基于傾向性評分匹配的子宮內(nèi)膜異位癥患者T淋巴細(xì)胞亞群與臨床分期的相關(guān)性評價

楊金妹，何志芳，李祥，丁波

(1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)附屬滁州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 婦產(chǎn)科，安徽 滁州 239000；2.安徽中醫(yī)藥大學(xué)附屬滁州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院檢驗科，安徽 滁州 239000；3.東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院 婦科，江蘇 南京 210009)

現(xiàn)階段，藥物、手術(shù)治療等均是子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，EMs)的主要治療手段，均可有效改善患者病情，提高妊娠成功幾率，促進(jìn)良性預(yù)后[1]。但不同修正EMs分期(Revise-American Fertility Society，r-AFS)的患者治療方案存在差異性，且分期情況與術(shù)后生育能力、復(fù)發(fā)風(fēng)險等方面密切相關(guān)[2]。因此，早期評估EMs患者的臨床分期情況，并及時實施合理干預(yù)更有利于后續(xù)優(yōu)化治療方案，提高治療效果和妊娠成功率。有研究指出，EMs是一種自身免疫性疾病，該疾病的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體免疫調(diào)節(jié)功能存在密切關(guān)聯(lián)[3]。T淋巴細(xì)胞亞群是反饋機(jī)體細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)，可用于輔助診斷自身免疫病、免疫缺陷病等多種疾病，也可用于觀察療效、檢測預(yù)后等[4]。有研究[5]表明，T淋巴細(xì)胞亞群在EMs的發(fā)生、發(fā)展等過程中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。結(jié)合T淋巴細(xì)胞亞群在免疫功能中的作用特點，分析其與EMs患者的臨床分期情況存在一定的關(guān)系。基于此，本研究重點分析基于傾向性評分匹配探討T淋巴細(xì)胞亞群與EMs患者臨床分期的關(guān)系，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2018年6月至2021年6月170例EMs患者病歷資料，將全部患者依據(jù)r-AFS評分[6]分為晚期組(Ⅲ～Ⅳ期，90例)和早期組(Ⅰ～Ⅱ期，80例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)EMs符合《子宮內(nèi)膜異位癥的診治指南》[7]中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)影像學(xué)、實驗室檢查等確診；(2)患者病歷資料、影像學(xué)資料等完善。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并自身免疫性疾病、生殖系統(tǒng)炎癥等的患者；(2)近3個月內(nèi)使用抗生素、免疫功能抑制劑等藥物治療的患者；(3)合并惡性腫瘤的患者；(4)伴有內(nèi)生殖道結(jié)核結(jié)節(jié)的患者；(5)合并血脂異常、血糖異常等影響T淋巴細(xì)胞表達(dá)水平疾病的患者。

1.2 方法

1.2.1 傾向性評分匹配 使用傾向性評分匹配分析患者年齡、月經(jīng)周期、孕次(1次，>1次)、月經(jīng)初潮時間、痛經(jīng)程度(無、輕度、中度、重度)、子宮內(nèi)膜異位病灶部位(腹膜、卵巢、宮骶韌帶、輸卵管)等基線資料，采用近鄰法對晚期組和早期組進(jìn)行1∶1匹配配對。

1.2.2 實驗室指標(biāo)檢測方法 全部患者均于入院當(dāng)天采集空腹靜脈血7 ml，分為3支試管。(1)T淋巴細(xì)胞亞群：用乙二胺四乙酸抗凝管抽血3 ml，取100 μl全血并在其中加入CD3+、CD4+、CD8+單克隆抗體，于室溫避光靜置10 min，再加入相應(yīng)的紅細(xì)胞溶解素充分反應(yīng)10 min，再以3 000 r·min-1的離心速度離心10 min，使用Beckman公司Cy60FLEX流式細(xì)胞儀檢測CD3+、CD4+、CD8+水平，并計算CD4+/CD8+值。(2)人附睪蛋白4(human epididymisprotein 4，HE4)：以4 000 r·min-1離心15 min，取上清液。使用瑞士羅氏的Cobas601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測定HE4水平。(3)糖類抗原(carbohydrate antigen，CA)125：以4 000 r·min-1的離心速度離心15 min，取上清液使用瑞士羅氏的Cobas601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測定CA125水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 傾向性評分匹配情況

傾向性評分匹配前，晚期組與早期組年齡、月經(jīng)周期、孕次、月經(jīng)初潮時間、痛經(jīng)程度、子宮內(nèi)膜異位病灶部位比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；經(jīng)傾向性評分匹配后，最終納入晚期組、早期組病例各50例；傾向性評分匹配后，晚期組(50例)與早期組(50例)年齡、月經(jīng)周期、孕次、月經(jīng)初潮時間、痛經(jīng)程、子宮內(nèi)膜異位病灶部位比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 傾向性評分匹配情況Tab 1 Propensity score matching

2.2 實驗室指標(biāo)檢測結(jié)果

匹配后的兩組數(shù)據(jù)中，晚期組的CD3+、CD4+水平和CD4+/CD8+值低于早期組，CD8+水平高于早期組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；兩組的HE4、CA125水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 兩組實驗室指標(biāo)比較Tab 2 Comparison of laboratory indicators between the two groups

2.3 T淋巴細(xì)胞亞群與EMs患者臨床分期關(guān)系的回歸分析

將基線資料與實驗室指標(biāo)分析結(jié)果得到有意義的變量(均為連續(xù)變量)作為自變量，將EMs患者臨床分期作為因變量(1=晚期組，0=早期組)，經(jīng)二元回歸分析后，將P值放寬至<0.2，將符合條件的因素同時納入作為自變量，經(jīng)多元Logistic回歸分析結(jié)果顯示，EMs患者入院次日的CD3+、CD4+水平和CD4+/CD8+值高是EMs患者臨床分期高的保護(hù)因素(OR<1，P<0.05)；CD8+水平高是EMs患者臨床分期高的危險因素(OR>1，P<0.05)。見表3。

表3 T淋巴細(xì)胞亞群與EMs患者臨床分期關(guān)系的回歸分析結(jié)果Tab 3 Results of regression analysis of the relationship between T lymphocyte subsets and clinical staging in patients with EMs

2.4 T淋巴細(xì)胞亞群評估EMs患者臨床分期高風(fēng)險的效能分析

將患者入院當(dāng)天的T淋巴細(xì)胞亞群作為檢驗變量，EMs患者臨床分期情況作為狀態(tài)變量(1=晚期組，0=早期組)，繪制ROC曲線(圖1)，結(jié)果顯示，EMs患者入院當(dāng)天的CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+值評估患者臨床分期高風(fēng)險的AUC均>0.70，評估價值較理想。相關(guān)參數(shù)見表4。

表4 T淋巴細(xì)胞亞群評估EMs患者臨床分期高風(fēng)險的效能分析結(jié)果Tab 4 Results of efficacy analysis of T-lymphocyte subsets to assess high risk of clinical staging in patients with EMs

圖1 T淋巴細(xì)胞亞群評估EMs患者臨床分期高風(fēng)險的ROC曲線圖Fig 1 ROC curve of T lymphocyte subpopulations for assessing high risk of clinical staging in patients with EMs

3 討 論

目前，臨床對于EMs的治療和診斷尚以腹腔鏡手術(shù)為主，但該方法為有創(chuàng)性操作，患者需承受一定的痛苦，不易接受，但對于早期EMs患者而言，或無需接受手術(shù)治療即可恢復(fù)，預(yù)后更好[8-9]。可見，盡早明確EMs患者的分期情況更利于判斷疾病嚴(yán)重程度和治療方案的選擇。

研究[10-11]指出，免疫因素是EMs發(fā)生、發(fā)展的重要原因之一，當(dāng)患者機(jī)體免疫功能異常時，患者自身難以有效清除位于宮腔外的子宮內(nèi)膜組織，或?qū)愇蛔訉m內(nèi)膜組織當(dāng)成自身組織而未進(jìn)行清除，從而促進(jìn)EMs的發(fā)生、發(fā)展。T淋巴細(xì)胞亞群是一類能夠調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的細(xì)胞群體，其中CD3+、CD4+是兩類重要的細(xì)胞亞群，CD8+存在細(xì)胞毒性，CD4+/CD8+值是反饋機(jī)體免疫狀態(tài)的內(nèi)在標(biāo)志[12-13]。靳麗杰等[14]研究指出，EMs的發(fā)生、發(fā)展與腹腔局部免疫狀況有關(guān)，腹腔內(nèi)T淋巴細(xì)胞亞群的失衡可能是EMs發(fā)生、發(fā)展的重要原因之一。本研究結(jié)果顯示，匹配后的兩組數(shù)據(jù)中，晚期組的CD3+、CD4+水平和CD4+/CD8+值低于早期組，CD8+水平高于早期組，初步推測不同臨床分期EMs患者的T淋巴細(xì)胞亞群存在差異，患者分期越高T淋巴細(xì)胞亞群失衡越嚴(yán)重。且上述推測在進(jìn)一步回歸分析中得以證實，表明T淋巴細(xì)胞亞群水平與EMs患者的臨床分期具有相關(guān)性。究其原因，T淋巴細(xì)胞亞群是反饋免疫功能的重要指標(biāo)[15]。當(dāng)CD3+、CD4+水平降低時，CD8+水平會隨之升高，CD4+/CD8+值也會隨之降低，說明機(jī)體T淋巴細(xì)胞亞群存在異常，淋巴細(xì)胞增殖分化能力下降，細(xì)胞免疫功能受到抑制，導(dǎo)致異位內(nèi)膜組織無法得到有效清除，異位子宮內(nèi)膜種植仍持續(xù)性生長、浸潤，臨床分期逐漸提高[16-17]。并且T淋巴細(xì)胞亞群失衡可導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)輔助性T淋巴細(xì)胞1逐漸向輔助性T淋巴細(xì)胞2型漂移，機(jī)體處于免疫抑制狀態(tài)，免疫功能減弱[18]，子宮內(nèi)膜細(xì)胞可發(fā)生免疫逃逸，有助于異位內(nèi)膜組織逃避機(jī)體免疫系統(tǒng)和自然殺傷細(xì)胞發(fā)揮作用，異位內(nèi)膜未得到清除，促使異位內(nèi)膜得以種植和持續(xù)性生長，提高臨床分期[19-20]。

最后，本研究繪制ROC曲線分析T淋巴細(xì)胞亞群評估EMs患者臨床分期的價值，結(jié)果顯示EMs患者入院次日的CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+值評估患者臨床分期高風(fēng)險的AUC均>0.70，評估價值較理想，表明T淋巴細(xì)胞亞群不僅可能是EMs患者高臨床分期的風(fēng)險因子，也可作為EMs患者臨床分期的評估標(biāo)志物，可能在評估EMs患者臨床分期方面更具有臨床指導(dǎo)意義。這也提示臨床可早期監(jiān)測EMs患者的T淋巴細(xì)胞亞群情況，若出現(xiàn)異常變化則及時實施免疫治療、抗炎治療等干預(yù)措施，以改善患者預(yù)后。

綜上所述，T淋巴細(xì)胞亞群與EMs患者臨床分期密切相關(guān)，T淋巴細(xì)胞亞群失衡越嚴(yán)重EMs患者的臨床分期越高。