代謝相關脂肪性肝病患者血清高遷移率族蛋白A1的表達及意義

程銀飛, 黃 偉, 陸翠華

(1. 江蘇省如東縣人民醫院 消化內科, 江蘇 南通, 226000; 2. 南通大學附屬醫院 消化內科, 江蘇 南通, 226000)

代謝相關脂肪性肝病(MAFLD)是指基于肝活檢組織學或影像學、血液生物標志物檢查提示存在脂肪肝，且合并超重/肥胖或2型糖尿病或代謝功能障礙的全身代謝性疾病[1]。據統計，中國MAFLD的患病率為29.2%[2], 全球患者數量高達10億[3], 并且尚無理想的治療藥物。研發[4]發現糖尿病小鼠模型的高遷移率族蛋白A1(HMGA1)顯著上調和積聚。鑒于糖尿病有很高的肝病進展風險，本研究推測HMGA1與MAFLD存在一定的關聯性。本研究探討MAFLD患者血清HMGA1的表達及臨床意義，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取如東縣人民醫院2020年5月—2021年1月診斷為MAFLD的34例患者為MAFLD組，另選取同期36例健康體檢者為對照組。MAFLD組男19例，女15例; 年齡23～75歲，平均(57.91±12.36)歲。對照組男20例，女16例; 年齡40～76歲，平均(60.28±9.99)歲。2組患者性別、年齡等基礎資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)。

MAFLD診斷標準[1]: 基于常規檢測手段(包括活檢、影像學及生化指標)提示存在脂肪肝，且合并2型糖尿病或超重/肥胖或代謝功能障礙。代謝功能障礙需滿足至少以下2項: 腹型肥胖、高血壓、甘油三酯(TG)水平升高、高密度脂蛋白(HDL)水平下降、血糖升高但無糖尿病、胰島素抵抗指數升高、超敏C反應蛋白(hs-CRP)升高。

納入標準: ① MAFLD患者及同期體檢健康人群; ② 患者及家屬簽署知情同意書。排除標準: ① 孕婦或哺乳期婦女; ② 合并其他肝病(如病毒性肝炎、自身免疫性肝病、酒精性肝病、肝豆狀核變性以及肝臟惡性腫瘤、感染和膽道疾病)者; ③ 嚴重的全身系統疾病者; ④ 需要放化療或者最近服用過免疫抑制劑者; ⑤ 外科手術、應激反應、感染、腫瘤等引發急性炎癥反應或慢性炎癥等影響體內白細胞介素-6(IL-6)水平的疾病者。

1.2 人體測量學指標[5]

采用標準身高測定尺和RGZ120型體質量計，由專人測定身高、體質量，身高測量精確至0.01 m, 體質量測量精確至1 kg, 計算體質量指數(BMI)。

1.3 生物化學指標

抽取所有患者清晨空腹靜脈血5 mL, 將全血標本室溫放置2 h, 經1 000×g離心20 min, 取上清置于-80 ℃保存。采用己糖激酶法測定血清血糖(GLU)水平; 利用高效液相色譜法測定血清糖化血紅蛋白(GHb)水平; 利用酶法測定血清TG、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平; 利用IFCC速率法測定血清谷氨酸-丙酮酸轉氨酶(ALT)、天門冬氨酸轉氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)水平[6-7]; 采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA), 采用日立7600自動生化分析儀在450 nm波長下測定IL-6和HMGA1吸光度，計算樣品濃度。

1.4 統計學處理

2 結 果

2.1 2組血清HMGA1含量比較

MAFLD組HMGA1含量為(11.97±0.45) ng/mL, 高于對照組的(8.34±0.40) ng/mL, 差異有統計學意義(P<0.01)。

2.2 Pearson相關性分析

HMGA1與BMI、IL-6、GLU、GHb、TG、ALT均呈線性正相關(P<0.05或P<0.01), 與LDL-C、AST、ALP、GGT無相關性(P>0.05)。見圖1。

圖1 HMGA1與各指標的相關性

2.3 多元線性相關性分析

經多元線性回歸分析發現, HMGA1與IL-6存在顯著相關性(P<0.05)。見表1。

表1 多元線性相關性分析

3 討 論

2020年4月，國際專家組[8]對MAFLD的診斷達成共識，即基于肝活檢組織學或影像學、血液生物標志物檢查提示存在脂肪肝，且合并超重/肥胖或2型糖尿病或代謝功能障礙[1]。高遷移率族蛋白(HMG)在多種惡性腫瘤中高表達[9-11]。研究[12]發現, HMGB1可介導多種炎癥信號轉導途徑，與肝臟炎癥的嚴重程度密切相關，提示HMGB1在MAFLD的發生、發展中起到非常重要的作用。ZHANG Q H等[4]研究發現，糖尿病模型小鼠HMGA1顯著上調和積聚，體外實驗也發現高糖可增加HMGA1的表達。本研究發現MAFLD患者的血清HMGA1含量顯著高于對照組，初步證實血清HMGA1水平與MAFLD的發生密切相關。

本研究經線性相關性分析發現，HMGA1與BMI、IL-6、GLU、GHb、TG、ALT均呈線性正相關。既往關于BMI動態變化與MAFLD相關性的隊列研究[13-14]顯示, BMI長期處于高水平是MAFLD發病的獨立危險因素。隨著超重/肥胖成為MAFLD的重要確診條件之一, HMGA1與BMI的正相關性提示HMGA1有可能在MAFLD發生及病情發展過程中起到重要作用。IL-6作為炎癥指標之一，被認為是肝細胞刺激因子，但是IL-6信號通路持續處于激活狀態不利于肝臟，并可最終引發肝臟腫瘤[15]。本研究發現血清HMGA1與IL-6的表達水平呈正相關，提示HMGA1與IL-6對MAFLD的反應高度一致。此外, HMGA1與GLU、GHb呈正相關，亦進一步佐證了血清中IL-6與GLU、GHb呈正相關，與既往關于IL-6通過NF-κB、AMPK等信號路徑誘導MAFLD患者產生胰島素抵抗(IR)的研究結論相一致[16]。值得注意的是，動物實驗[17-18]表明敲除C1q/腫瘤壞死因子相關蛋白12(CTRP12)的雄性小鼠經高脂喂食后，體內循環TG和游離脂肪酸含量明顯降低，導致能量消耗減少、體質量增多。CTRP12還可激活PI3K-Akt信號路徑，以促進肝細胞對葡萄糖的攝取，改善IR。

既往研究[19]在蛋白水平揭示IL-6的異常與MAFLD的進展有關，體現為IL-6在MAFLD患者血清中高表達。有研究[20]在基因多態性層面論證IL-6與MAFLD的相關性，認為IL-6基因多態性與人群中MAFLD的存在有關。經多元線性回歸分析發現, HMGA1與IL-6存在顯著線性正相關，提示HMGA1在MAFLD致病機制中發揮了重要作用，或可作為MAFLD病情嚴重程度的標志物。

本研究揭示HMGA1與MAFLD的關系更側重于代謝功能異常方面，并未對MAFLD病理進行分型，為了進一步探討HMGA1與MAFLD不同分型的關系，后續將開展動物實驗，為HMGA1與MAFLD關系提供更為直接的證據。此外，鑒于本研究的樣本量較少，后續將開展大數量樣本研究進一步驗證上述結論。