HPV-DNA分型檢測在宮頸癌前病變早期篩查中的應用價值

高華榮

連云港市贛榆區人民醫院婦科，江蘇 連云港 222100

宮頸癌是臨床上常見的婦科惡性腫瘤之一，近些年其發病率仍持續上升，且有年輕化趨勢，對女性患者身心健康造成嚴重影響［1］。有研究證實，在宮頸癌前病變（CIN）早期及時發現、治療對改善宮頸癌患者預后、延長生存周期有著重要價值［2］。目前CIN早期篩查方法仍無明確標準，有研究顯示，高危型人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染是引發宮頸癌的重要因素，尤其是HPV16、18型，因此HPV-DNA分型檢測在篩查早期CIN中有著良好效果［3］。本研究旨在探討HPV-DNA分型檢測在CIN早期篩查中的應用價值，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年5月—2020年5月連去港市贛榆區人民醫院收治的疑似CIN需進行病理活檢的429例患者為研究對象，納入標準：（1）臨床表現有CIN疑似癥狀者［4］。（2）生殖系統發育正常，月經期正常者。（3）近期無陰道用藥史者。（4）無宮頸外科手術或盆腔放療史者。排除標準：（1）有宮頸癌及CIN病史或放療史者。（2）子宮切除者。（3）妊娠期婦女。患者年齡27～68歲，平均年齡（46.84±7.46）歲，孕次為0～4次，平均孕次為（2.54±0.44）次，主要臨床表現：白帶異常29例，異常陰道出血22例，性交痛5例，性交出血4例。體檢結果：宮頸肥大9例，宮頸息肉11例，宮頸糜爛40例。本次研究經過醫學倫理委員會批準，患者均知悉、同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

所有患者均接受HPV-DNA檢測、細胞學檢測及病理學檢查。（1）HPV-DNA檢測。于患者月經后5d，用無菌棉棒清除宮頸上黏液，使用宮頸標本采集刷在宮頸內1cm處，保持一定壓力，順時針旋轉6圈左右，采集標本。將樣本放入1mL生理鹽水離心管中，4℃條件下保存待檢。使用7500型熒光定量檢測儀（生產廠家：美國ABI公司）檢測HPV-DNA表達情況，由專職檢驗人員按照高危型HPV核酸檢測試劑盒（生產廠家：凱杰生物工程有限公司）說明書內容嚴格操作，該試劑盒可以特異性識別HPV16及HPV18，同時能夠檢測出其他12種高危類型，檢測出任意一種HPV型即為陽性，無HPV感染為陰性。（2）細胞學檢測。按上述方式采集樣本，制片染色后根據Bethesda分類系統閱片診斷［5］，包括：不典型腺細胞（AGC）、鱗癌（SCC）、無惡性病變或無上皮內病變（NILM）、意義不明的不典型鱗狀細胞（ASCUS）、非典型鱗狀細胞、低度鱗狀上皮內病變（LSIL）、不典型鱗狀細胞（ASCH）、高度鱗狀上皮內病變（HSIL）。診斷結果為正常或NILM時為陰性，其余結果為陽性。（3）病理學檢查。HPV陽性且細胞學檢驗結果≥ASCUS、HPV陰性且細胞學檢驗結果≥LSIL患者進行活檢和陰道鏡檢查。若陰道鏡下暴露充分且有病變位置異常則進行活檢，若陰道鏡下暴露不充分則取宮頸搔刮術。將陰道鏡下所取宮頸標本或活檢標本送至本院病理科進行制片診斷，病理結果按照WHO制定的宮頸腫瘤組織分類標準［6］分為：宮頸上皮內瘤變（CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級）、宮頸癌SCC及正常或慢性炎癥，檢測CINⅠ級及以上為陽性，正常或慢性炎癥為陰性。同時，由另一位有豐富檢驗經驗的病理師對結果復審，若不一致，將送至中國醫學科學院進行最終診斷。

1.3 觀察指標

（1） HPV-DNA、細胞學及病理學檢測結果。（2）HPV-DNA檢測對CIN早期篩查效果及對ASCUS人群分流效果，以病理學診斷結果CINⅡ級及以上為金標準，計算HPV-DNA檢測對總人群和ASCUS人群CINⅡ級及以上檢出的靈敏度、特異度、PPV、NPV及95%CI。

1.4 統計學方法

采用SPSS22.0軟件進行統計分析，計量資料以均數±標準差（s）表示，組間比較采用t檢驗，計算HPV-DNA檢測的特異度、靈敏度及95%CI，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HPV-DNA、細胞學及病理學檢測結果

429例受試者中，病理學檢查結果：陽性（CINⅠ級及以上）共60例，其中CINⅠ級18例、CINⅡ級16例、CINⅢ級21例、SCC5例，陰性369例均為炎癥。細胞學結果為陽性（除正常或NILM外其他檢驗結果）106例，其中ASCUS42例、LSIL23例、HSIL15例、ASCH22例、AGC19例。HPV-DNA檢查結果：陽性（有任意一種HPV）患者69例，其中HPV16陽性14例、HPV18陽性6例，其他類別陽性49例。

2.2 HPV-DNA檢測對CIN早期篩查效果及對ASCUS人群分流效果

HPV-DNA檢測對總人群CIN早期篩查效果為高危型HPV靈敏度95.21%，特異度為87.84%，HPV16/18類型合并檢測靈敏度為65.88%，特異度為97.48%；對ASCUS人群分流效果為高危型HPV靈敏度為90.55%，特異度為78.24%，HPV16/18類型合并檢測靈敏度為56.44%，特異度為95.67%，見表1。

表1 HPV-DNA檢測對CIN早期篩查效果及對ASCUS人群分流效果

3 結論

近年來，宮頸癌發病率在全球范圍內均呈現上升趨勢，大多由初次生產年齡過早、性生活過早、不固定性伴侶等原因造成，這也是導致目前宮頸癌發病率年輕化的主要原因［7］。高危型HPV持續感染是宮頸癌發病的主要危險因素之一，由于HPV感染發生到CIN有一個漫長過程，因此臨床上多通過早發現、早診斷來實現對CIN或宮頸癌的治療和預防［8］。目前常用的診斷CIN方法包括宮頸刮片、液基細胞學檢測、陰道鏡檢查、HPV檢測［9］，其中HPV檢測因操作便捷、費用低、受試者無不適感等原因，成為臨床上較為常用篩選手段［10-11］。

本文研究結果顯示，429例受試者經病理學檢驗CIN陽性有60例（13.99%），其中HPV16陽性14例、HPV18陽性6例，其他類別陽性49例，檢出比例低于潘敏等［12］研究CIN陽性檢出率16.09%，可能是由于本文研究對象年齡稍大有關。HPV-DNA檢測對總人群CIN早期篩查效果中高危型HPV靈敏度達95.21%，特異度為87.84%，HPV16/18類型合并檢測特異度達97.48%，但靈敏度僅65.88%，結果說明高危型HPV檢驗對CIN早期篩查效果更好，與潘敏等［12］研究結果相符。ASCUS是一種常見的宮頸細胞學異常，其既可以提示HPV感染、CIN出現，也可提示炎癥、細胞衰退等狀態，對ASCUS進行分流可以更好的預防CIN及宮頸癌。本研究顯示，HPV-DNA檢測對ASCUS人群分流效果中高危型HPV靈敏度達90.55%，特異度為78.24%，HPV16/18類型合并檢測靈敏度為56.44%，特異度為95.67%，與張韶凱等［13］研究結果一致。本研究說明HPV-DNA分型檢測在CIN早期篩查中有著很好的應用價值，且高危型HPV-DNA檢測在CIN篩查及ASCUS分流中有著較高的靈敏度和特異度，臨床效果更好。

綜上所述，HPV-DNA分型檢測對CIN早期篩查和ASCUS人群分流有著較高的靈敏度和特異度，有很好的臨床應用價值。