基于《中華醫(yī)典》探討金銀花用藥規(guī)律及核心組合藥物的現(xiàn)代藥理活性挖掘＊

劉 雙 ，耿 煒 ，張紅艷 ，王 凱 ，王 曉 ，董紅敬 ＊＊

（1.齊魯工業(yè)大學（山東省科學院）山東省分析測試中心 濟南 250014；2.齊魯工業(yè)大學（山東省科學院）藥學院 濟南 250300；3.山東省婦幼保健院 濟南 250014；4.山東中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院 濟南 250014）

金銀花（Lonicera Japonica Thunb.）又名忍冬花，是忍冬科忍冬屬植物忍冬的干燥花蕾或帶初開的花[1]。金銀花具有悠久的藥用歷史，“金銀花”一名出自《本草綱目》，由于忍冬花初開為白色，后轉(zhuǎn)為黃色，故得名金銀花[2]，金銀花具有清熱解毒、疏風散熱的功效，是一味臨床常用中藥。傳統(tǒng)中藥復方是我國的文化瑰寶，復方是多種中藥以配伍形式組成，中藥的配伍原則是古人的智慧結(jié)晶，而藥對是中藥配伍的基本形式，藥對是連接中藥與方劑的樞紐[3]。藥對雖組成簡單，但具有協(xié)同增效或配伍減毒等作用，且體現(xiàn)了歷代醫(yī)學家臨床用藥的經(jīng)驗總結(jié)[4]。

網(wǎng)絡(luò)藥理學是近年來的新興學科，是闡明藥物-成分-靶點-疾病之間的內(nèi)在聯(lián)系、揭示藥物的作用途徑的一門前沿學科[5]。網(wǎng)絡(luò)藥理學基于系統(tǒng)生物學和多向藥理學研究理論、高通量篩選和網(wǎng)絡(luò)分析及可視化技術(shù)等，系統(tǒng)地、整體地分析中藥復方[6-8]，有利于從分子機制層面闡明成分在預防或治療疾病方面發(fā)揮作用的途徑，揭示中藥多成分-多靶點-多途徑的效用特點[9]，綜合地反應(yīng)藥物對疾病網(wǎng)絡(luò)的干預機制，這與中藥整體性、系統(tǒng)性治療疾病的特點不謀而合，已成為分析中藥作用機制的有力工具[10-11]。如采用網(wǎng)絡(luò)藥理學探究黑逍遙散治療阿爾茨海默病的作用機制[12]，運用網(wǎng)絡(luò)藥理學挖掘巴西人參的核心功效[13]。因此，采用數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)挖掘金銀花的核心藥對并借助網(wǎng)絡(luò)藥理學預測核心藥對的現(xiàn)代藥理活性，可為金銀花藥對的發(fā)現(xiàn)及深入研究提供理論基礎(chǔ)。

圖1 研究思路流程圖

本文以《中華醫(yī)典》中含金銀花的處方為基礎(chǔ)，借助數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)和網(wǎng)絡(luò)藥理學技術(shù)分析含金銀花組方的用藥規(guī)律并分析核心藥物組合的現(xiàn)代藥理活性，通過細胞實驗驗證其現(xiàn)代藥理活性（見圖1），以期為傳統(tǒng)復方的研究與開發(fā)以及“老藥新用”提供新思路。

1 材料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源、數(shù)據(jù)篩選及處理

通過《中華醫(yī)典》數(shù)據(jù)庫（http://www.tcmbook.cn），以“金銀花”為關(guān)鍵詞，檢索含有“金銀花”的中藥復方，檢索時間為建庫至2021年10月25日。

給藥方式為口服的中藥復方被納入分析范圍。根據(jù)《中國藥典》2020版以及《中華本草》來規(guī)范各處方的中藥名稱。如：生地規(guī)范為地黃、熟地規(guī)范為熟地黃、生芪規(guī)范為黃芪等。

1.2 用藥規(guī)律分析

將篩選并規(guī)范好的中藥復方錄入Excel表格中，由雙人負責數(shù)據(jù)審核，以確保數(shù)據(jù)的準確性。借助數(shù)據(jù)透視表對中藥的使用頻次進行統(tǒng)計。將數(shù)據(jù)整理成Y和N的格式，即復方中含有這味藥標記為Y，不含有這味藥物標記為N，最后添加一組全為N的復方。借助SPSS Modeler 18.0軟件進行復雜網(wǎng)絡(luò)分析，通過源節(jié)點導入Excel格式數(shù)據(jù)，選擇字段面板中的類型節(jié)點，將數(shù)據(jù)類型設(shè)置為標記，角色設(shè)置為任意，連接數(shù)據(jù)節(jié)點與數(shù)據(jù)類型節(jié)點。選擇圖形面板中的網(wǎng)絡(luò)節(jié)點并插入，連接類型節(jié)點與網(wǎng)絡(luò)節(jié)點，分析條件設(shè)置為僅顯示true值標志，可顯示的最大鏈接數(shù)為55，“強鏈接下限”為30，“弱鏈接上限”為10，按照鏈接大小顯示強/正常/弱類別以顯示關(guān)聯(lián)應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)圖，其中，連線的粗細表示兩種藥物在同一復方中出現(xiàn)的頻率。通過SPSS Statistics 26.0軟件進行聚類分析，并借助Cytoscape軟件[14]實現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)可視化。

1.3 現(xiàn)代藥理活性挖掘

1.3.1 藥物作用靶點的獲取及其與疾病的相互作用關(guān)系

綜合分析頻次統(tǒng)計、復雜網(wǎng)絡(luò)、關(guān)聯(lián)規(guī)則分析結(jié)果，篩選出核心藥物組合。通過TCMSP數(shù)據(jù)庫[15]（https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.php）和TCMIP數(shù)據(jù)庫[16]（http://www.tcmip.cn/）獲取核心藥物的化學成分及作用靶點，并進行去重和規(guī)范，采用String數(shù)據(jù)庫[17]（https://cn.string-db.org/）查詢靶點蛋白對應(yīng)的基因名稱。

CTD數(shù)據(jù)庫（http://ctdbase.org/）是一個強大的、公開的研究資源，是用于描述化學物質(zhì)、基因和人類疾病之間關(guān)系的科學依據(jù)，CTD數(shù)據(jù)庫收錄了許多描述跨物種化學基因/蛋白質(zhì)相互作用和化學-疾病關(guān)系以及基因-疾病關(guān)系的精確數(shù)據(jù)[18]。借助CTD數(shù)據(jù)庫，分析所有靶點相關(guān)的潛在疾病；通過Excel中的數(shù)據(jù)透視表統(tǒng)計靶點的出現(xiàn)頻次，得到出現(xiàn)頻次較高的靶點作為關(guān)鍵靶點，利用Excel使關(guān)鍵靶點與疾病相互映射，利用Cytoscape軟件構(gòu)建“中藥-關(guān)鍵靶點-疾病”網(wǎng)絡(luò)并分析拓撲網(wǎng)絡(luò)，分析藥-靶-病之間的內(nèi)在關(guān)系。

1.3.2 生物功能富集分析

采用String數(shù)據(jù)庫分析關(guān)鍵靶點的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)（PPI），進一步篩選核心靶點，基于DAVID數(shù)據(jù)庫[19]（https://david.ncifcrf.gov/）對關(guān)鍵靶點進行GO富集分析及KEGG通路富集分析。

2 核心藥物組合的體外驗證

結(jié)直腸癌是常見的消化道惡性腫瘤之一，在惡性腫瘤中發(fā)病率位居第三，死亡率位居第二。HCT116細胞是1979年從一位患結(jié)直腸癌的男性病人中分離得到的，HCT116細胞已成為結(jié)直腸癌研究領(lǐng)域中被廣泛使用的模式細胞。綜合分析數(shù)據(jù)挖掘的結(jié)果，選擇HCT116細胞可作為研究對象進行體外驗證。

2.1 細胞、試劑與儀器

人結(jié)腸癌細胞（HCT116）；金銀花、甘草均夠自漱玉平民大藥房千佛山東路店，金銀花提取物、甘草提取物、金銀花-甘草提取物為課題組自制（取50 g金銀花，精密稱定，置1000 mL圓底燒瓶中，精密加入400 mL蒸餾水，放入電熱套中進行水浴加熱，提取1 h，濾過，濃縮，凍干，得金銀花提取物；取50 g甘草，精密稱定，置1000 mL圓底燒瓶中，精密加入400 mL蒸餾水，放入電熱套中進行水浴加熱，提取1 h，濾過，濃縮，凍干，得甘草提取物；取30 g金銀花和15 g甘草，精密稱定，置1000 mL圓底燒瓶中，精密加入400 mL蒸餾水，放入電熱套中進行水浴加熱，提取1 h，濾過，濃縮，凍干，得金銀花-甘草提取物）；RPMI-1640培養(yǎng)基（Gibco公司，批號：8121354）；PBS緩沖液（Solarbio公司，批號：20210526）；胰蛋白酶（Solarbio公司，批號：20210105）；胎牛血清（杭州四季青公司，批號：20050504）；HF90氣套式二氧化碳培養(yǎng)箱（上海力康公司）；Spark多功能微孔板檢測儀（瑞士TECAN公司）。

2.2 細胞培養(yǎng)

從-80℃的冰箱中取出凍存的HCT116細胞（購自中國醫(yī)學科學院基礎(chǔ)醫(yī)學研究所），置于37℃水浴鍋中迅速解凍，將解凍后的細胞轉(zhuǎn)移至15 mL離心管，加入適量RPMI-1640培養(yǎng)基混勻后進行離心（1500 r·min-1，5 min），棄上清液。向離心管中加入6 mL 10% FBS 1640培養(yǎng)基，吹打均勻后加到新培養(yǎng)瓶中，搖勻后置于5% CO2、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。待細胞長至80%以上后，棄上清液，加2 mL PBS進行清洗，加1 mL胰蛋白酶在培養(yǎng)箱中消化2 min。加入適量10% FBS 1640培養(yǎng)基吹打細胞使其從瓶底脫離，離心（1500 r·min-1，5 min）后棄上清液，加10% FBS 1640培養(yǎng)基6 mL，吹打均勻后放入新培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

2.3 MTT法檢測抑制率

取對數(shù)生長期的HCT116細胞，經(jīng)胰蛋白酶消化并反復吹打后制成單細胞懸液，將細胞濃度調(diào)整為5×104·mL-1，以每孔100 μL接種于96孔板中，置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。分別加入5% FBS 1640培養(yǎng)基配制的金銀花組（5 μg·mL-1、50 μg·mL-1、100 μg·mL-1、200 μg·mL-1、400 μg·mL-1）、甘草組（25 μg·mL-1、50 μg·mL-1、100 μg·mL-1、200 μg·mL-1、400 μg·mL-1）、金銀花-甘草組（25 μg·mL-1、50 μg·mL-1、100 μg·mL-1、200 μg·mL-1、400 μg·mL-1）并設(shè)置空白組（只含培養(yǎng)基）和陰性對照組（藥物濃度為0），每組各接種5孔，繼續(xù)放入培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)48 h、72 h。向每個孔中加入 50 μL MTT溶液（1.0 mg·mL-1）；繼續(xù)培養(yǎng)4 h，吸出上清液；加入100 μL DMSO，后用酶標儀在490 nm波長下測定各孔OD值。增殖抑制率按照以下公式計算。

3 結(jié)果

3.1 復方數(shù)據(jù)統(tǒng)計及用藥頻次分析

共統(tǒng)計金銀花組方108首，涉及189味中藥。通過分析發(fā)現(xiàn)，使用頻率在10以上的藥物有35味（表1），累計頻次825次，占總頻次的71.06%，屬于高頻中藥。其中，使用頻次前10位的分別是金銀花、甘草、當歸、連翹、赤芍、防風、黃芩、天花粉、皂角刺、牛蒡子。

3.2 關(guān)聯(lián)規(guī)則分析

如圖2所示，在復方中共有26味藥與金銀花配伍使用，其中，金銀花、甘草、當歸、連翹的相關(guān)性較強，在金銀花組方中經(jīng)常一起使用。Apriori算法是用于挖掘數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)規(guī)則的常用算法，該算法可對事務(wù)性數(shù)據(jù)庫進行挖掘，得到相互關(guān)聯(lián)的屬性，是多個數(shù)據(jù)挖掘算法的基礎(chǔ)算法[20]。在關(guān)聯(lián)規(guī)則中，支持度表示前項和后項同時在數(shù)據(jù)庫中出現(xiàn)的比率，置信度表示前項出現(xiàn)的條件下，后項出現(xiàn)的概率。在建模選項板下，選擇關(guān)聯(lián)中的Apriori算法，將Apriori節(jié)點與類型節(jié)點相連接，使用預定義角色，選擇最低條件支持度10%，最小規(guī)則置信度80%，最大前項數(shù)為5，對藥物進行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析。根據(jù)Apriori 算法，一共產(chǎn)生202條規(guī)則，主要的關(guān)聯(lián)規(guī)則見表2、表3、表4。其中金銀花-甘草聯(lián)合使用頻率最高，支持度為65.14%。

3.3 現(xiàn)代藥理活性挖掘

通過以上研究，發(fā)現(xiàn)金銀花-甘草聯(lián)合使用頻率最高，因此進一步以金銀花-甘草組合為例，通過網(wǎng)絡(luò)藥理學方法對“金銀花-甘草”藥對的藥理活性進行了深層次挖掘。

表1 高頻藥物使用統(tǒng)計表（頻次 ≥ 10）

3.3.1 藥物作用靶點的獲取及其與疾病的相互作用關(guān)系

基于TCMSP、TCMIP數(shù)據(jù)庫，建立金銀花、甘草的藥物靶點庫；采用CTD數(shù)據(jù)庫，獲取與藥物靶點相關(guān)的疾病，共有681個疾病，選取度值最高的前10個疾病及其相關(guān)靶點，借助Excel中的數(shù)據(jù)透視表插件，以獲得在較多疾病中出現(xiàn)頻次較高的靶點，稱為關(guān)鍵靶點，共53個（表5）。

圖2 金銀花組方的復雜網(wǎng)絡(luò)

表2 常用2味藥物組合關(guān)聯(lián)規(guī)則

表3 常用3味藥物組合關(guān)聯(lián)規(guī)則

表4 常用4味藥物組合關(guān)聯(lián)規(guī)則

分別將金銀花與甘草的作用靶點與疾病相互映射，整理、規(guī)范，借助Cytoscape軟件建立“中藥-關(guān)鍵靶點-疾病”網(wǎng)絡(luò)（圖3），網(wǎng)絡(luò)共包含65個節(jié)點，632條網(wǎng)線。

3.3.2 生物功能富集分析

基于String數(shù)據(jù)庫建立關(guān)鍵靶點的PPI網(wǎng)絡(luò)，置信度設(shè)置為0.4，借助Cytoscape軟件進行網(wǎng)絡(luò)可視化（圖4），分析PPI網(wǎng)絡(luò)，節(jié)點的大小和顏色深淺表示Degree值的高低，其中，AKT1、IL6、ALB為Degree值前3的靶點蛋白（Degree ≥ 49，ClosenessCentrality ≥ 0.94，BetweennessCentrality ≥ 0.027）。

表5 關(guān)鍵靶點

圖3 中藥-關(guān)鍵靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)

通過DAVID數(shù)據(jù)庫進行關(guān)鍵靶點的GO富集分析和KEGG通路富集分析（圖5、圖6）。GO富集分析包括生物過程（Biological process）、細胞組分（Cellular component）、和分子功能（Molecular function）3個部分。其中，關(guān)鍵靶點富集的生物過程條目包括RNA聚合酶II啟動子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控（Positive regulation of transcription from RNA polymerase II promoter）、凋亡過程的負調(diào)控（Negative regulation of apoptotic process）、細胞增殖的正調(diào)控（Positive regulation of cell proliferation）等；細胞組分條目包括細胞核（Nucleus）、細胞質(zhì)（cytoplasm）、胞質(zhì)溶膠（Cytosol）等；分子功能條目包括蛋白質(zhì)結(jié)合（Protein binding）、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合（Transcription factor binding）、蛋白激酶結(jié)合（Protein kinase binding）等。KEGG通路富集分析結(jié)果顯示，關(guān)鍵靶點主要富集于HIF-1信號通路（HIF-1 signaling pathway）、PI3K-Akt 信號通路（PI3K-Akt signaling pathway）、TNF信號通路（TNF signaling pathway）等。

圖4 PPI網(wǎng)絡(luò)

圖5 GO富集分析

圖6 KEGG通路富集分析

圖7 藥物組抑制率

4 核心藥物組合對人結(jié)腸癌細胞增殖的影響

與對照組（抑制率為0）比較，金銀花組、甘草組和金銀花-甘草組，處理細胞48 h后，能對人結(jié)腸癌細胞的增殖產(chǎn)生抑制作用，且金銀花組較甘草組以及金銀花-甘草組的抑制作用更強，隨著濃度的升高，抑制作用加強（圖7A）；處理細胞72 h后，金銀花組和甘草組的抑制率較48 h處理后的金銀花組和甘草組有所降低。72 h處理后的金銀花-甘草組的抑制率較48 h處理后的金銀花-甘草組的抑制率高（圖7B），說明不同劑量的金銀花-甘草藥對處理HCT116細胞72 h，對HCT116細胞增殖有較好的抑制作用。金銀花-甘草組對HCT116細胞增殖的抑制作用呈劑量依賴性，隨著時間與金銀花-甘草藥對濃度的上升，對細胞增殖的抑制作用逐漸增強，且濃度越高、時間越長，抑制作用越強。

5 討論

分析傳統(tǒng)復方的用藥規(guī)律有利于總結(jié)和繼承名老中醫(yī)經(jīng)驗。《中華醫(yī)典》是全面系統(tǒng)整理中醫(yī)古籍而制成的一本中國歷代醫(yī)學古籍。在《中華醫(yī)典》收錄的含金銀花復方中，金銀花為君藥或臣藥以發(fā)揮清熱解毒功效，如銀花解毒湯、清熱解毒湯中金銀花作為君藥，苦參湯、闌尾化瘀湯中金銀花作為臣藥。當前，金銀花藥對的挖掘研究較少，而藥對是復方的最基本形式；用藥頻次分析結(jié)果顯示，甘草在金銀花組方中出現(xiàn)的頻次較高，故兩者有望成為新藥對。甘草號稱中草藥之王，善解百藥之毒。近年來，與甘草組成藥對的研究較多，比如芍藥-甘草藥對[21]、麻黃-甘草藥對[22]、大黃-甘草藥對[23]、苦參-甘草藥對[24]、桔梗-甘草藥對[25]等。甘草固有調(diào)和諸藥之功效，但其亦有補氣益中、緩急止痛、清熱解毒等功效，甘草的功效有且不限于調(diào)和諸藥。金銀花與甘草合用，一方面可以降低金銀花的毒副作用；另一方面，金銀花和甘草二藥的藥力溫和，對熱度較勝者，僅使用金銀花或甘草，不能達到理想的效果，兩者合用，不僅可以增強金銀花清熱解毒的功效，還可發(fā)揮甘草的甘緩護胃的功效，緩和金銀花甘寒對脾胃的影響。

關(guān)聯(lián)規(guī)則顯示，金銀花-甘草、金銀花-甘草-當歸、金銀花-甘草-當歸-防風分別是3類組合組中支持度最高的組合。含有金銀花和甘草的組方多為清熱解毒方，如疏風清熱湯、驅(qū)風散、消毒散等。臨床應(yīng)用發(fā)現(xiàn)，金銀花和甘草聯(lián)用在治療前列腺炎方面具有較好療效，甘草中的甘草甜素和甘草次酸具有抗炎抑菌作用，黃酮類成分對平滑肌有解痙攣作用，利于消炎排尿；金銀花中的有機酸、黃酮類成分等具有抗菌、抗炎作用，兩者聯(lián)用，對前列腺炎療效顯著，可迅速緩解患者病痛，利于恢復[26]。金銀花、甘草、當歸聯(lián)用，金銀花清熱解毒，疏風散熱，當歸補血活血，潤腸通便，而甘草可以清熱解毒，調(diào)和藥性，三者可以清熱解毒，補血活血；在三味藥的基礎(chǔ)上，再添防風以祛風解表，勝濕止痛。

現(xiàn)代藥理活性研究發(fā)現(xiàn)，金銀花、甘草的藥物靶點與腫瘤（Neoplasms）、消化系統(tǒng)疾病（Digestive System Diseases）、心 血 管 疾 病（Cardiovascular Diseases）等有關(guān)，展現(xiàn)了中藥廣泛的藥理活性，體現(xiàn)了中藥多靶點的作用特點。目前，金銀花或甘草單獨使用的藥效研究較多，比如研究人員從凍干的金銀花中提取分離出多酚類成分，發(fā)現(xiàn)多酚類成分對人組織淋巴瘤細胞具有抑制作用[27]；甘草中的查爾酮A可以通過增加細胞內(nèi)ROS水平，降低MMP引起線粒體功能障礙和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導人乳腺癌MDA-MB-231細胞凋亡[28]。金銀花，性甘、寒，歸肺、胃經(jīng)，既能散風熱，又能清胃熱而解毒。甘草在治療常見急、慢性消化道疾病如消化性潰瘍、慢性膽囊炎、膽石癥等方面具有顯著療效[29]。金銀花可以有效地清理血液中的脂肪及有害物質(zhì)，增加血管血流量，有效預防心肌梗塞等心血管疾病；田行瀚等[30]發(fā)現(xiàn)甘草中的甘草查爾酮B、甘草查爾酮C、甘草查爾酮D和刺甘草查爾酮聯(lián)合使用對心血管疾病的治療效果顯著。

“中藥-關(guān)鍵靶點-疾病”網(wǎng)絡(luò)顯示，金銀花和甘草組合使用對腫瘤、消化系統(tǒng)疾病、心血管疾病等具有治療作用，兩味藥物的作用靶點有所差異，ABCC2、ALB、IGF1R為金銀花的特有作用靶點，SIRT1為甘草的特有作用靶點，甘草中的甘草酸可以作用于SIRT1，進而抑制HMGB1的表達，對SAH后神經(jīng)功能損傷具有改善作用，能明顯抑制腦部水腫，神經(jīng)細胞凋亡[31]。在KEGG通路富集分析結(jié)果中，通過調(diào)節(jié)HIF-1α信號通路，可以改善H/R誘導的心臟微血管內(nèi)皮細胞功能障礙[32]；通過干預PI3K/AKT信號通路，可減輕心肌凋亡程度，表現(xiàn)出對心肌細胞的保護作用[33]。此外，PI3K/Akt信號通路過度表達和活化與腫瘤的進展密切相關(guān)，上游分子通過與PI3K結(jié)合，使其構(gòu)象發(fā)生改變，從而磷酸化激活Akt，Akt的活化能調(diào)控其下游分子，參與腫瘤調(diào)控通路[34]，一旦PI3K/Akt信號通路被抑制，細胞增殖的能力便會下降，細胞凋亡增加[35]。TNF信號通路與受體相互作用蛋白、TNF受體相關(guān)因子2、TNF相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白以及Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白等相關(guān)，在促進細胞凋亡及炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要的作用[36]。

體外實驗結(jié)果表明，相比于單獨使用金銀花或甘草，核心藥物組合金銀花和甘草對結(jié)腸癌細胞增殖的抑制作用更強，抑制活性的提高可能是兩種中藥金銀花和甘草中的化學成分生成了新的化學成分，這體現(xiàn)了中藥配伍的必要性及科學性，也證實了中藥復方絕不是簡單的機械相加或組合，而是相輔相成又各司其職；此外，隨著濃度的上升，金銀花-甘草組的抑制活性逐漸增強，呈劑量依賴性；隨著時間的延長，金銀花-甘草組的抑制率逐漸提高，表明該藥對的治療效果顯著且藥效持久。

綜上所述，本研究采用數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)對《中華醫(yī)典》中含金銀花的組方用藥規(guī)律進行了分析和探討，發(fā)現(xiàn)金銀花組方中甘草、當歸、連翹、赤芍、防風等與金銀花同時使用的頻次較高，明確了含金銀花組方的相關(guān)藥物配伍規(guī)律，挖掘出使用頻次較高的金銀花-甘草藥對。運用數(shù)據(jù)挖掘及網(wǎng)絡(luò)藥理學探討了金銀花-甘草藥對的現(xiàn)代藥理活性及潛在作用機制，通過人結(jié)腸癌HCT116細胞增殖抑制實驗對預測出的現(xiàn)代藥理作用進行成功驗證，證實金銀花-甘草藥對較單藥使用的效果好且療效持久，體現(xiàn)了中藥配伍的科學性、可行性和必要性，也為中藥藥對的挖掘與應(yīng)用、傳統(tǒng)藥對新用途的發(fā)現(xiàn)提供了新思路。