羊水穿刺在產前篩查無創高風險病例中染色體異常的產前診斷價值

胡文香，黃藝璇

（贛州市婦幼保健院產前診斷科，贛州 341000）

胎兒染色體異常在出生缺陷中占比較大，一旦胎兒發生染色體異常影響巨大，會導致孩子智力低下，生長發育遲緩，先天性畸形等，并且大多數異常都不可逆，缺乏有效的治療措施[1]。基于此，為了減少染色體異常導致的缺陷兒出生率，羊水穿刺應用于產前篩查無創高風險病例之中尤為重要。染色體異常的產前檢查是為了準確評估患者攜帶染色體異常胎兒的風險，而在產前診斷當中最常見的就是染色體異常，有染色體數目異常、染色體結構異常和微結構異常等，數目異常中13號、21號、18號以及X、Y染色體異常最為常見[2]。本文研究羊水穿刺在產前篩查無創高風險病例中染色體異常的產前診斷價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年03月至2021年03月我院收治68例產前篩查無創高風險病例。病例的年齡在21~44歲之間，平均年齡（36.78±5.76）歲；病例孕周13~21周，平均孕周為（17.99±4.97）周；初產婦38例，經產婦30例。本次研究經過我院倫理委員會審核與批準，孕婦已明確知曉羊水穿刺的流程，目的與風險，簽署了知情同意書。

納入標準[2]：按照正常規律自愿接受產前孕檢的病例；唐氏篩查結果提示為高風險的病例；自愿接受羊水穿刺的病例；符合隨訪的病例。單胎妊娠。排除標準：明確拒絕行羊水穿刺的病例；無法獲得臨床隨訪的病例；精神異常存在認知功能障礙的病例；嚴重凝血功能障礙的病例；存在先兆流產癥狀的病例；合并婦科炎癥或腫瘤的病例。

1.2 方法 常規NIPT檢測：抽取所有患者早晨空腹狀態下靜脈血5毫升，以一萬rpm離心10分鐘處理后提取其中游離DNA，建庫、測序，經PCR擴增，利用新一代高通量測序技術實現覆蓋度測序，分析遺傳信息可得到每種染色體的Z值。正常來說，13、18、21號染色體Z值置于-3.0~3.0區間內為低風險，高于該區間為高風險[3]。

羊水穿刺—核型分析：NIPT檢測高風險者知情同意和咨詢后，在其孕18~30周實施羊膜腔穿刺術。取出羊水約20毫升，裝入兩個無菌離心管中，常溫下2000 rpm離心處理7分鐘，保留1毫升左右的羊水細胞層放置于無菌T形培養瓶內接種，把培養基與細胞液均勻混合后，放置培養箱內培養，環境保持37℃、5%CO2，每9天更換一次新培養基，在細胞繁殖旺盛期提取羊水細胞，經消化、低滲、預固定、固定處理后滴片，G顯帶，鏡下觀察，記下二十個分散較好的中期分裂相，隨機挑選其中4個進行研究，以人 類 細 胞 遺 傳學國際命名體制標準實現核型分析。入組孕婦穿刺前均核查血型，若為Rh陰性，而其配偶為Rh陽性，介入性產前診斷穿刺后應立即注射抗RhD免疫球蛋白[4]。

1.3 觀察指標 采取電話隨訪或查閱產科病例資料的方法，對全部患者在預產期后進行信息確認，記錄并統計所有染色體異常的胎兒。

1.4 統計學處理 采取SPSS 21.0統計軟件來計算與分析本文的統計結果。計量資料格式為（±s），不同組別的數據對比利用樣本t驗證；計數數據采用[n（%）]代替，與之實現χ2校驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 隨訪結果確認情況 68例產前篩查無創高風險病例，臨床隨訪染色體異常有46例（67.65%），其中13-三體綜合征1例（2.17%），18-三體綜合征4例（8.69%），21-三體綜合征25例（54.35%），性染色體異常16例（34.79%）。見表1。

2.2 羊水穿刺分析檢出各種三體綜合征狀況與靈敏度、準確度、特異度 68例隨訪確認與羊水穿刺-核型分析檢出各類型染色體異常情況對比，詳見表1；以確認的臨床結果為準，羊水穿刺-核型分析判定各種染色體綜合征的靈敏度、準確度、特異度對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表1 羊水穿刺-核型分析檢出各種三體綜合征狀況（n=68）

表2 羊水穿刺-核型分析診斷不同染色體異常的效能

2.3 羊水穿刺 核型分析判定總染色體異常狀況隨訪確認的總染色體異常46例，無染色體異常22例；羊水穿刺分析判定總染色體異常43例，無染色體異常17例。見表3。

表3 羊水穿刺-核型分析判定總染色體異常狀況

3 討論

人類具有23對（46條）染色體，其中22對常染色體，1對性染色體，男為XY，女為XX。當染色體數量增加、減少，或染色體結構出現異常，那么極有可能就會出現染色體異常疾病，嚴重程度與異常程度有關，染色體異常越嚴重，疾病的表現也就會越重[5]。而染色體異常檢查應該基于充分和準確的信息提供之后，由患者自主選擇，每個病例都有權進行或拒絕產前遺傳篩查和診斷性檢查，這一點是毋庸置疑的，本次研究在合法合規的背景下進行，在產前篩查無創高風險病例中染色體異常的產前診斷中行羊水穿刺[6]。無創性胎兒染色體非整倍體檢測（NIPT），也稱無創產前DNA檢測，采集孕婦外周血，提取DNA，采用新一代高通量測序技術，再結合生物信息學分析得出胎兒患染色體疾病風險。但是但由于NIPT篩查結果受到孕多因素影響，準確率降低，因此對于NIPT高風險人群，最好是再次行羊膜腔穿刺術做進一步診斷[7]。“羊膜腔穿刺術”俗稱羊水穿刺，是有創介入性產前診斷技術，應用廣泛，在超聲介導下，用一根細長針穿過孕婦肚皮、子宮壁之后進入羊膜腔，按照規范抽取羊水獲得胎兒細胞或DNA，經實驗室處理發送報告，從而進行遺傳學檢查，以此來判斷胎兒是否存在染色體異常或者是染色體相關疾病[8]。

13三體綜合征（Patau綜合征），體細胞基因組額外多出一條13號染色體所引起。18-三體綜合征（愛德華茲綜合癥），是患者多了1條18號染色單體。 21-三體綜合征（唐氏綜合征），是常規染色體中增加了一條21號染色體。性染色體異常綜合征指的是性染色體x或y發生數目異常或結構畸變[9]。

劉慧等[10]認為，對NIPT高風險人群，行羊水穿刺對于染色體異常具有較高診斷價值，可以為優生優育、遺傳咨詢提供可靠的理論依據參考。于艷[11]等研究，將患者分為羊水穿刺組和NIPT組，羊水穿刺是具備產前診斷指征孕婦首選的診斷方法，能夠及時發現染色體異常，慎用NIPT。卜秀芬[12]等認為，染色體微陣列分析對于無創產前檢測具有診斷價值，也可作為產前診斷方案。周月云[13]等探討產前不同診斷指征與孕婦羊水穿刺胎兒核型的關系，研究認為可以為產前診斷提供遺傳咨詢。在本次結果中，對孕婦實施產前篩查羊水穿刺，總染色體異常的靈敏度93.47%，特異度77.27%，準確度88.24%。故本可看出，用羊水穿刺-核型分析可以有效檢出異常核型，能夠幫助孕婦選擇性分娩健康的胎兒。

綜上所述，羊水穿刺對NIPT高風險人群染色體異常診斷價值高，是產前診斷起著重要作用的一種技術，值得臨床推廣。