蜜蜂人工授精技術（五）
——蜜蜂特殊人工授精技術

薛運波│文 李志勇│圖

1 .單雄單雌授精

用1 只雄蜂精液給1 只蜂王進行人工授精的方法稱為單雄單雌授精，這是研究中常用的一種技術。雄蜂是單倍體，在精子形成時沒有進行減數(shù)分裂，仍然是16 條染色體。因此，1 只雄蜂所產生的所有精子在遺傳上是一致的，單雄授精蜂王所產生的雌性后代比多雄授精蜂王產生的雌性后代在親緣關系上更近一層，屬于超同胞。

操作方法：采集精液前授精針頭內充滿生理液，首先，授精針頭內吸入一個小氣泡，然后吸入1～2μl含有抗菌素的生理液，最后再吸入雄蜂精液（圖1）。授精時，把精液同氣泡前部的生理液一同注入蜂王的側輸卵管內。次日，單雄授精的蜂王再次麻醉10分鐘。

圖1 單只雄蜂的精液

2 .單雄多雌授精

用1 只雄蜂的精液給多只蜂王進行人工授精的方法稱為單雄多雌授精。這種方法可以使不同的蜂王得到遺傳學完全一致的精子。

單雄多雌授精有兩種方式：一種是采集1 只雄蜂的精液稀釋后分別給同一代次的多只蜂王進行授精。用此方法可以從這些蜂王的后代工蜂中觀測出這些蜂王的親緣關系；另一種方式是利用1 只雄蜂的精液連續(xù)給F1、F2、F3 后代雌性進行授精。用這種方法不僅使每世代的間隔時間縮短，同時還能得到遺傳非常接近父本的后代。

3 .自體授精

處女蜂王性成熟以后，用二氧化碳每天麻醉10分鐘，連續(xù)麻醉3 天，誘入到有雄蜂脾的核群中，促使其產下未受精卵。未受精卵經過核群中的工蜂哺育，發(fā)育成雄蜂。雄蜂出房8 天左右，幽閉控制該蜂王產卵，使其生殖道排空，雄蜂性成熟后進行采精，用該蜂王所產雄蜂精液給自體授精，從而達到自體授精的目的。

4 .產卵蜂王再授精

Harbo（1985）曾經斷言，已經交尾產卵的蜂王（自然交尾或人工授精），一經再次注射精液就會死亡。但我國學者試驗表明：已經開產的授精蜂王經過囚禁，腹部收縮，可以成功進行再次授精，尤其是在利用它所產的后代雄蜂的精液搞補償性授精時，效果不錯。

5 .混合精液授精

蜜蜂混合精液的人工授精技術是將幾個蜜蜂品種（品系、配套系等）的雄蜂精液均勻混合后給處女蜂王進行授精，主要用于蜜蜂雜種優(yōu)勢的利用方面。其主要技術環(huán)節(jié)是精液在無菌環(huán)境下均勻混合。方法：分別采集不同蜜蜂品種（品系、配套系等）的雄蜂精液，在超凈工作臺或者特制的無菌箱內（圖2），將各自雄蜂精液按比例或數(shù)量加入到事先凈化滅菌的混合管內，用毛細管混勻器按同一個方向慢慢轉動，轉速大約為5～10r/s，避免來回轉動和產生氣泡，以防損傷蜜蜂精子，蜜蜂精液混勻大約2分鐘左右即可。再用人工授精儀的進樣器將混合好的精液吸入授精針頭內進行人工授精。

圖2 便攜式授精混合設備

6 .從雄蜂貯精囊收集精子進行人工授精

當迫切需要從1 只特殊的雄蜂得到精液，而用通常的方法擠壓雄蜂又無法得到精液時，可以從雄蜂貯精囊收集精子進行人工授精，這種方法獲得的精液數(shù)量可以滿足最低限度的授精需要。這種授精方式有兩種取精方法：一是取出貯精囊（圖3），通過擠壓迫使精液排出，用注射器直接收集起來；二是將貯精囊放入尖底離心管中，加入少量生理液后，迫使貯精囊排出精液，收集混入精液的生理液，進行人工授精。

圖3 解剖雄蜂貯精囊

7 .用來自1只蜂王受精囊的精子給另一只蜂王授精

這一技術是進行配子回交或只回收貯存在另一只蜂王的精子時應用，處女蜂王可以成為貯存精子的場所。方法是從供精蜂王取出受精囊（圖4），去除受精囊外圍包被物，用細針刺穿它，然后用注射器收集精液，最后按照通常的方法授精。

圖4 密被微氣管的受精囊

8 .冷凍精液授精

蜜蜂是典型的營群體生活的社會性昆蟲。在高寒山區(qū)，越冬雄蜂的壽命只有8 個月以上，給蜜蜂育種、保種等方面帶來很大困難。為此，長期貯存蜜蜂精液，實行蜜蜂冷凍精液人工授精，是解決蜜蜂精液利用受到季節(jié)、雄蜂壽命等限制問題的有效途徑。有利于蜜蜂良種遺傳資源的保護和利用以及蜜蜂引種、血統(tǒng)更新等，具有重要意義。