急性腦卒中病人血漿組織蛋白酶S和血小板反應蛋白-1水平變化及其與預后的關系

黃天志，蔡 真，黃 戩

急性腦卒中是由腦部血流狀態異常引起的急性腦血管疾病，由腦血管破裂引發的腦卒中稱為出血性腦卒中，由腦血管阻塞導致的血管內循環障礙稱為缺血性腦卒中[1]。急性腦卒中病因復雜，血糖、血脂代謝異常均可引發，且發病急、致死率高，存活病人常伴有神經功能障礙等后遺癥，近年來已逐漸發展為我國成年人因病致殘的主要因素[2]。目前臨床對急性腦卒中尚無行之有效的治療方法，多以預防為主，因此，迫切需要尋找可以預測急性腦卒中發生的臨床指標。血漿組織蛋白酶S(Cat S)是一種半胱氨酸組織蛋白酶，Galibert等[3]研究發現血漿中Cat S的表達水平與心腦血管疾病密切相關。血小板反應蛋白-1(TSP-1)是細胞外基質糖蛋白家族中的一員，可以參與血管生成、血液凝固、細胞增殖等生物學過程，促進血栓的發生發展。相關研究表明，Cat S和TSP-1在心腦血管疾病病人血漿中高表達，但其與急性腦卒中關系的研究較少[4]。本研究旨在分析血漿Cat S、TSP-1水平與急性腦卒中預后的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年4月—2017年8月我院急診科收治的82例急性腦卒中病人作為研究組，其中，男40例，女42例；年齡43～72(58.71±6.23)歲；出血性腦卒中37例，缺血性腦卒中45例。另選取同期在我院體檢的健康志愿者82名為對照組，其中，男41名，女41名；年齡45～75(60.45±6.19)歲。兩組性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。研究對象同意配合研究，并簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標準 納入標準：①經全國心腦血管會議制定的急性腦卒中診斷標準[5]確診為急性腦卒中；②首次發病；③發病時間在48 h內。排除標準：①先天性中樞神經系統感染；②近期有手術、創傷史；③既往有腦卒中、外傷性腦出血；④合并過敏性疾病、精神疾病；⑤合并惡性腫瘤、糖尿病。

1.3 研究方法

1.3.1 臨床資料收集 測定研究對象體質指數(body mass index，BMI)、收縮壓(systolic blood pressure，SBP)、舒張壓(diastolic blood pressure，DBP)、空腹血糖(fasting blood glucose，FBG)、總膽固醇(total cholesterol，TC)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)水平。

1.3.2 血漿Cat S、TSP-1水平測定 抽取急性腦卒中病人治療前和治療2周后空腹靜脈血，經抗凝離心處理后，采用酶聯免疫吸附法測定血漿Cat S和TSP-1水平，試劑盒均購自上海酶聯生物科技有限公司。

1.3.3 神經功能、生活自理能力評估 分別采用美國國立衛生研究院卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale，NIHSS)和Barthel指數(BI)評估病人神經功能及生活自理能力。NIHSS評分范圍為0～42分，16～42分表示死亡概率較高，6～<16分表示預后恢復一般，0～<6分表示預后恢復良好；BI評分范圍為0～100分，60～100分表示生活能基本自理，20～<60分表示生活需要幫助，0～<20分表示生活完全不能自理。

1.3.4 隨訪 出院后對病人進行隨訪，以病人病情加重、有后遺癥或死亡判定為預后不良，以病人基本康復判定為預后良好。

2 結 果

2.1 兩組BMI、血壓及常規生化指標檢測結果比較 研究組BMI、收縮壓、舒張壓、FBG、TC和LDL水平明顯高于對照組(P<0.05)，HDL水平明顯低于對照組(P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組BMI、血壓、常規生化指標檢測結果比較(±s)

2.2 兩組血漿Cat S、TSP-1水平比較 研究組治療前血漿Cat S、TSP-1水平均明顯高于對照組(P<0.05)，研究組治療后血漿Cat S、TSP-1水平均低于本組治療前，但仍高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組血漿CatS、TSP-1水平比較(±s)

2.3 急性腦卒中病人治療前后NIHSS、BI評分比較 急性腦卒中病人治療后NIHSS評分明顯低于治療前(P<0.05)，BI評分明顯高于治療前(P<0.05)。詳見表3。

表3 急性腦卒中病人治療前后NIHSS、BI評分比較(±s) 單位：分

2.4 急性腦卒中病人血漿Cat S、TSP-1水平與NIHSS、BI評分的相關性 Pearson相關分析結果顯示，急性腦卒中病人血漿Cat S水平與NIHSS評分呈正相關(r=0.682，P<0.001)，與BI評分呈負相關(r=-0.595，P<0.001)；急性腦卒中病人血漿TSP-1表達水平與NIHSS評分呈正相關(r=0.598，P<0.001)，與BI評分呈負相關(r=-0.684，P<0.001)。詳見表4。

表4 血漿Cat S、TSP-1水平與NIHSS、BI評分的相關性

2.5 急性腦卒中病人不良預后發生的影響因素 單因素分析結果顯示，收縮壓、舒張壓、FBG、Cat S和TSP-1均是急性腦卒中病人預后的影響因素。多因素分析結果顯示，Cat S和TSP-1水平是急性腦卒中病人預后的影響因素。詳見表5。

表5 急性腦卒中病人不良預后的影響因素

3 討 論

急性腦卒中以腦出血和腦梗死較為常見，腦出血主要是由病人體內血壓異常導致腦動脈硬化或微血管瘤，一般在病人突然用力或情緒過于激動時發生破裂，致使發病；腦梗死主要是由病人體內血脂代謝異常導致腦動脈狹窄，內膜血脂沉積形成斑塊，阻塞血管，引起腦部缺血缺氧致使發病[6]。研究表明，血管內皮細胞損傷及血糖、血脂、血壓異常等均是引起心腦血管疾病的危險因素，對血栓形成起促進作用[7]。本研究結果顯示，急性腦卒中病人BMI、收縮壓、舒張壓、FBG、TC和LDL水平明顯高于對照組，HDL水平明顯低于對照組，提示BMI、收縮壓、舒張壓、FBG、TC、LDL水平升高和HDL水平降低可能與急性腦卒中發生有關。

Cat S具有較強的蛋白溶解活性，在機體免疫應答中起重要作用，可以呈遞抗原，降解動脈壁彈性蛋白和胞外基質分子，參與動脈硬化內膜及新血管形成[8]。近年來，研究發現Cat S高表達與機體炎癥反應及癌癥細胞的增殖、侵襲有關，可參與多種腫瘤疾病的發生發展，如肝癌、肺癌、胃癌等，但其自身分布有一定局限性，在人體正常動脈血管中低表達或幾乎無表達，在心腦血管疾病病人血管平滑肌細胞、內皮細胞、動脈內膜巨噬細胞及血漿細胞中可以檢測到高表達[9]。Cat S在體內高表達時可增加細胞外基質內生長因子的生物利用度，促進胞外基質降解，從而加劇腫瘤細胞增長[10]。Cat S受機體半胱氨酸蛋白酶抑制劑調控，在體內抗原呈遞、炎癥反應中起重要作用，調節血管炎癥反應，是胞外基質降解的執行者。劉楓荻等[11]研究表明將小鼠胰島細胞瘤模型敲除Cat S后，小鼠癌癥細胞增殖受到抑制，新血管生成減緩。高海等[12]研究表明，Cat S在老年冠心病病人血清組織中異常表達，表達水平與疾病嚴重程度呈正相關，提示Cat S水平變化可能作為預測老年冠心病發生發展的獨立影響因素。本研究結果顯示，研究組治療前血漿Cat S水平明顯高于本組治療后和對照組，提示血漿Cat S在急性腦卒中病人血漿組織中高表達。

TSP-1作為一種分泌型多分子鈣結合糖蛋白，最早被發現于活化的血小板內及炎癥反應過程中的內皮細胞中，研究表明，體內多種細胞如單核細胞、腫瘤細胞等均可產生TSP-1，在胚胎發育、新血管生成、細胞凋亡過程中發揮作用。TSP-1連接多種胞外基質蛋白、生長因子和細胞表面受體，調節特殊細胞反應，促進血小板聚集，參與癌癥細胞的生長和轉移[13]。近年來，多項研究表明，TSP-1在健康血管壁中低表達，在炎癥性血管疾病中高表達，推測TSP-1可能參與心血管疾病的發生發展[14]。Rojas等[15]研究表明，缺血性腦卒中病人血漿組織中TSP-1表達水平明顯高于對照組，考慮其可能與腦血管疾病發生有關。有研究表明，TSP-1可通過調節一氧化氮(NO)水平抑制血管炎癥反應，NO在血管生理學中起抗炎作用，可減緩血小板聚集，抑制炎性細胞黏附[16]。Jurk等[17]研究表明TSP-1可調節細胞因子參與血管炎癥反應，小鼠TSP-1缺失后，可加快動脈粥樣硬化斑塊的形成，使金屬基質蛋白酶9水平升高，加劇炎癥反應。TSP-1對血管疾病的影響可能是因為體內細胞膜通透性改變影響了蛋白質空間構象，導致血小板活性發生變化，引起凝血功能異常[18]。本研究結果顯示，研究組治療前血漿TSP-1水平明顯高于本組治療后和對照組，推測血漿TSP-1高表達可能促進急性腦卒中的發展。急性腦卒中病人治療后NIHSS評分明顯低于治療前，BI評分明顯高于治療前，提示急性腦卒中病人恢復良好。相關性分析結果顯示，急性腦卒中病人血漿Cat S、TSP-1表達水平與NIHSS評分呈正相關，與BI評分呈負相關，提示血漿Cat S和TSP-1水平可能影響急性腦卒中病人神經功能及生活自理能力恢復情況。Cox回歸分析結果顯示，Cat S和TSP-1水平是急性腦卒中病人預后的影響因素。

綜上所述，Cat S、TSP-1在急性腦卒中病人血漿中高表達，Cat S、TSP-1表達水平與NIHSS評分呈正相關，與BI評分呈負相關，是急性腦卒中病人不良預后發生的影響因素。推測血漿Cat S和TSP-1可能參與急性腦卒中的發生發展，且對預后有影響。