周圍型肺癌肺泡灌洗液中5種腫瘤標(biāo)志物的檢測意義

韓曉靜，唐 竹，陳云華，林 牧，劉木波，龔亞東，廖江榮

(貴州航天醫(yī)院：1.中心實(shí)驗(yàn)室；2.呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科，貴州 遵義 563000)

據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國肺癌發(fā)病率和死亡率居惡性腫瘤首位[1]。纖維支氣管鏡是目前診斷中央型肺癌的主要工具[2]，然而周圍型肺癌超出了氣管鏡視野，纖維支氣管鏡往往不能獲得組織標(biāo)本[3]，且存在肺穿刺活檢風(fēng)險(xiǎn)高、并發(fā)癥多等弊端[4]，常規(guī)診斷如影像學(xué)和刷檢、支氣管肺泡灌洗液等細(xì)胞學(xué)檢查方式陽性率低，確診困難，急需快速、早期診斷周圍型肺癌的檢測方法。現(xiàn)已證實(shí)血清學(xué)檢測肺癌相關(guān)腫瘤標(biāo)志物有助于輔助診斷和早期鑒別診斷并預(yù)測肺癌病理類型，目前推薦常用的原發(fā)性肺癌標(biāo)志物有癌胚抗原(CEA)、細(xì)胞角蛋白19片段抗原(CYFRA21-1)、鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原(SCCA)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)及胃泌素釋放肽前體(ProGRP)等[1]。除血清學(xué)檢查外，近幾年肺泡灌洗液(BALF)中腫瘤標(biāo)志物檢測的相關(guān)研究日益發(fā)展，本研究對周圍型肺癌患者BALF中5種腫瘤標(biāo)志物(CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE和ProGRP)水平進(jìn)行檢測，探討其在周圍型肺癌早期診斷中的意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年12月至2020年12月在本院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科就診，經(jīng)組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)確診的304例周圍型肺癌患者納入肺癌病例組，依據(jù)國際肺癌研究學(xué)會(huì)第八版TNM肺癌分期標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期83例，Ⅱ期125例，Ⅲ期96例；其中男179例，女125例；年齡42～79歲，平均(60.59±10.27)歲；包括腺癌184例，鱗癌99例，小細(xì)胞肺癌21例。另選取同期就診的112例患者為良性疾病組，其中男47例，女65例；年齡32～80歲，平均(59.73±11.49)歲；包括肺結(jié)核39例，塵肺17例，肺炎30例，慢性阻塞性肺疾病26例。兩組患者性別、年齡、疾病類型比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究測定通過本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意。

1.2儀器與試劑 Maglumi 800全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光測定儀，CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE和 ProGRP測定試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)，儀器與試劑均來自深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集 兩組患者簽署知情同意書，均行纖維支氣管鏡常規(guī)檢查，以2%利多卡因5 mL采用高流量氧氣霧化吸入，根據(jù)胸部CT所示病變部位，將纖維支氣管鏡遠(yuǎn)端楔于病變所在段支氣管開口處，彌漫病變則沖洗右中葉或左舌葉。注入37 ℃滅菌生理鹽水，每次20 mL，灌洗2次，13 Kp負(fù)壓吸引回收BALF，收集35 mL BALF，BALF經(jīng)雙層無菌紗布過濾后以1 500 r/min離心10 min取上清液待檢。

1.3.2化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測5種腫瘤標(biāo)志物 采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測兩組患者BALF中5種腫瘤標(biāo)志物CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE及ProGRP水平，嚴(yán)格按照試劑盒說明書在全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光測定儀中進(jìn)行檢測。5種腫瘤標(biāo)志物正常參考范圍：CEA≤5.09 ng/mL，CYFRA21-1≤3.3 ng/mL，SCCA≤2.5 ng/mL，NSE≤15.7 ng/mL，ProGRP≤69.2 pg/mL。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者BALF中5種腫瘤標(biāo)志物水平比較 肺癌病例組患者BALF 中 CEA、CYFRA21-1、 SCCA 、NSE及 ProGRP水平均高于良性疾病組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表 1。

表1 兩組患者BALF中5種腫瘤標(biāo)志物水平比較

2.2不同細(xì)胞類型、分期患者BALF中5種腫瘤標(biāo)志物水平比較 肺腺癌、肺鱗癌和肺小細(xì)胞癌患者BALF 中5種腫瘤標(biāo)志物水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。Ⅱ、Ⅲ期患者BALF 中5種腫瘤標(biāo)志物水平均高于Ⅰ期患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而Ⅱ、Ⅲ期患者間5種腫瘤標(biāo)志物水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表 2。

表2 不同細(xì)胞類型、分期患者BALF中5種腫瘤標(biāo)志物水平比較

2.3單項(xiàng)及聯(lián)合檢測5種腫瘤標(biāo)志物靈敏度、特異度比較 聯(lián)合檢測5種腫瘤標(biāo)志物的靈敏度和特異度分別為74.7%、84.8%，高于 CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE和ProGRP 任意單個(gè)標(biāo)志物的靈敏度和特異度，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表 3。

表3 單項(xiàng)與聯(lián)合檢測腫瘤標(biāo)志物靈敏度和特異度比較[ n(%)]

3 結(jié) 論

周圍型肺癌是指發(fā)生于肺段以下支氣管直到細(xì)小支氣管的肺癌，臨床癥狀出現(xiàn)較晚，以腺癌、鱗癌多見[5]，臨床診斷中常因獲取病理組織困難、早期無癥狀或癥狀輕、細(xì)胞學(xué)陽性率低等因素導(dǎo)致鑒別診斷困難，容易造成誤診、漏診。同時(shí)周圍型肺癌癥狀出現(xiàn)晚、起病隱匿，患者確診時(shí)大多是中晚期，生存期短，而早期診斷并采取正確治療可明顯延長生存期，因此周圍型肺癌的早期診斷極為重要。腫瘤標(biāo)志物的測定是一種無創(chuàng)、簡單、快速的檢測方法，可為周圍型肺癌早期鑒別診斷提供幫助，提高患者生存期。目前，血清學(xué)方法已在臨床中推廣應(yīng)用，常用的肺癌標(biāo)志物有CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE和ProGRP等。研究發(fā)現(xiàn)，檢測BALF中腫瘤標(biāo)志物的靈敏度、特異度較高，因BALF取自病變局部的支氣管肺泡內(nèi)，可直接獲得支氣管肺泡細(xì)胞釋放的物質(zhì)，與血清相比，BALF中腫瘤標(biāo)志物出現(xiàn)更早、濃度更高[6-8]，對肺癌的早期診斷更有意義。

血清中肺癌相關(guān)腫瘤標(biāo)志物水平的升高有助于輔助診斷肺癌[1,9]，本研究應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測患者BALF中CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE及ProGRP水平，結(jié)果顯示周圍型肺癌患者BALF中這5種腫瘤標(biāo)志物水平升高，提示測定BALF中CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE及ProGRP水平可為輔助診斷周圍型肺癌提供一定依據(jù)。進(jìn)一步分析不同分期的周圍型肺癌患者BALF 中腫瘤標(biāo)志物水平，發(fā)現(xiàn)BALF中5種腫瘤標(biāo)志物水平與病理分期有一定聯(lián)系，Ⅱ、Ⅲ期患者BALF 中5種腫瘤標(biāo)志物水平較Ⅰ期均有升高，但Ⅱ期與Ⅲ期之間無差異，提示 BALF中CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE和 ProGRP水平測定對早期周圍型肺癌的輔助診斷更有價(jià)值。目前，研究已明確腫瘤標(biāo)志物水平與腫瘤負(fù)荷和分期有一定關(guān)聯(lián)，此前有報(bào)道血清中ProGRP作為單個(gè)標(biāo)志物與SCLC分期呈正相關(guān)[1,10]，BALF 中CEA、CYFRA21-1、NSE、SCCA水平隨肺癌分期增加而升高[11]。最新指南推薦在首次診斷及開始治療前行腫瘤標(biāo)志物檢測了解其基線水平，監(jiān)測治療后的標(biāo)志物水平動(dòng)態(tài)變化可在腫瘤的療效監(jiān)測和預(yù)后判斷中發(fā)揮一定作用[1]，本研究尚未開展周圍型肺癌腫瘤標(biāo)志物CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE和 ProGRP的動(dòng)態(tài)監(jiān)測，以期后續(xù)研究中將加大樣本、增加病例、加強(qiáng)病例追蹤。

大量文獻(xiàn)報(bào)道，肺癌腫瘤標(biāo)志物與細(xì)胞類型(腺癌、鱗癌和小細(xì)胞癌)有密切關(guān)系，CEA在肺腺癌中升高最為明顯，靈敏度較高[1,12]；SCCA對肺鱗狀細(xì)胞癌有較高的特異度[6,13]；CYFRA21-1對非小細(xì)胞肺癌的診斷有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值[14]；NSE和ProGRP是診斷小細(xì)胞肺癌的首選指標(biāo)[1,10-11,15]。本研究發(fā)現(xiàn)周圍型肺癌患者BALF中5種腫瘤標(biāo)志物水平與細(xì)胞類型并無關(guān)系，與此前研究報(bào)道有出入，分析原因可能與納入研究的病例數(shù)少、病歷資料不全、檢測操作等有關(guān)。同時(shí)，本研究還比較 BALF 中 CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE和 ProGRP診斷周圍型肺癌的靈敏度和特異度，單獨(dú)檢測CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE和 ProGRP水平對診斷周圍型肺癌的靈敏度和特異度偏低，但聯(lián)合檢測這5項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物的靈敏度和特異度明顯提高，這與前期研究報(bào)道吻合。最新版中華醫(yī)學(xué)會(huì)腫瘤學(xué)分會(huì)肺癌臨床診療指南中明確指出，聯(lián)合檢測NSE、ProGRP、CYFRA21-1、CEA和SCCA等指標(biāo)可提高鑒別準(zhǔn)確率，本研究結(jié)果也驗(yàn)證了聯(lián)合檢測CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE和 ProGRP有助于輔助診斷和早期鑒別診斷周圍型肺癌。

綜上所述，周圍型肺癌患者 BALF 中 CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE和 ProGRP水平升高，且與病理分期相關(guān)，聯(lián)合檢測 BALF 中CEA、CYFRA21-1、SCCA、NSE和 ProGRP水平對早期周圍型肺癌的診斷具有重要的輔助意義。