海參多肽抗衰老功效研究

王領 劉佳偉 趙詩藝 谷志卓 張守文

關鍵詞 海參多肽;抗衰老;功效評價;化妝品

海參多肽具有延緩衰老、提高免疫力等生理功效。選取30名有效受試者為研究對象，采用無創性儀器、圖像分析、受試者主觀評價等方式，在第0天、第14天、第28天對眼部皺紋分值、紋理分值、皮膚粗糙度、面部角質層含水量、皮膚彈性進行檢測，結合受試者主觀評價，利用SPSS數據統計軟件對實驗結果進行分析。結果顯示，含有海參多肽的精華液能減少眼部皺紋分值、改善粗糙度、提高皮膚角質層含水量、增強皮膚彈性，說明其具有良好的延緩衰老及保濕功效，可為海參多肽在化妝品中的應用提供理論依據和數據支撐。

隨著物質文化生活水平的提高，人們日益關注自己的皮膚健康。皮膚老化是隨著年齡的增長不可避免會出現的現象，衰老是生物個體在生命周期中必然發生的、難以逆轉的退行性變化[1]，影響皮膚衰老的主要因素包括外源性因素（光老化）和內源性理論，外源性衰老因素主要是光老化、環境污染等;內源性衰老理論主要包括遺傳理論、自由基理論、端粒理論和線粒體理論等[2-4]。皮膚衰老外在表現為皮膚干燥、松弛、粗糙、彈性下降、出現細紋和深紋等[5-6]。

生物多肽具有安全穩定、分子量小、易水溶、易吸收等優點，也有抗氧化、清除過剩自由基、抗衰老等生物活性，不僅能夠促進皮膚細胞的增殖，還可為皮膚提供營養，延緩皮膚老化，促進皮膚創傷修復[7]。近年來，多肽在抗衰老化妝品中的應用越來越廣泛[8]。

海參為棘皮動物門海參綱動物，含有海參多糖、海參皂苷、脂肪酸、海參多肽等多種生物活性物質[9]。研究表明，海參多肽能清除過剩的DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥自由基，對DNA、蛋白質、脂肪等大分子物質，對細胞或組織的氧化損傷有保護作用[10]。柴玉超等[11]研究了海參肽對人成纖維細胞的影響，并與常用的化妝品抗皺劑進行了對比，發現海參肽能促進人成纖維細胞NIH/3T3的生長，表明其可作為主要功效原料添加到延緩衰老護膚品中。付學軍等[12]研究發現，分子量不同的海參多肽表現出不同的抗氧化性。

本研究所用的海參多肽凍干粉由煙臺新生代生物科技有限公司提供，該多肽為木瓜蛋白酶水解新鮮海參，離心取上清液，超濾，純化、濃縮，凍干后得到小分子量海參多肽。多肽中含有酪氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、組氨酸等氨基酸，90%以上的分子質量低于2000Da。擬通過無創性儀器測定法檢測受試者涂抹含海參多肽的化妝品前后眼部皺紋、紋理、粗糙度、角質層含水量和皮膚彈性等指標的變化，驗證其延緩衰老和補水保濕等功效，以期為其在化妝品中的應用提供理論依據和數據支撐。

材料與方法

01材料與儀器

測試產品為含有海參多肽的精華液，實驗室自制，詳見表1。

VISIA面部影像分析系統（Canfield公司，美國），皮膚水分測試儀Corneometer（CM825，德國CK公司），皮膚彈性測試探頭Cutometer（MPA580，德國CK公司），皮膚顯微鏡及活性皮膚表面分析系統VisioScan（VC20plus，德國CK公司）。

02精華液配方組成與制備工藝

該精華液制備方法：將A相中卡波姆在水中預分散，分散溶脹均勻后再加入A相中其他原料，將燒杯放置在75～80℃的水浴鍋中，用電動攪拌器勻速攪拌30min左右，直至A相組分全部溶解;將燒杯從水浴鍋中取出，冷卻至65℃時加入B相組分對羥基苯乙酮，攪拌均勻，冷卻至40～45℃時加入CH10（辛酰羥肟酸、1，2-己二醇、1，3-丁二醇），攪拌均勻;待溫度降至35℃，依次加入C相原料，慢速攪拌均勻，得到精華液。

03方法

3.1受試者篩選

受試者篩選工作參考2015版《化妝品安全技術規范》。根據《赫爾辛基宣言》，受試者的選擇遵循人體測試的醫學和倫理學標準，所有受試者的測試都必須出于受試者本人自愿，并在測試前簽署知情同意書。

選取健康女性受試者30名，年齡為30～50歲。受試者遴選標準符合《化妝品接觸性皮炎診斷標準及處理原則》納入、排除標準。

3.2產品使用及測試安排

（1）受試者每天早晚各使用一次，取0.5mL（2泵量），以指腹輕柔涂抹肌膚，輕輕按壓眼部皮膚直至精華完全吸收即可，連續使用28天。

（2）受試者在第0天、第14天、第28天各隨訪1次，共3次，要求受試者每次隨訪為日間同一時間。每次測試前，受試者需用清水清洗面部，使用不含熒光劑的紙巾擦干面部水分，在恒溫恒濕環境（溫度為21.0±1.0℃，相對濕度為50%±10%RH）靜坐30min之后，由技術人員進行皮膚指標的測定。

（3）儀器測試方法和評價指標：使用VISIA面部影像分析系統拍攝受試者左側面、正面、右側面圖像，記錄眼部皺紋分值和紋理分值;使用VisioScanVC20plus測量眼角紋理粗糙度，測量3次取平均值;使用CorneometerCM825測量受試者左右眼尾部位角質層含水量，記錄角質層水分含量值，測量3次取平均值;使用CutometerMPA580測量受試者左右眼尾部位的皮膚彈性，記錄皮膚總彈性R2值、回彈與拉伸的彈塑性總面積之比Q1值。

（4）受試者主觀評估：30名受試者分別在第0天、第14天、第28天隨訪時完成自我評估問卷調查，根據個人主觀感受對測試精華液進行功效評價。

3.3數據分析

應用SPSS20.0統計軟件對數據進行處理和統計分析。所有指標數據，進行配對T檢驗，比較第0天、第14天、第28天時的值，分析使用產品前后皮膚參數是否具有顯著性差異，顯著性標注方法：“n.s”表示無統計學差異，P>0.05;“*”表示有顯著性差異，0.01≤P<0.05;“**”表示顯著性差異明顯，0.001≤P<0.01，“***”表示有極顯著差異，P<0.001。

結果與討論

01人體功效評價實驗結果

1.1眼部皮膚皺紋和紋理分值測試結果

皮膚紋理是皮膚表面微小的、呈多角形的皮丘皮溝，它使皮膚富有彈性并使皮脂腺、汗腺中的分泌物能沿其紋路擴展到整個皮膚表面，隨年齡增加而逐漸加深。皺紋是衰老或過度暴露于陽光等外界因素作用下，后天形成的皮膚老化重要標志之一[13]。皺紋和紋理度是反映肌膚年輕的重要指標，其數值的變化趨勢能反映一款延緩衰老產品的實際功效和性能，皺紋分值和紋理分值越小，皺紋和紋理改善效果越好。

測試結果如圖1所示，從圖中可以看出，使用海參多肽精華液后，眼部皮膚皺紋分值呈現下降趨勢。與初始值相比，使用測試精華液28天后，皺紋分值由11.79下降為9.69，下降率為17.77%，有顯著性差異（P<0.05）。圖2為一名受試者使用前后對比圖，從中可以看出，受試者在使用含有海參多肽的精華液28天后，眼部皺紋具有明顯的減少或淡化的效果。詳見表2和表3。

眼部皮膚紋理分值的變化趨勢如圖3所示，與第0天相比，使用海參多肽精華液后第14天與第28天紋理分值均呈現下降趨勢。與初始值0天相比，使用測試產品14天后，紋理分值由8.95下降為8.34，下降率為6.82%，有顯著性差異（P<0.05）;使用測試產品28天后，紋理分值下降為8.46，下降率為5.04%，有顯著性差異（P<0.05），詳見表2和表3。

1.2眼部皮膚粗糙度測試結果

眼部皮膚粗糙度指標是評價延緩皮膚衰老產品功效的一個重要參數，測量值越小則皮膚越平滑。測試周期內，眼部皮膚粗糙度呈現下降趨勢，如圖2所示。使用測試產品14天后，粗糙度分值由8.27下降為6.30，下降率為23.82%，有顯著性差異（P<0.05）;使用測試產品28天后，粗糙度分值下降為5.60，下降率為32.30%，有極顯著差異（P<0.001）。圖5為一名受試者使用海參多肽精華液28天后的對比圖，從圖5中可以看出，28天后皮膚變得平滑，表面粗糙度得到明顯改善，詳見表2和表3。

1.3眼部皮膚角質層含水量測試結果

皮膚屏障功能是衡量皮膚保水能力強弱的重要指標。皮膚衰老時，表皮角質層變薄，皮膚中天然保濕因子含量減少，水合能力下降，細胞皺縮，出現組織學結構和形態改變而使皮膚逐漸出現細小皺紋[14]。角質層水分含量可以間接反映皮膚衰老程度以及抗衰老化妝品的功效，測量值越大，表明角質層水分含量越高，皮膚屏障功能越強。實驗結果如圖6所示，測試周期內，皮膚角質層含水量呈逐漸上升趨勢。與初始值相比，使用產品28天后，角質層含水量數值由50.65升高至60.21，改善率為18.87%，顯著性差異明顯（0.01≤P<0.05），詳見表2和表3。

1.4眼部皮膚彈性測試結果

隨著年齡的增加，皮膚中可溶性膠原纖維減少，不溶性膠原纖維增加，皮膚的伸展度隨之減少，彈性呈現下降趨勢[15]，導致皮膚松弛和皺紋的產生。實驗結果如圖7所示，測試期間，皮膚彈性R2值和Q1值呈現上升的趨勢，皮膚彈性R2值與初始值相比，使用產品28天后改善率為13.08%，有極顯著差異（P<0.001）。皮膚彈性Q1值與初始值相比，使用產品28天后改善率為10.64%，顯著性差異明顯（0.01≤P<0.05），詳見表2和表3。

02受試者主觀評價

受試者自我評估是讓30名受試者在第14天和第28天隨訪時完成自我評價問卷，根據其個人主觀感受對測試產品進行功效評價。如表4所示，使用測試樣品28天后，受試者對肌膚彈性的改善程度認為有效的占比100%;對肌膚緊致的改善程度、光滑感的改善程度認為有效的占比97%;對肌膚細紋改善程度、水潤改善程度、面部氣色改善程度認為有效的占比93%;對肌膚光澤感改善程度認為有效的占比90%;受試者對皮膚整體滿意程度及產品整體滿意程度分別占比93%和100%。由此可見，該款含有海參多肽的測試精華液在多方面皮膚改善程度上能夠達到所有受試者的認可。

結論

經過人體功效評價研究，使用含海參多肽精華液后，受試者眼部皮膚皺紋、紋理度、皮膚粗糙度、角質層含水量和皮膚彈性等方面均有不同程度的改善效果，測試數據與可視化圖像及受試者對產品功效的主觀評價結果一致，這表明海參多肽具有良好的緊致肌膚、淡化皺紋、保濕等美容功效。

經查詢，海參多肽尚未納入我國《已使用化妝品原料目錄》（2021版）中，未來可作為化妝品新原料進行備案。待備案通過后，作為一種延緩衰老活性成分，在化妝品行業應用前景廣闊。