禽流感疫苗研究進展

云水麗，劉艷玲，格根塔娜

(林西縣農牧局，內蒙古 赤峰 025250)

禽流感(avian influenza，AI)是一種由A型流感病毒(avian influenza virus，AIV)引發的禽類急性、烈性傳染病。根據所感染病毒毒性的差異，禽流感可以分為以下3類：高致病性禽流感(highly pathogenic avian influenza，HPAI)、低致病性禽流感(low pathogenic avian influenza，LPAI)和非致病性禽流感。其中，高致病性禽流感被世界動物衛生組織列為必須通報的疫病。此外，由于AIV基因組的變異速度快，血清類型多，且各類血清之間無法實現交叉保護，導致疫苗的研發工作一直未取得實質性進展。基于此，本文就現階段禽流感病毒以及其疫苗的研究現狀進行闡述，旨在為相關研究提供資料。

1 禽流感疫苗的研究現狀

1.1 國外研究現狀

歐美國家對禽流感疫苗的研究起步較早，因而擁有較為完善的疫苗接種體系。美國學者艾伏里西諾(2006)在其著作《打敗禽流感》中也提到，禽流感病毒具有演化功能，例如H5N1亞型就是其演化的結果。禽流感病毒的這種自我變種的特性，導致病毒的傳播更加輕易，防控難度更高，因此需要依靠疫苗來降低感染引發的危害。根據美國衛生與公眾服務部于2021年9月發布的臨床分析顯示，家禽接種疫苗大概需要90 mg才能產生防病效果，因此為防備禽流感病毒的流行，美國衛生與公眾服務部購入了200萬劑的禽流感疫苗，以加強對禽流感的防控能力。

1.2 我國的研究現狀

我國對禽流感疫苗的研究起步較晚，但目前也已非常成熟。劉梅等(2017)發現，禽流感疫苗產生的免疫效果與家禽的體質有關，如雛雞的母源抗體水平對禽流感疫苗免疫效果的影響比一般雞類的更大。

吳姣姣(2019)在研究中發現，H5+H7禽流感二價滅活疫苗對雞、鴨和鵝等家禽具有良好的安全性和有效性，不僅可以降低家禽感染病毒的概率，而且能減少接種對家禽的負面影響，保護家禽飼養的經濟效益。

綜合而言，我國對于禽流感疫苗接種的研究相對成熟，能夠對家禽進行充分的免疫接種和防控，避免禽流感的危害擴大。

2 禽流感疫苗的免疫原理和種類

疫苗屬于免疫保護性生物制品，動物接種后，經過機體識別后，疫苗能夠有效地結合機體的免疫系統，進而產生針對相關病毒的抗體，從而成功抵抗病原體的入侵。同時，動物機體會產生相關的細胞免疫或體液免疫，并且能夠產生記憶免疫細胞，進而長期地抵抗或減弱病毒的侵擾。而隨著各國對疫苗研究工作的推進，禽流感疫苗研究取得了較大的進展。當前，疫苗可以分為治療性疫苗和預防性疫苗，而根據性質又可分為滅活疫苗、載體疫苗等。

3 禽流感疫苗免疫接種的作用及方式

接種疫苗能夠有效地控制禽流感的傳播，而接種疫苗的目的在于有效提高禽類抗擊AIV入侵的能力，降低病毒在禽類體內的增殖能力，進而降低動物的死亡率。所以，可以說接種疫苗能夠對禽流感起到有效的預防和抗擊作用。禽流感疫苗主要應用于以下幾個領域：一是禽流感高發區域，用作預防作用；二是當禽流感感染暴發之后進行應對；三是通過日常接種提高禽類機體對禽流感的免疫力，進而從根本上降低病毒的感染和傳染概率。

在日常生產中，禽流感疫苗的接種方式主要有預防接種、系統接種、緊急接種和替代接種四類。其中，預防接種是一種預防禽流感流行與暴發的措施，目的是在家禽飼養地區尚未暴發禽流感之前，起到預防該病暴發的作用；在給禽類接種疫苗時，要求盡可能做到全部家禽都能接種到疫苗，并且對已經感染的禽類采取捕殺措施。緊急接種是一種應對措施，主要是在區域內開始流行禽流感時，為了能夠有效控制疾病的傳播速度和傳播面積，對該區域內以及周邊區域內的家禽接種疫苗。而替代接種主要是對AIV天然宿主進行免疫；然而，由于缺乏對野雞類具有針對性和有效的免疫方式，這種接種方式當前處于擱置階段。

4 禽流感疫苗的研發與應用

4.1 禽流感滅活疫苗

禽流感滅活疫苗是用甲醛或其他滅活劑對禽流感病毒進行滅活處理后再添加佐劑制作而成的疫苗。這種疫苗具有安全性高、免疫力強、能夠制成多價苗、不出現變異等優點，是當前使用最為廣泛的疫苗，其中主要包括了由自然分離株和重組病毒研制而成的疫苗。我國從2003年便開始了禽流感滅活疫苗的研制，華南農業大學、揚州大學等多所大學開展了二類禽流感滅活疫苗的研發，并且均獲得了農業農村部的批準，隨后這些疫苗開始被用于家禽生產?，F階段，我國禽流感滅活疫苗得到了廣泛的使用，以吳姣姣等[1]研制的二價滅活疫苗為例，該疫苗能夠較好地保護商用肉雞免受禽流感的侵襲，并且用該疫苗免疫的肉雞在受到H5和H7禽流感強毒株的攻擊后能夠產生強有力的免疫保護作用。章振華等用新城疫病毒、傳染性法氏囊病病毒、H9禽流感研制成功的亞型三聯滅活疫苗，能夠對7～14日齡的雛雞起到較好的免疫效果。Alia等通過接種三價滅活油乳劑疫苗，能夠對H5N8亞型高致病性禽流感病毒以及V11新城疫病毒的SPF雞起到較好的免疫效果，并且這類疫苗在臨床上的表現也十分有效。

4.2 禽流感減毒活疫苗

禽流感減毒活疫苗是指病毒經過處理后，其毒性結構發生一定程度的改變，但病毒的活性并未改變，進而起到減輕毒性的目的。但是，隨著基因工程技術的發展，減毒活疫苗以及滅活疫苗能夠起到激發動物體液免疫和細胞免疫的作用，并且在體內能夠保持較長時間的活性，因此具有一次接種、價格低的優勢。以劉梅等[2]的研究為例，他們用NS1基因缺失或突變的禽流感減毒活疫苗進行了動物實驗，結果證明接種疫苗的家禽并未出現明顯的臨床癥狀，不僅能夠起到較好的免疫保護，而且在免疫動物體內未觀察到病毒的復制。Wan Z等利用A型H3N2和H1N1流感病毒和兩個B型流感病毒抗原譜系，研制出了一種減毒活疫苗，并起到較好的保護作用。但是發現，家禽接種減毒活疫苗后，其體內會殘留一些病毒，這些病毒可能會出現“回返”現象；此外，對這類疫苗很難進行評估，它們對運輸和保存的條件有較高的要求。因此，當前我國并沒有批準這類疫苗的使用。

4.3 禽流感通用疫苗

通用疫苗主要是通過直接破壞病毒各亞型中共有的HA、M2蛋白起到免疫保護作用，這些蛋白幾乎不會發生變異，因此為疫苗的研發提供了良好的基礎。同時，這種疫苗對病毒的各個亞型都具有保護作用，在防控禽流感上能夠發揮重要的作用。一直以來，通用疫苗都是最為理想的疫苗，但對其開展研究的學者并不多。例如Rowe11等利用A型流感的NP和M2抗原研制出了一種通用疫苗，將該疫苗接種到小鼠鼻內進行給藥實驗，發現該疫苗對發生呼吸道感染的小鼠具有一定的免疫效果。Sun等在對A型、B型流感對應的基因序列采取替換措施后產生了鑲嵌B血凝素，將其表達成可溶性三聚體蛋白，進而研制出了一種新的通用B型流感疫苗，此疫苗能夠對同源、異源的B型流感產生交叉保護。此外，這類疫苗具有預防流感廣、保護時間長等優勢。

4.4 禽流感核酸疫苗

核酸疫苗是在研發時集合了分子生物學、免疫學、生物化學等技術制成的DNA疫苗或RNA疫苗，將可表達的保護性免疫基因導入動物體內，激發機體通過蛋白產生相應的免疫作用。

然而，核酸疫苗的研究主要集中在DNA疫苗。DNA疫苗無需化學載體，又被稱為裸疫苗[3]。另外，DNA分子更為穩定，因此與其他疫苗相比具有安全性高、成本低、無需佐劑等優勢。賈云惠等以H1N1流感病毒HA蛋白為靶抗原，研制出了DNA疫苗，經過小鼠實驗后在其體內產生了抗體，表明該DNA疫苗對H1N1流感病毒的感染具有免疫保護作用，并且也能夠對異源pdm H1N1/2009豬流感產生較好的保護作用。Yao等通過對H1N1亞型流感病毒M2蛋白的研究，研制出了M2e DNA疫苗，通過對小鼠的接種試驗，發現該疫苗能夠對人體產生免疫保護作用。

RNA疫苗可以分為兩種，一種是常規的mRNA疫苗，另一種是擴增的mRNA疫苗。Norbert等利用核苷酸對病毒HA的mRNA進行修飾和純化，經小鼠等動物的體內實驗，發現其能夠有效、廣泛地保護機體，在注射部位以及淋巴中能夠產生激烈的免疫應答反應。同時，mRNA疫苗能夠和滅活病毒競爭，在T細胞反應等方面更具優勢。

在我國科研人員的努力下，農業農村部于2018年正式批準了首個禽流感DNA疫苗。

5 總結

綜上所述，現階段，接種疫苗依然是預防、控制禽流感暴發的最佳措施。在今后的研發中，有待開發新的免疫佐劑來提高疫苗的免疫效果。尤其是在生物技術快速發展的背景下，需要研發更安全、更有效的疫苗，來彌補當前疫苗的不足。