小漿果中天然苯甲酸含量檢測(cè)與結(jié)果分析

劉茜 龐敏 劉娜娜

摘 要：天然苯甲酸是植物生長(zhǎng)期次級(jí)代謝產(chǎn)物，本文采集普通居民日常消費(fèi)渠道中的藍(lán)莓、楊梅、蔓越莓、樹(shù)莓等32份小漿果，采用GB 5009.28—2016測(cè)定樣本中苯甲酸含量。結(jié)果顯示，17份蔓越莓樣品中苯甲酸檢出率為100%，苯甲酸均值為0.053 g/kg，含量范圍為0.011～0.200 g/kg，標(biāo)準(zhǔn)值為0.041 g/kg。15份非蔓越莓樣品中苯甲酸檢出率為20%，檢出苯甲酸的漿果分別為楊梅、樹(shù)莓、黑加侖，苯甲酸均值為0.006 g/kg，含量范圍為0.003～0.029 g/kg，標(biāo)準(zhǔn)值為0.009 g/kg。雖然食品中含量較低的苯甲酸不會(huì)對(duì)人體造成傷害，但是部分人群將苯甲酸檢出率100%的蔓越莓作為日常保健食品定量食用，攝入量超出正常人群很多倍，在研究食品安全的時(shí)候應(yīng)予以重視。

關(guān)鍵詞：小漿果;天然苯甲酸;檢測(cè)

Determination and Result Analysis of Natural Benzoic Acid in Small Berry

LIU Qian1， PANG Min2， LIU Nana3

（1.Sanda University， Shanghai 201209， China; 2.Administrative Service Center of Shanghai Market Supervision Administration， Shanghai 200040， China; 3.Shanghai Denuo Product Service Co.， Ltd.，

Shanghai 200436， China）

Abstract： Natural benzoic acid is a secondary metabolite of plant growth period. In this paper， 32 small berries such as blueberry， bayberry， cranberry and raspberry were collected from the daily consumption channels of ordinary residents， and the benzoic acid content was measured by GB 5009.28—2016.The results showed that the benzoic acid detection rate in 17 cranberry samples was 100%， the mean benzoic acid was 0.053 g/kg， content range of 0.011～0.200 g/kg and standard value of 0.041 g/kg.Benzoic acid detection rate in 15 non-cranberry samples was 20%， including berry， raspberry， and black gallon， the mean benzoic acid was 0.006 g/kg， the content range was 0.003 to 0.029 g/kg， and the standard value was 0.009 g/kg.Although benzoic acid with low content in food will not cause harm to human body， some people take cranberries with the detection rate of benzoic acid as a daily health food. The intake is many times beyond the normal population， which should be paid attention to when studying food safety.

Keywords： small berry; benzoic acid; background

漿果富含抗壞血酸、花青素等多種抗氧化物質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)豐富、藥用價(jià)值高[1]。藍(lán)莓、樹(shù)莓、蔓越莓等小漿果種植面積逐年增大，銷量也逐年上升。研究表明，藍(lán)莓富含維生素、礦物質(zhì)、多糖、多酚、花青素及黃酮類化合物，在抗衰、抗癌、抗心血管疾病等方面功效顯著[2]。蔓越莓中也可以提取大量生物活性物質(zhì)，研究發(fā)現(xiàn)蔓越莓具有抗菌能力，能有效預(yù)防尿路感染[3]。在調(diào)查消費(fèi)者蔓越莓?dāng)z入量的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有部分消費(fèi)者定期定量食用蔓越莓鮮果或濃縮果汁作保健用。樹(shù)莓的提取物中含有很多活性成分，如花色苷、鞣花酸、沒(méi)食子酸、樹(shù)莓酮等，研究表明，其具有抑制和清除自由基、提高免疫力、保護(hù)心、肝等功效，這些小漿果的口感酸甜，深受消費(fèi)者的喜愛(ài)[4]。

苯甲酸在植物界中廣泛分布，具有多方面功效，如調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)與代謝、抵御病害蟲入侵等[5]。有研究表明，多種食品中含有天然苯甲酸[6-8]，其中顧宇翔[9]測(cè)定紅莓、青梅、李等漿果中的天然苯甲酸含量可達(dá)0.5 g/kg。本文選擇近年來(lái)市場(chǎng)上熱銷的漿果進(jìn)行苯甲酸含量的測(cè)定，以期對(duì)后續(xù)的研究提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 樣品采集

本次樣品采集共32份，如表1所示，樣品中蔓越莓17份，其中冷凍鮮果2份，濃縮果汁1份，其余為蔓越莓干。非蔓越莓類樣品共12份，包括楊梅、藍(lán)莓、桑葚、黑莓、樹(shù)莓和黑加侖等。樣品采集途徑為消費(fèi)者日常購(gòu)買途徑，如生鮮超市（盒馬鮮生、百草園等）及電商平臺(tái)（淘寶、拼多多等）。購(gòu)買時(shí)間為2020年9月至2020年12月。由于購(gòu)買途徑便利，樣品送到后立即實(shí)驗(yàn)。

1.1.2 試劑

亞鐵氰化鉀[K4Fe（CN）6·3H2O];乙酸鋅[Zn（CH3COO）2·2H2O];甲醇（CH3OH）色譜純;乙酸銨（CH3COONH4）色譜純。苯甲酸：美國(guó)DR.E公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent1260高效液相色譜儀（DAD）配二極管陣列檢測(cè)器：美國(guó)安捷倫公司;純水儀：Millipore德國(guó)默克公司;渦旋儀：美國(guó)TALBOYS公司;超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司;高速冷凍離心機(jī)：美國(guó)Thermo公司;分析天平：中國(guó)賽多利斯公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 操作步驟

本實(shí)驗(yàn)參照《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定》（GB 5009.28—2016）中條件來(lái)測(cè)定漿果中苯甲酸的含量。樣品粉碎并攪拌均勻，取其中的200 g裝入玻璃容器中，密封，準(zhǔn)確稱取約2 g（精確到0.001 g）試樣于50 mL具塞離心管中，加水渦旋后于50 ℃水浴超聲，冷卻至室溫后加亞鐵氰化鉀溶液和乙酸鋅溶液，離心后水相過(guò)濾膜，待液相色譜測(cè)定。

1.3.2 色譜條件

色譜柱：C18柱，柱長(zhǎng)250 mm，內(nèi)徑4.6 mm，粒徑5 μm。流動(dòng)相：甲醇+乙酸銨溶液=5+95;流速：1 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm;進(jìn)樣量：10 μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 苯甲酸含量測(cè)定結(jié)果分析

苯甲酸含量測(cè)定的結(jié)果如表2所示，將樣品類別按照蔓越莓類與非蔓越莓類分別統(tǒng)計(jì)，17份蔓越莓樣品中檢出率為100%，苯甲酸均值為0.053 g/kg，含量范圍為0.011～0.200 g/kg，標(biāo)準(zhǔn)值為0.041 g/kg。對(duì)未檢出樣本的濃度進(jìn)行修正，為盡可能接近實(shí)際濃度，實(shí)驗(yàn)室將采用1/2 LOQ（0.002 5 g/kg）表示未檢出以及數(shù)值低于LOQ樣本的濃度。15份非蔓越莓樣品中檢出率為20%，檢出的漿果分別為楊梅、樹(shù)莓、黑加侖。苯甲酸均值為0.006 g/kg，含量范圍為0.003～0.029 g/kg，標(biāo)準(zhǔn)值為0.009 g/kg。

2.2 漿果中天然苯甲酸產(chǎn)生機(jī)制

植物在生長(zhǎng)期次級(jí)代謝過(guò)程中會(huì)形成苯甲酸[10]，形成機(jī)制如圖1所示，苯丙氨酸在解氨酶的作用下生成反式肉桂酸，再經(jīng)過(guò)CoA依賴型β氧化途徑在4-豆香酸CoA連接酶的作用下活化產(chǎn)生苯丙酰CoA，最后轉(zhuǎn)化生成苯甲酸[11-12]。

3 結(jié)論與討論

通過(guò)本次調(diào)查與研究，得出了近年來(lái)受到消費(fèi)者歡迎的小漿果中苯甲酸的含量水平，填補(bǔ)了部分小漿果中天然苯甲酸含量的空白，為該部分調(diào)查提供數(shù)據(jù)支持。食品中較低含量的苯甲酸雖然不會(huì)對(duì)人體造成傷害，但是調(diào)查中發(fā)現(xiàn)部分人群將苯甲酸檢出率100%的蔓越莓作為日常保健食品定量食用，攝入量超出正常人群，應(yīng)予以重視。

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