血清ProGRP和NSE在晚期非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其臨床意義

馬曉平 閆紅娟 徐丹 孟群 鞏平

(石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 1腫瘤內(nèi)科，新疆 石河子 832000；2口腔科；3鎮(zhèn)江市第三人民醫(yī)院；4新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第十師北屯醫(yī)院腫瘤科)

根據(jù)組織病理學(xué)不同，將肺癌分非小細(xì)胞肺癌(NSCLC) 和小細(xì)胞肺癌(SCLC) 兩大類，其中，NSCLC病理類型主要是腺癌和鱗癌〔1〕。目前，臨床上運(yùn)用較多的檢測(cè)肺癌的手段有影像學(xué)檢查、支氣管鏡活檢、體液細(xì)胞學(xué)涂片、經(jīng)皮肺穿刺活檢等，但由于缺乏普及性及依從性，80%的肺癌患者在確診時(shí)已出現(xiàn)局部或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 (ⅢB/Ⅳ期)，失去了手術(shù)機(jī)會(huì)，5年生存率≤15%〔2〕。因此，早期、準(zhǔn)確判斷患者療效及耐藥狀況，以指導(dǎo)臨床醫(yī)師用藥及方案的調(diào)整顯得尤為重要。血清胃泌素釋放肽前體(ProGRP)水平在小細(xì)胞肺癌患者中呈高表達(dá)，而且ProGRP對(duì)SCLC的早期診斷價(jià)值較高，與神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)聯(lián)合，能提高對(duì)SCLC分型的檢出率。那么在NSCLC患者中是否是類似作用呢？基于此，本研究擬檢測(cè)晚期NSCLC患者血清ProGRP和NSE水平的表達(dá)情況，分析其與患者臨床特征、TNM分期、病理學(xué)特征之間的相關(guān)性，初步探討其在晚期NSCLC中的臨床意義。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本及其來(lái)源 收集來(lái)自石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科、心胸外科2018年11月1日至2019年10月31日就診的晚期NSCLC患者75例。其中，女43例，男32例，年齡42～80歲，平均59.91歲，有吸煙史者39例，均經(jīng)病理組織學(xué)或細(xì)胞學(xué) (包括手術(shù)標(biāo)本病檢、支氣管鏡活檢、肺穿刺、體液涂片、淺表器官活檢、胸腔積液包埋等) 確診。按組織學(xué)分類：其中腺癌60例，鱗癌15例；表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)基因狀態(tài)：其中陽(yáng)性 (突變型) 43例，陰性 (野生型) 32例；病理學(xué)分級(jí)：其中低分化39例，中分化32例，高分化4例。本研究已通過(guò)石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2主要儀器和試劑 ProGRP電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)試劑盒、NSE電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)試劑盒、Cobas E602全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀 (德國(guó)羅氏公司)；離心機(jī)TD5A (中國(guó)長(zhǎng)沙英泰儀器有限公司)。

1.3ProGRP、NSE水平檢測(cè) 所有入組患者需禁食水至少8 h，入院第2天清晨抽取靜脈血至少2 ml，置于BD真空采血管中，室溫靜置20～30 min，以4 000 r/min離心5 min，立即分離血清，使用電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法，采用雙抗體夾心法原理，檢測(cè)血清ProGRP和NSE水平；血清ProGRP正常參考水平≤84 pg/ml，血清NSE正常參考水平≤25 ng/ml。 檢測(cè)值高于正常參考水平即判定為陽(yáng)性結(jié)果。所有入組患者，一律使用肌酐酶法同時(shí)檢測(cè)肌酐水平。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS20.0軟件進(jìn)行中位數(shù)與四分位間距描述、秩和檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1血清ProGRP和NSE水平與患者臨床特征之間的關(guān)系 血清ProGRP和NSE與晚期NSCLC患者的年齡、性別、吸煙史、美國(guó)東部腫瘤協(xié)作組(ECOG)評(píng)分之間均無(wú)顯著相關(guān)性(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 血清ProGRP和NSE水平與臨床特征的相關(guān)性〔M(P25，P75)〕

2.2血清ProGRP和NSE水平與患者臨床TNM分期的關(guān)系 血清ProGRP和NSE水平與晚期NSCLC患者臨床腫瘤直徑、有無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無(wú)顯著相關(guān)性 (P>0.05)；而隨著患者臨床轉(zhuǎn)移部位數(shù)目的增多，血清ProGRP和NSE水平顯著升高(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 血清ProGRP和NSE水平與臨床TNM分期的相關(guān)性〔M(P25，P75)〕

2.3血清ProGRP和NSE水平與患者病理特征之間的關(guān)系 腺癌患者血清ProGRP和NSE水平顯著高于鱗癌(P<0.05)；EGFR基因陽(yáng)性(突變型)血清ProGRP和NSE水平顯著高于EGFR基因陰性 (野生型)(P<0.01，P<0.001)；血清ProGRP和NSE水平與腫瘤分化程度無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)，見(jiàn)表3。

表3 血清ProGRP和NSE水平與患者病理特征的相關(guān)性〔M(P25，P75)〕

3 討 論

隨著吸煙人數(shù)增加、大氣污染加重，肺癌發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，已處于所有惡性腫瘤死亡率第一位〔3～5〕。NSCLC具有病理機(jī)制復(fù)雜、易耐藥、預(yù)后差等特點(diǎn)。腫瘤標(biāo)志物(TM)〔6〕是由腫瘤細(xì)胞自身合成釋放，是宿主對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生或升高的一類物質(zhì)，存在于血液、體液或組織、細(xì)胞中，其作為一種非侵襲性的檢測(cè)方法，具有創(chuàng)傷小、高效、方便、價(jià)廉及標(biāo)本易獲取等優(yōu)點(diǎn)，逐步成為NSCLC臨床診斷和治療中可信賴的指標(biāo)。

NSE是神經(jīng)源性細(xì)胞分泌的一種蛋白酶〔7〕，是糖酵解過(guò)程中催化2-磷酸甘油與磷酸烯醇式丙酮酸相互轉(zhuǎn)化的水解酶，在神經(jīng)源性惡性腫瘤和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中含量較多。NSE在神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)腫瘤中，其水平呈明顯高表達(dá)狀態(tài)。血清NSE檢測(cè)已多年運(yùn)用于臨床，是目前小細(xì)胞肺癌診治最常用的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)。血清NSE水平在SCLC里顯著高于NSCLC，因此，血清NSE水平對(duì)小細(xì)胞肺癌的診斷及與NSCLC之間鑒別診斷有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，并可用于化療、放療效果的檢測(cè)。

GRP屬于胃腸激素類，其作用是主要刺激胃的G細(xì)胞分泌胃泌素、參與平滑肌細(xì)胞的收縮、促進(jìn)細(xì)胞間的相互作用〔8〕。SCLC是神經(jīng)內(nèi)分泌起源的惡性腫瘤之一，許多SCLC的細(xì)胞株、血液和腫瘤組織里都分泌GRP，并且，GRP和自身受體結(jié)合促進(jìn)DNA合成。因而SCLC患者血中可檢測(cè)到升高的GRP。但GRP半衰期只有2 min，穩(wěn)定性差，難以檢測(cè)。作為GRP的前體ProGRP的穩(wěn)定性更好，半衰期更長(zhǎng) (明顯>2 min)，可通過(guò)檢測(cè)血清或血漿樣本，體現(xiàn)GRP的水平〔9〕。有研究表明〔10〕，血清中GRP的水平與ProGRP呈正相關(guān)。ProGRP是GRP的前體結(jié)構(gòu)，因氨基酸殘基的不同，一般分為3種分子亞型，它們都有共同的ProGRP (31-98) C端序列。ProGRP是一種新的SCLC的腫瘤標(biāo)志物，廣泛存在于神經(jīng)纖維、非胃竇組織、肺、前列腺及腦組織的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞內(nèi)。

文獻(xiàn)證實(shí)〔11〕血清ProGRP和NSE在SCLC患者中的診斷價(jià)值，針對(duì)血清ProGRP和NSE在肺癌中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行了Meta分析顯示〔12〕，血清ProGRP和NSE組合檢測(cè)與血清NSE單獨(dú)檢測(cè)對(duì)SCLC的診斷能力相近，而血清ProGRP擁有更高的特異度，可以作為SCLC診斷的檢測(cè)指標(biāo)。彭彥等〔13〕研究結(jié)果證實(shí)，血清NSE及ProGRP水平在治療有效的患者中較化療前明顯降低，提示血清腫瘤標(biāo)志物變化情況可能對(duì)SCLC化療療效評(píng)估有一定的預(yù)測(cè)作用。結(jié)果顯示，血清ProGRP和NSE表達(dá)水平與晚期非小細(xì)胞肺癌耐藥后患者的年齡、性別、吸煙史、ECOG評(píng)分、分化程度及臨床腫瘤大直徑、有無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無(wú)相關(guān)性，這與宋華等〔14〕研究結(jié)果相似。同時(shí)，本研究顯示，血清ProGRP和NSE水平與臨床M分期遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移部位數(shù)目有關(guān)。相關(guān)研究報(bào)道，程黎明等〔15〕表明，患者血清腫瘤標(biāo)志物水平越高，其臨床分期越晚，生存期越短。GRP與相應(yīng)受體結(jié)合后，可以促進(jìn)惡性腫瘤的細(xì)胞增殖、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移、血管生成等，參與肺癌的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移，ProGRP的促生長(zhǎng)作用是引起惡性腫瘤更有攻擊性及預(yù)后差的原因〔16〕。Shibayama等〔17〕研究者發(fā)現(xiàn)，進(jìn)展期SCLC患者的血清ProGRP水平顯著高于局限期患者，血清ProGRP水平在廣泛期肺癌患者中表達(dá)更高、更明顯。此外，本研究發(fā)現(xiàn)晚期肺腺癌、EGFR基因檢測(cè)陽(yáng)性患者，較鱗癌、EGFR陰性患者，血清ProGRP和NSE水平更易呈高表達(dá)狀態(tài)。

本項(xiàng)研究的不足之處在于為樣本量較少，仍需進(jìn)一步積累，以便得到更穩(wěn)健的結(jié)果。總之，血清ProGRP、NSE在晚期NSCLC的分期、指導(dǎo)治療方面有一定作用，聯(lián)合應(yīng)用可在臨床中發(fā)揮更好的作用。