參芍口服液對心肌梗死患者Wnt/β-catenin通路及預后的影響*

劉 帆，邸亞麗，紀 征

(唐山市工人醫院心內一科，河北 唐山 063000)

隨著醫療水平快速發展，急性心肌梗死的早期搶救成功率顯著提高，冠狀動脈介入治療成為拯救壞死心肌的最佳解決手段[1]，但遠期研究發現，心肌梗死的整體死亡率并沒有因此而降低，再發的不良心血管事件，包括急慢性心力衰竭、再發心肌梗死、室性心動過速、心室顫動等惡性心律失常、心臟破裂、腦卒中、心搏驟停等，仍是目前不可忽略的問題。因此，對于心肌梗死的預后評估是十分有意義的。在人類生長發育過程中存在一個極其保守的信號途徑，因以細胞外因子(Wnt)蛋白作為起始因子,故命名為Wnt信號通路。在胚胎發育和腫瘤發生領域中，關于Wnt通路的研究眾多,但在心血管方面的研究才剛剛開始。近年來，我國的中醫中藥發展迅速，特別是在心肌梗死方面的研究成果喜人。參芍口服液屬于純中藥復方制劑[2]，其主要成分有丹參、黃芪、當歸、赤芍、川芎等，具有活血化瘀、補氣通絡的功效，心內科主要用于治療冠心病、心絞痛，主要癥狀為胸悶刺痛、心悸氣短、倦怠乏力。Wnt/β-連環蛋白(β-catenin)信號通路是與胃癌等多種惡性腫瘤疾病和骨關節炎等炎癥性疾病的發生、發展密切相關的信號通路，通過上下游級聯機制參與多種生理、病理過程[3]。然而，目前尚不清楚Wnt/β-catenin通路是否可受參芍口服液影響，參與介導心肌梗死的疾病進展。前期研究發現，參芍口服液對大鼠心肌梗死區的愈合有良好的治療作用，可能是通過調控Wnt/β-catenin通路蛋白促進肌纖維母細胞、血管內皮細胞等增殖、遷移至梗死區，減輕心肌壞死的程度，從而改善心功能。目前，參芍口服液已應用于臨床多年，但其對心肌梗死愈合作用的分析研究較少。本研究旨在進一步探討參芍口服液對心肌梗死患者Wnt/β-catenin通路及預后的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2018年7月到2020年3月擬行冠狀動脈支架植入術的192例急性心肌梗死患者為研究對象，根據《急性ST 段抬高型心肌梗死診斷和治療指南》[4]做出急性心肌梗死診斷。患者納入標準：心肌梗死12 h內住院；患者及家屬知情同意；接受支架植入術治療；經心電圖等實驗室檢查及心肌酶輔助檢查確診為ST段抬高型心肌梗死；均為18歲以上成年人；臨床資料完整，能夠配合參與本次研究者。排除標準：合并腦出血、腦梗死、腦卒中等其他心腦血管疾病者；心、肝、腎等重要器官功能不全者；妊娠期、哺乳期婦女；18歲以下或70歲以上者；對本次治療藥物或其組成成分過敏及不耐受者；配合度不佳，不愿參與本次研究者。共入組192 例患者中男108例，女84例，平均年齡(62.41±4.73)歲，平均體重指數(BMI)為24.66±4.08。 將所有患者隨機平均分為對照組及試驗組。

1.2方法

1.2.1治療方法 所有患者術前均給予阿司匹林300 mg、替格瑞洛180 mg、阿托伐他汀40 mg口服，根據冠狀動脈造影結果給予相應的球囊擴張和支架介入治療，術后常規抗凝、抗栓，并使用他汀類藥物調脂。試驗組在此基礎上，加用參芍口服液10 mL 每天3次。

1.2.2研究指標 兩組患者術后每天抽靜脈血送檢，檢測肌酸激酶同工酶(CK-MB)及肌鈣蛋白(TNI)水平，記錄達到酶峰及恢復至正常的時間；于心肌梗死當天及術后7 d分別抽取兩組患者靜脈血，室溫血液自然凝固10～20 min，2～8 ℃條件下離心20 min左右(2 000～3 000 r/min)，仔細收集上清液，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測Wnt10b、β-catenin及T細胞因子4(TCF-4)水平，試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司，按照說明書操作，于波長450 nm的酶標儀上讀取各孔的OD值。于術后6個月電話隨訪，統計兩組的主要心臟不良事件(MACE)發生率，MACE包括：頻發心絞痛、嚴重心律失常、急性心肌再梗死、支架內血栓栓塞、心源性休克等[4-5]。

2 結 果

2.1兩組Wnt10b、β-catenin及TCF-4水平比較 兩組患者在急性心肌梗死當天Wnt10b、β-catenin及TCF-4水平均在較低水平，差異均無統計學意義(P>0.05)；而在術后7 d兩組以上指標水平均有顯著升高，對照組較試驗組升高更明顯，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組患者不同時間Wnt10b、β-catenin及TCF-4水平比較

2.2兩組患者CK-MB及TNI水平達到峰值、恢復正常時間比較 試驗組CKMB、TNI水平到達峰值時間較對照組明顯提前，恢復正常時間較對照組明顯縮短，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組患者CKMB及TNI水平達到峰值、恢復正常時間比較

2.3兩組MACE發生情況比較 經電話隨訪，192例患者中共發生MACE 26例，其中頻發心絞痛10例(前壁心肌梗死和下壁心肌梗死各5例)，支架內再狹窄6例(其中前壁心肌梗死4例，下壁心肌梗死2例)，嚴重的心律失常8例(其中下壁心肌梗死6例，前壁心肌梗死2例)，心源性休克死亡2例(均為前壁心肌梗死)。試驗組MACE發生率明顯低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組MACE發生情況比較

3 討 論

近年來，對于急性心肌梗死的診斷和治療有飛躍進展，盡早地應用抗凝、抗血小板藥物、盡早地打開罪犯血管，無疑是挽救壞死心肌的主要手段。盡管心肌梗死的早期處理積極正確，但仍面臨著比例較高的MACE，導致預后不良甚至致死性心臟病的發生[6]，積極有效的預測及治療受到更多臨床醫生的重視。前期動物實驗發現，成人中的沉默信號通路Wnt，在心肌梗死發生后，在梗死區重新開啟[7]，參與其中的一系列蛋白如信號蛋白Wnt10b、信使β-catenin、效應蛋白TCF-4等，都出現顯著的級聯放大效應，使成纖維細胞向梗死區遷移、增殖，激發形成新生血管[8-10]，促進梗死區愈合，預防心肌破裂，從而維持心臟功能。這種通路蛋白在心肌損傷后很快激增，高峰發生在心肌梗死后7 d左右[11]，而后隨著心臟的愈合恢復便逐漸下降，幾乎在28 d左右完成心肌愈合。本研究通過觀察心肌梗死患者的預后指標，即在心肌梗死后7 d左右，Wnt信號通路蛋白高水平表達，且應用參芍口服液后，通過積極上調此通路，可使CKMB及TNI水平達到峰值時間提前，恢復正常時間縮短，并可在遠期降低MACE發生率。且本研究中對照組MACE發生率為16.7%，這與嚴葉香等[12]的研究結果一致。因此，Wnt信號通路有望成為心肌梗死恢復的預測指標。

參芍口服液是本院制劑室以唐山工人醫院心內科專家的經驗處方為基礎，制備成純中藥復方制劑，成分有丹參、黃芪、當歸、赤芍、川芎等，根據處方中的各味藥材的理化性質進行提取工藝研究并制成口服液。采用L9(34)正交試驗法,以阿魏酸、丹參素和干浸膏得率為考核指標,優選醇提工藝、水提工藝和精制除雜工藝制成。此藥在心內科主要用于治療氣虛血瘀，脈絡閉阻所致的胸痹、心痛證的患者，且十分有效。現已證實，參芍口服液對于冠心病、高血脂、心絞痛患者有一定的療效[13-21]。且本研究也證實了參芍口服液對心肌梗死患者Wnt/β-catenin通路的作用效果明顯，對于心肌梗死的預后有積極作用。