拮抗性芽孢桿菌Y1的鑒定及其粗提物抗白色念珠菌特性的研究

喬云龍，曾曉龍，黃益芃，楊成

（皖南醫(yī)學(xué)院，安徽蕪湖 241002）

芽孢桿菌（Bacillus sp.），由于能產(chǎn)生多種胞外生物活性物質(zhì)，在醫(yī)藥、食品、農(nóng)業(yè)及飼料工業(yè)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景[1]，其中的抗菌肽類物質(zhì)往往又是該類芽孢桿菌產(chǎn)生的一類主要活性物質(zhì)，它們能夠造成細(xì)胞膜損傷，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物外泄而具有廣譜抗菌、抗病毒、抗原蟲和抗腫瘤等活性[2-3]，而且芽孢桿菌在一定條件下產(chǎn)生芽孢，對(duì)高溫、高壓、強(qiáng)酸堿、擠壓等不良環(huán)境的抵抗力很強(qiáng)，并且具有很強(qiáng)的蛋白酶、淀粉酶等活性，也是開發(fā)新型微生態(tài)多功能劑的首選菌種，且近年來，不斷有新的活性芽孢桿菌菌株及抗菌物質(zhì)被報(bào)道[4-6]，因此，對(duì)芽孢桿菌類微生物進(jìn)行研究，為尋找抗生素的替代物開辟了新途徑，同時(shí)也能在生物防治、微生態(tài)制劑中發(fā)揮重要作用。

本研究從藥用植物車前草組織篩選出一株對(duì)白色念珠菌具有很強(qiáng)抑制活性的芽孢桿菌，擬通過形態(tài)學(xué)觀測(cè)、生理生化特征及分子生物學(xué)手段分析明確該活性菌株種屬分類地位，在此基礎(chǔ)上對(duì)該菌株胞外抗菌活性物質(zhì)的抗菌特性進(jìn)行初步研究，為開發(fā)具有抗白色念珠菌活性代謝產(chǎn)物提供一定的資源。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 菌株

芽孢桿菌Y1，白色念珠菌，皖南醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。

1.1.2 培養(yǎng)基

發(fā)酵培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，蒸餾水1 000 mL，自然pH，121℃，15 min；PDA固體培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，蒸餾水1 000 mL，自然pH，121℃，15 min；營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：蛋白胨10 g，牛肉膏3 g，氯化鈉5 g，瓊脂20 g，蒸餾水1 000 mL，121℃，15 min。……