彩超聯(lián)合血清AFP、CEA及HBV-DNA對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值

龐玉珍，殷彥華，王婷婷，甄宜蘭

(1.安徽省中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院 超聲科，安徽 合肥230031；2.安徽省中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)科，安徽 合肥230031)

原發(fā)性肝癌最常見(jiàn)的惡性腫瘤類型，是世界范圍內(nèi)第二大癌癥死亡的主要原因之一[1-2]。其中，肝細(xì)胞癌占所有原發(fā)性肝癌的90%左右，通常是由于慢性乙型或丙型肝炎病毒感染，加上宿主、疾病和環(huán)境因素之間的復(fù)雜相互作用引起[3]。其發(fā)病率高，死亡率高，并且臨床早期診斷困難，大部分患者被診斷為肝癌是已經(jīng)進(jìn)入晚期，因此探究早期診斷價(jià)值較高的臨床檢查手段至關(guān)重要[4]。彩超檢查是一種經(jīng)濟(jì)，實(shí)時(shí)，并且無(wú)創(chuàng)的實(shí)時(shí)成像技術(shù)，在臨床上被廣泛應(yīng)用于診斷PHC。通過(guò)影像學(xué)的檢查，患者的肝功能不全或肝硬化等并發(fā)癥也可發(fā)現(xiàn)；但是由于影像學(xué)的局限性，且大多依賴于檢查者的經(jīng)驗(yàn)，一些早期患者無(wú)法被及時(shí)診斷為肝癌，在臨床上很多時(shí)候診斷時(shí)已經(jīng)處于晚期[5]。隨著免疫技術(shù)，電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的發(fā)展，常見(jiàn)的血清腫瘤標(biāo)志物如AFP、CEA 及HBV-DNA也可用于診斷PHC，但是AFP、CEA在其他惡性腫瘤中均可表達(dá)，診斷的特異度不高，通常還需要結(jié)合具體體征判斷，因此尋找特異度高的診斷方法成為研究重點(diǎn)[6]。本文以60例PHC患者為研究對(duì)象，探究彩超聯(lián)合血清學(xué)標(biāo)志物AFP、CEA 及HBV-DNA檢查在PHC中的早期診斷中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院在2016年7月至2021年3月收治的60例PHC患者作為PHC觀察組，所有患者均進(jìn)行肝手術(shù)切除術(shù)并且經(jīng)病理診斷為PHC。其中PHC觀察組男性患者占49例，女性患者占11例，年齡在29-85歲之間，平均年齡為(45.18±18.34)。將同期入院的52例良性腫瘤患者納為良性腫瘤組，男性患者占37例，女性患者占15例，年齡在34-81歲之間，平均年齡為(43.35±14.24)。正常對(duì)照組中納入52例健康人群，年齡在32-79歲之間，男性患者占34例，女性患者占18例，平均年齡為(44.26±16.41)。3組患者的一般資料在年齡、性別上的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡大于18歲；符合原發(fā)性肝癌病理診斷者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他原發(fā)性腫瘤患者；有嚴(yán)重的自身免疫性疾病患者；心、肝、腎功能異常者；認(rèn)知或神經(jīng)功能異常者。所以患者自愿參加本試驗(yàn)且經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 檢查方法

1.2.1血清標(biāo)志物AFP、CEA，HBV-DNA檢查 于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下，抽取3組受試者靜脈血5 ml后1 000 rpm離心10 min，取上層血清待用。AFP、CEA均使用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)，使用儀器為美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司生產(chǎn)的AU5800 型全自動(dòng)生化分析儀。血清AFP的陽(yáng)性參考值為：AFP>8.1 ng/mL，血清CEA的陽(yáng)性參考值為：CEA>5.0 ng/mL。HBV-DNA使用定量PCR法檢測(cè)，使用儀器為美國(guó)羅氏公司Light Cycler熒光PCR檢測(cè)儀。HBV-DNA的陽(yáng)性參考值為：HBV-DNA<1000拷貝/mL。3種指標(biāo)任一結(jié)果陽(yáng)性，即可判定為血清學(xué)聯(lián)合檢查陽(yáng)性。

1.2.2彩超 3組受試者行仰臥位，選用本院彩超(GE-LOGIQ-E9)，調(diào)至3-5.5 MHz的探頭頻率，檢查范圍為膈肌至趾骨聯(lián)合下緣處。過(guò)程中注意患者肝臟的位置、大小、形態(tài)、邊界是否清楚、內(nèi)部是否鈣化等。影像學(xué)檢查由兩名醫(yī)生進(jìn)行雙盲評(píng)估并將影像學(xué)結(jié)果與所有受試者的組織病理學(xué)結(jié)果進(jìn)行比較。

1.3 觀察指標(biāo)比較3組受試者的AFP、CEA，HBV-DNA水平；計(jì)算單獨(dú)彩超檢查，單獨(dú)AFP、CEA，HBV-DNA定量檢查，彩超聯(lián)合AFP、CEA，HBV-DNA診斷HPC的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度。

2 結(jié)果

2.1 3組患者AFP、CEA、HBV-DNA水平比較PHC觀察組患者血清AFP、CEA和HBV-DNA平均水平分別為163.27±45.21 ng/mL、21.36±5.41 ng/mL，明顯高于良性疾病組和正常對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 3組患者血清AFP、CEA、HBV-DNA水平比較

2.2 AFP、CEA、HBV-DNA聯(lián)合診斷結(jié)果在112例肝臟腫大患者中，經(jīng)病理檢查發(fā)現(xiàn)，60例為PHC患者，52例為肝臟良性腫瘤患者。AFP、CEA、HBV-DNA聯(lián)合診斷顯示PHC患者有62例，肝臟良性腫瘤有50例，見(jiàn)表2。

表2 3組患者的AFP、CEA、HBV-DNA聯(lián)合診斷結(jié)果(例)

2.3 彩超檢查結(jié)果在112例肝臟腫大患者中，經(jīng)病理檢查發(fā)現(xiàn)，60例為PHC患者，52例為肝臟良性腫瘤患者。彩超顯示PHC患者有65例，肝臟良性腫瘤有47例，見(jiàn)表3。

表3 3組患者的肝臟彩超診斷結(jié)果(例)

2.4 彩超、AFP、CEA、HBV-DNA聯(lián)合診斷結(jié)果在112例肝臟腫大患者中，經(jīng)病理檢查發(fā)現(xiàn)，60例為PHC患者，52例為肝臟良性腫瘤患者。彩超、AFP、CEA、HBV-DNA聯(lián)合診斷顯示PHC患者有70例，肝臟良性腫瘤有42例，見(jiàn)表4。

表4 3組患者彩超、AFP、CEA、HBV-DNA聯(lián)合診斷結(jié)果(例)

2.5 3種檢查方式對(duì)PHC診斷價(jià)值比較彩超、AFP、CEA、HBV-DNA聯(lián)合診斷的敏感度、準(zhǔn)確度均大于單純彩超檢查及單純AFP、CEA、HBV-DNA聯(lián)合檢查。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表5。

表5 3組不同診斷方法的診斷價(jià)值比較(%)

3 討論

近年來(lái)，HPC的發(fā)病率和死亡率居高不下，呈逐年上升趨勢(shì)[7]。隨著腫瘤分子生物學(xué)、免疫學(xué)、人類基因組計(jì)劃的發(fā)展和現(xiàn)代新型檢測(cè)設(shè)備的臨床應(yīng)用，血清腫瘤標(biāo)志物及腫瘤基因含量測(cè)定已成為腫瘤基礎(chǔ)和臨床研究的熱點(diǎn)，為提供以下臨床信息:1)腫瘤的篩查和高危人群的篩查2)腫瘤的鑒別診斷和輔助病理診斷。3)確認(rèn)手術(shù)、放療和/或藥物治療是否有效。4)檢測(cè)的腫瘤變化[8-9]。檢測(cè)治療過(guò)程中不同時(shí)間點(diǎn)的血清腫瘤標(biāo)志物及腫瘤基因含量可以幫助檢測(cè)腫瘤殘留、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。目前，血清腫瘤標(biāo)志物及腫瘤基因含量作為的常規(guī)檢測(cè)技術(shù)，已在眾多三甲醫(yī)院的臨床應(yīng)用和科研中得到廣泛應(yīng)用[10-11]。血清腫瘤標(biāo)志物及腫瘤基因含量檢測(cè)結(jié)合影像學(xué)技術(shù)的應(yīng)用，促進(jìn)了聯(lián)合檢測(cè)的發(fā)展，其在早期診斷、分期、分型、預(yù)后判斷等方面已被廣泛接受[12]。

在中國(guó)，約90%的PHC病例可合并肝硬化得發(fā)生。目前臨床上最有效的診斷PHC檢測(cè)手段仍然是AFP的含量測(cè)定。AFP表達(dá)陰性的PHC占20%-30%。即使是AFP陽(yáng)性的病例，病變的診斷和定位也必須依賴影像學(xué)檢查[12-13]。CEA最初在結(jié)腸癌和胎兒小腸組織中發(fā)現(xiàn)，故命名為癌胚抗原。健康人血清CEA濃度低于2.5 ng/mL 占97%。在結(jié)直腸癌、胰腺癌、胃癌、癌癥、小細(xì)胞肺癌、乳腺癌、甲狀腺髓樣癌等中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)CEA水平升高。CEA高于25 ng/mL可能提示胃腸道癌的存在[12,14]。然而，15%-53%吸煙、妊娠和心血管疾病、糖尿病和非特異性結(jié)腸炎患者血清CEA水平也有升高，因此，CEA僅使用作為診斷PHC輔助診斷標(biāo)志物[15]。HBV-DNA慢性感染是肝臟相關(guān)發(fā)病率和死亡率的主要原因[16]。HBV是肝病毒科的原型成員，由包膜病毒組成，包膜病毒包含約3.2 kbp的松弛環(huán)狀雙鏈DNA(dsDNA)基因組，包膜病毒編碼衣殼蛋白。基因組包含4個(gè)基因，形成具有共同poly-A位點(diǎn)的不同RNA，編碼7種不同的蛋白。這些蛋白包括:結(jié)構(gòu)蛋白、HBsAg(有3種形式:大、中、小)和HBV核心抗原(HBcAg)，HBV e抗原(HBeAg)是前核/核心ORF基因產(chǎn)物的加工和分泌形式，HBV聚合酶(pol)，以及轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)激活子HBV X蛋白(HBx)[17]。HBV- DNA整合在感染早期出現(xiàn)，通常在PHC和肝硬化合并長(zhǎng)期慢乙肝患者中被發(fā)現(xiàn)，但最近也在慢乙肝患者組織學(xué)觀察到的肝損傷之前被描述[18]。HBV- DNA在是監(jiān)測(cè)HPC中肝炎病毒感染的重要檢測(cè)方法，是臨床上重要的HBV復(fù)制標(biāo)志，被用于國(guó)際科學(xué)指南中描述PHC分期和治療監(jiān)測(cè)[16,19]。

本研究檢測(cè)了肝癌患者血清AFP、CEA、HBV-DNA水平。結(jié)果顯示PHC患者血清標(biāo)志物的陽(yáng)性率分別為81.67%、78.34%和73.34%，明顯高于正常對(duì)照組。雖然血清標(biāo)志物的檢測(cè)精度已經(jīng)有了很大的提高，但仍然存在許多不足。不同的病理類型和分期使用不同的試劑會(huì)導(dǎo)致診斷敏感性和特異性差異較大，可能會(huì)導(dǎo)致漏診和誤診。

影像學(xué)檢查作為PHC的重要診斷手段之一，對(duì)乙型肝炎、肝硬化等有發(fā)生PHC風(fēng)險(xiǎn)的慢性肝病患者尤其重要。此外，將PHC與其他實(shí)體病變?nèi)缭偕越Y(jié)節(jié)、非典型結(jié)節(jié)和融合肝纖維化區(qū)分開(kāi)來(lái)是重要而困難的。然而，對(duì)于早期直徑小于1 cm的肝癌，在彩超上并不能很好地分辨出來(lái)。由于肝癌的血供應(yīng)不同，病理類型和細(xì)胞分化不同，因此有必要通過(guò)病理檢查結(jié)合血清標(biāo)志物進(jìn)行診斷。本研究中，單獨(dú)血清標(biāo)志物檢測(cè)的敏感度為76.7%，特異度為69.23%，準(zhǔn)確度為73.21%，單獨(dú)彩超檢查的敏感度為78.34%，特異度為65.38%，準(zhǔn)確度為72.32%，彩超聯(lián)合AFP、CEA、HBV-DNA檢測(cè)診斷價(jià)值顯著提高，其敏感度為85.00%，準(zhǔn)確度為75.00%。

綜上所述，彩超聯(lián)合血清AFP、CEA及HBV-DNA降低了原發(fā)性肝癌的誤診率，對(duì)臨床診斷原發(fā)性肝癌有重要意義。

作者簡(jiǎn)介：龐玉珍(1968-),女,本科，主治醫(yī)師，研究方向：臨床超聲診斷。