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芭蕉根質量標準研究*

2022-01-19 06:01:10劉理燕文雨霜賀亞都沈艷珍李月婷李勇軍
中國藥業 2022年1期
關鍵詞:貴州

劉理燕,文雨霜,賀亞都,沈艷珍,馬 雪,李月婷,李勇軍△

(1.貴州醫科大學民族藥與中藥開發應用教育部工程研究中心·省部共建藥用植物功效與利用國家重點實驗室,貴州 貴陽 550004;2.貴州醫科大學藥學院,貴州 貴陽 550004;3.貴州維康子帆藥業股份有限公司,貴州 貴陽 550004;4.貴州醫科大學貴州省藥物制劑重點實驗室,貴州 貴陽 550004)

芭蕉根是芭蕉科植物芭蕉Musa basjooSied.et Zucc.的干燥根莖,廣泛分布于亞熱帶地區,在貴州、廣西、云南、四川、臺灣、海南均有分布[1-2]。作為貴州省少數民族習用藥材,主要用于治療水腫、天行熱病、消渴、腳氣、血淋、驚風、黃疸、血崩、癰腫療瘡等,具有利尿、止渴、解毒、清熱功效[3-4]。目前主要針對芭蕉根的抗氧化、鎮痛、抑制α-葡萄糖苷酶、抗金黃色葡萄球菌活性,以及促成骨細胞增殖、礦化、分化的活性成分進行藥理學研究[5-8]。從芭蕉根中分離得到了黃酮類、皂苷類、香豆素類、多糖、蒽醌類、phenalenone類化學成分,其中phenalenone類是主要化學成分[9-14],但本課題組在化學成分研究中未發現含量較高的成分。芭蕉根藥材已開發出腫痛舒噴霧劑、骨康膠囊等制劑[15],原藥材作為中藥制劑基礎物質,其質量決定制劑的質量,目前其質量控制研究主要集中于指紋圖譜及大類成分含量測定[16-18]。本研究中通過對芭蕉根進行性狀、顯微及薄層鑒別,測定水分、灰分及浸出物含量,以完善芭蕉根藥材的質量標準,為其開發利用提供參考。現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

50I型顯微鏡(日本尼康公司),配有DS-Fi2型顯微成像系統;WP-ΜP-Ⅱ-20型超純水機(四川沃特爾水處理設備有限公司);REPROSTAR3型薄層數碼成像系統(瑞士Camag公司);EL204型電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司,精度為萬分之一);DK-98-Ⅱ型水浴鍋(天津市泰斯特儀器有限公司);KQ-300E型超聲波清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司,頻率為40 kHz,功率為300 W);薄層層析硅膠G板[青島鼎康硅膠有限公司(廠家A),批號為20180108;青島海洋化工有限公司(廠家B),批號為20180115;煙臺江友硅膠開發有限公司(廠家C),批號為20180101]。

1.2 試藥

芭蕉根對照藥材(中國食品藥品檢定研究院,批號為121264-200502);所有試劑均為分析純;原植物及樣品均由貴陽中醫學院藥學院生藥實驗室孫慶文教授鑒定為正品,藥材信息見表1,標本存放于貴州醫科大學貴州省藥物制劑重點實驗室。

2 方法與結果

2.1 性狀鑒別

芭蕉根呈圓柱形,具有棕色鱗片,直徑10~20 cm。切片不規則,長、寬5~15 cm,厚0.5~1.5 cm,表面棕黃色,凹凸不平,可見明顯纖維束,質韌,不易折斷,斷面不整齊,纖維狀。氣香,味淡。

2.2 顯微鑒別

本品粉末呈灰褐色。淀粉粒極多,直徑6~105μm,多為單粒,復粒少見,海螺狀、腎形、類多邊形或不規則形,臍點點狀、短縫狀或人字形,層紋明顯;導管為螺紋及網紋;草酸鈣針結晶束或散在。

2.3 薄層色譜鑒別

取芭蕉根粉末1 g,加石油醚(60~90℃)30 mL,超聲處理15 min,濾過,濾液蒸干,殘渣加乙酸乙酯1 mL使溶解,作為供試品溶液。另取芭蕉根對照藥材1 g,同法制成對照藥材溶液。照2015年版《中國藥典(四部)》通則0502薄層色譜法試驗,吸取上述2種溶液各5μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯(20∶1,V/V)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,分別置日光及紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜圖中,在與對照藥材溶液色譜相應位置上,分別顯相同顏色的斑點。色譜圖見圖1。

圖1 12批芭蕉根藥材薄層色譜圖(日光與365 nm)Fig.1 TLC chromatograms of 12 batches of Radix Musae(sunlight and 365 nm)

2.4 水分、總灰分及浸出物含量測定

水分照2015年版《中國藥典(四部)》通則0832第二法烘干法測定;總灰分照2015年版《中國藥典(四部)》通則2302灰分測定法測定;浸出物照2015年版《中國藥典(四部)》通則2201浸出物測定法中熱浸法測定,溶劑為50%乙醇。結果見表2。根據測定結果,初步擬訂芭蕉根水分不得過15.0%,總灰分不得過9.0%,浸出物含量不得少于5.5%。

表2 芭蕉根水分、總灰分、浸出物含量測定結果(%,n=2)Tab.2 Results of content determination of moisture,total ash and extract content of Radix Musae(%,n=2)

圖3 不同相對濕度薄層色譜圖(日光與365 nm)Fig.3 TLC chromatograms of different relative humidities(sunlight and 365 nm)

2.5 耐用性試驗

選擇3個廠家的薄層色譜硅膠G板、不同相對濕度(30%,50%,70%)、不同溫度(10,25,35℃),以及分別放置(0,1,2,3 d)的穩定性,色譜圖見圖2至圖5。

圖2 不同廠家薄層色譜硅膠G板薄層色譜圖(日光與365 nm)Fig.2 TLC chromatograms of TLC silica gel G plate with different manufacturers(sunlight and 365 nm)

圖5 穩定性考察薄層色譜圖(日光與365 nm)Fig.5 TLC chromatograms of the stability test(sunlight and 365 nm)

3 討論

查閱文獻[9-11],在薄層色譜鑒別試驗中,分別考察供試品溶液制備的提取溶劑、提取方法、展開劑等,曾采用甲醇超聲處理芭蕉根藥材,展開劑為石油醚-丙酮(7∶4,V/V)時多數藥材斑點對應較好,但放置時間較長時藥材斑點明顯減弱。考察了不同廠家、溫度、相對濕度、放置時間,結果顯示薄層色譜法可鑒別芭蕉根藥材,方法穩定,重復性好。錢海兵等[19]研究了芭蕉根不同提取物的抗炎鎮痛作用,其80%乙醇提取物及水提取物的鎮痛活性較好,而以水或乙醇作為浸出物的提取溶劑時,發現以水作為溶劑時過濾困難,以乙醇作為溶劑時浸出物較低。因此,選用50%乙醇作為浸出物的提取溶劑有利于藥材質量的控制。

經過對芭蕉根化學成分的系統研究,未見明顯含量較高的指標性成分;采用高效液相色譜法,配有蒸發光散射檢測器、陣列二極管檢測器等對可測定成分進行檢測,也未發現明顯可測成分,難以選擇芭蕉根中的指標性成分。因此,芭蕉根藥材的含量測定有待進一步研究。

綜上所述,本研究中建立的性狀鑒別、顯微鑒別、薄層色譜法等定性檢查方法操作簡便,重復性好,可用于芭蕉根藥材的質量控制。

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