動物源食品中獸藥殘留檢測技術現狀

◎ 李改弟，毛麗萍，左 鳳

（涼山州農產品質量安全檢測中心，四川 涼山 615000）

1 動物源性食品中獸藥殘留現狀及危害

當前，食品安全問題越來越受到人們的關注。食品中的獸藥殘留不僅會對人體健康造成危害，而且還會破壞生態環境。在畜禽養殖過程中常用到的獸藥有抗生素、激素、鎮靜劑等，獸藥殘留超標的主要原因是養殖戶不合理使用獸藥，部分養殖戶在利益的驅使下違規或超量使用藥物，還有養殖戶不注重休藥期，造成動物源性食品中獸藥殘留超標。獸藥殘留超標的另一個主要原因是獸藥行業缺乏管理和規范，市面上隨處可見偽劣藥品。獸藥殘留有致毒、致畸、致突變的作用。例如，受體激動劑會對人體的腎臟造成一定的損害，長期濫用抗生素會使人體產生耐藥性，使用激素會造成兒童早熟、肥胖等一系列問題。由于養殖戶違規濫用獸藥，動物的排泄物中也會有獸藥殘留，若不經過處理就將動物排泄物排放到自然界中，就會污染土壤和水體[1-2]。

2 動物源性食品中獸藥殘留的前處理技術

由于動物源性食品基質比較復雜，目標物的檢測殘留量相對較低，樣品的前處理就顯得尤為重要，樣品前處理是開展檢測工作的基礎和保障。現階段獸藥檢測前處理主要包括對目標物的提取、分離、凈化，對于難以提取和檢測到的目標物，還要進行衍生后再處理。提取是將待測物與其他物質分離開，常用到的提取試劑有乙腈、正己烷、乙酸乙酯等，由于大多數畜禽產品基質比較復雜，要進行多次提取才能達到目的。為了減少共提取物的影響，樣品在分析前要進行凈化處理。常用的凈化技術有液液萃取、固相萃取、免疫親和色譜等[3]。

3 動物源性食品中獸藥殘留檢測技術

3.1 快速檢測技術的應用

在獸藥殘留快速檢測中，目前最常用的是酶聯免疫吸附法，酶聯免疫吸附法是目前化學分析檢測方面的前沿技術，是在組織化學與免疫熒光學的基礎上發展起來的一門科學。主要是通過在酶的高效催化反應作用下產生抗體抗原的免疫顯色反應定性定量分析，檢測原理是待測物含量與免疫反應所產生的顏色具有相關性，可通過顏色的深淺程度達到定性、定量分析的目的。其優勢是操作簡便，成本較低，靈敏度相對較高，適用于大批量樣品的獸藥檢測，常用于養殖場、屠宰場、肉產品深加工廠等。不足之處是一次只能檢測某種或者某類物質，不能多目標物檢測。酶聯免疫吸附法可先定性篩查，再用高效液相色譜串聯質譜法確認結構和定量分析[4]。

3.2 高效液相色譜法

高效液相色譜法是以高壓系統輸送的液體為流動相，試樣流經色譜柱時與固定相發生相互作用，由于試樣中各組分的性質和結構存在差異，各組分與固定相之間的作用力不同，從而實現分離。高效液相色譜分離分析技術的準確性和靈敏度都很高、一次可同時測定多組目標物，現已廣泛用于食品中多種殘留物的定性和定量分析[5]。在獸藥殘留檢測中，高效液相色譜檢測技術最常用的有兩種，高效液相-紫外吸收檢測技術和高效液相-熒光檢測技術。

（1）高效液相-紫外吸收檢測技術。紫外吸收檢測器是高效液相色譜儀中最常用的檢測器，它有3種類型，分別為可變波長檢測器、固定波長檢測器以及二極管陣列檢測器，在食品獸藥殘留檢測中，由于二極管陣列檢測器成本低、靈敏度高、具有較好的選擇性等特點，它的適用范圍較廣。但由于該法對可見光吸收的獸藥缺乏敏感性，加上受大多數復雜基質的影響，易導致假陽性結果出現[4]。

（2）高效液相-熒光檢測技術。熒光檢測法相比紫外吸收檢測法有更高的靈敏度和選擇性。對于不產生熒光的物質，用熒光試劑制成其衍生物后再進行測定。由于喹諾酮類具有一定的熒光反應，該方法常用于檢測食品中喹諾酮類藥物的殘留，而其他的獸藥則需添加相應的衍生環節才能進行熒光檢測，檢測過程比較復雜，從而限制了熒光檢測的發展[6]。

3.3 液相色譜-質譜聯用檢測技術的應用

由于質譜分析具有靈敏度高、樣品用量少、分析速度快以及分離和鑒定同時進行等優點，近年來發展速度很快，廣泛應用于食品安全檢測領域。隨著質譜檢測技術的發展及液相色譜-質譜聯用技術的出現，液質聯用技術已成為獸藥殘留檢測的主要手段之一。由于其具備質譜準確的定性定量功能，同時具有液相色譜的分離功能，其靈敏度和選擇性都更高，在檢測中應用較為廣泛[4]。

3.3.1 液相色譜-質譜聯用技術在磺胺類藥物殘留檢測中的應用

磺胺類藥物是一類用于預防和治療細菌感染性疾病的藥物。但其有一定的毒副作用，不僅會影響泌尿系統的功能，還可在尿液中析出，結晶導致泌尿系統結石從而損害腎臟功能。因此，為了確保食品安全，磺胺類藥物殘留量檢測已成為我國食品的常規項目之一。

我國畜禽產品中獸藥殘留檢測人員逐漸開發了液相色譜-串聯質譜法檢測畜禽肉中的磺胺類藥物殘留。高何剛等[7]建立了超高效液相色譜-串聯質譜聯用法同時檢測雞肉中16種磺胺類和15種喹諾酮類獸藥殘留，內標法定量。結果表明，當濃度為10.0～500.0 μg·L-1時，31種獸藥的線性關系良好，相關系數均≥0.999 0，當加標量為50.0 μg·kg-1時，31種獸藥的加標回收率為84.0%～94.7%，相對標準偏差均小于2.5%。31種獸藥的檢出限均為 0.10 μg·kg-1，定量限為 0.30 μg·kg-1。通過均質提取的辦法，大大提高了提取效率。該檢測方法操作簡單，靈敏度高，選擇性高，可滿足多種磺胺和喹諾酮類獸藥同時檢測的需求。

3.3.2 液相色譜-質譜聯用技術在喹諾酮類藥物殘留檢測中的應用

喹諾酮類藥物是一類人工合成抗菌藥，對多種革蘭陰性菌有明顯的殺菌效果，被廣泛應用于養殖業中。但這類藥物的殘留會對人體系統等產生不同程度的不良反應，損害人體健康。因此，食品中喹諾酮類藥物殘留量檢測非常重要。

羅靜等[8]建立了一種基質固相分散-液相色譜-串聯質譜聯用技術測定雞蛋中14種氟喹諾酮類藥物殘留的方法。基質固相分散提取過程中以硅膠為分散劑，氨甲醇溶劑為洗脫劑，其萃取回收率在80%以上。洗脫液濃縮定容后經C18柱（50 mm×2.1 mm，1.9 μm）分離，質譜采用電噴霧電離、正離子模式（ESI＋），以多反應監測模式進行檢測。方法的線性范圍為0.1 ～ 50.0 μg·kg-1，檢出限達 0.1 μg·kg-1，相對標準偏差為8.8%～10.4%。該方法具有快速、簡便和靈敏度高的優點，特別是雞蛋樣品中多種氟喹諾酮類藥物的高通量分析。

3.3.3 液相色譜-質譜聯用技術在食品中四環素類藥物殘留檢測中的應用

四環素屬于廣譜抗生素，其具有殺菌的作用，但也有一定的副作用，常見的副作用是對肝臟有一定的毒性，患者可能出現脂肪肝變性，抽血化驗發現轉氨酶和膽紅素升高。在畜禽產品養殖的過程中，四環素類藥物是較為常見的添加藥物，其在動物體內殘留易被人體吸收，帶來不良影響。因此，檢測畜禽產品中四環素的含量具有重要意義。

劉鎮等[9]建立了石墨烯納米磁顆粒固相萃取-液相色譜質譜聯用檢測四環素類藥物的方法。趙琪[10]分析了高效液相色譜質譜聯用法在食品中四環素類藥物殘留檢測中的應用，以四環素、土霉素、金霉素及美他環素為主要研究內容，以牛奶為樣品，采用的檢測方法是C18小柱富集，含4%甲酸的甲醇溶液洗脫，進行液質聯用測定。結果表明，牛奶中四環素、土霉素、美他環素檢出限均為0.05 μg·mL-1，金霉素檢出限為0.1 μg·mL-1。經過檢測分析，四環素類藥物的平均回收率為四環素98.1%、土霉素95.2%、金霉素88.3%和美他環素86.9%。以相對標準偏差結果表示精密度，相對標準偏差為四環素12.2%、土霉素12.8%、金霉素3.2%和美他環素15.0%（n=5）。通過研究，證明了液相色譜質譜聯用在檢測食品中的四環素類藥物時有實際作用，可高靈敏性地檢測出食品中的四環素類藥物。

4 結語

在當代社會發展進程中，獸藥殘留檢測技術已呈現出全新的發展趨勢。從事食品獸藥殘留檢測的專業人員，需不斷加強自身專業技術的學習，提升檢測的準確度和效率。為保障消費者的身體健康及食品安全，相關部門應重視食品中獸藥殘留現象，加強管理和監督，保障消費者菜籃子的安全。