礙細胞周期進程，致使細胞增殖發(fā)生停滯[17-19]。拓志勇等[20]研究表明，DKK2與CyclinD1、c-myc的表達量呈負相關，與p16、HSG的表達量呈正相關。因此推測，DKK2表達可能是通過影響CyclinD1、c-myc等基因的表達影響癌細胞的增殖，影響預后。截止隨訪結束，DKK2陽性表達病人生存率高于DKK2陰性表達病人，提示DKK2陽性表達膀胱癌病人生存率較高，在臨床中對膀胱癌病人癌組織中DKK2表達檢測結果為陰性時，應給予高度警惕。

綜上所述，膀胱癌病人癌組織中DKK2呈異常陰性表達，DKK2與臨床病理特征及預后均具有一定的相關性，其水平檢測對膀胱癌病人預后評估具有重要參考價值。本研究的病例數(shù)較少，隨訪時間較短，后續(xù)還應聯(lián)合多中心擴大樣本容量、延長隨訪時間。