GC-MS分析核桃花中的揮發性成分

李桂香，馬 莎，崔慶德，方慧祥*

（1.曲靖醫學高等專科學校，云南曲靖 655000；2.曲靖市食品藥品檢驗檢測中心，云南曲靖 655000）

核桃花為胡桃科（Juglandaceae）胡桃屬（Juglans）植物核桃（Juglans regia L.）的花序，又稱長壽菜。我國民間有藥用、食用和飼用核桃花的傳統，經加工的核桃雄花序美味可口，是一種值得大力開發利用的森林蔬菜〔1〕。核桃花含有豐富的磷脂，能增強人體細胞活力，促進造血，有效降低膽固醇和血脂，預防動脈硬化〔2〕；有研究表明，核桃花營養豐富，蛋白質含量高達21%，是一種優質的天然營養保健食品〔3〕。臨床上核桃花酊劑可用于去除疣子〔4〕；核桃花中還含有能選擇性抑制腫瘤細胞生長的活性成分〔5〕。

核桃樹是一種經濟價值較高的樹種，在我國廣泛分布和栽培，核桃果仁因其營養豐富、風味獨特而躋身四大干果之一。目前，國內外關于核桃植物的根皮、莖枝和果實研究較多，尤其是對核桃果仁進行了多方面、深層次的研究和開發，而對花序的研究較少。核桃花作為一種資源豐富的民間傳統森林蔬菜，除少數食用外，大部分被丟棄，并未得到真正的開發和利用，造成資源嚴重浪費。核桃花具有食用和醫療價值，值得進一步研究開發和利用，可開發為新型保健食品、茶飲品、天然抗氧化劑及色素等。文獻〔6〕報道核桃花乙酸乙酯提取物具有較強的抗氧化活性，本文首次將核桃花粗粉用乙酸乙酯超聲提取，采用氣相色譜-質譜法（GC-MS）分析核桃花中的揮發性成分，以期為核桃花資源的開發和利用提供依據，推廣核桃花的食用價值和醫療用途，也為核桃花中揮發性成分的研究提供一種高效、快速的分析方法，為核桃花質量標準的制定提供科學依據。

1 儀器與材料

1.1 儀器及試劑7890B/5977B氣相色譜-質譜聯用儀（美國Agilent公司），配有電子轟擊離子源（EI）及G4513A自動進樣器，真空機械泵（德國Pfeiffer Vacuum公司）；分析天平（上海梅特勒-托利多儀器有限公司）；DFY-500D 500克搖擺式高速粉粹機（溫嶺市林大機械有限公司）；數控超聲波清洗器（天津奧特恩斯儀器有限公司）；乙酸乙酯為國產分析純。

1.2 材料核桃花采自云南省曲靖市馬龍區，經曲靖醫學高等專科學校藥學院王小慶副教授鑒定為胡桃科（Juglandaceae）胡桃屬（Juglans）植物核桃（Juglans regia L.）的花序，標本存放于曲靖醫學高等專科學校藥學院實驗室，自然陰干備用。

2 方法

2.1 色譜條件色譜柱：HP-5MS石英毛細管柱（30 m×0.25 mm，0.25μm）；載氣：氦氣（99.999%）；載氣流速：1.0 mL/min；檢測器溫度：250℃；不分流進樣；進樣口溫度：280℃；柱溫采取程序升溫：起始溫度為60℃，恒溫3 min，以5℃/min速率升至120℃，再以10℃/min速率升至280℃，恒溫15 min；進樣量：10μL。

2.2 質譜條件電離方式：電子轟擊離子源（EI）；電子能量：70 eV；傳輸線溫度：280℃；離子源溫度：230℃；四級桿溫度：150℃；質量掃描范圍：50～650 amu；數據采集掃描模式：全掃描；溶劑延遲：3 min。

2.3 樣品制備稱取核桃花粗粉約2 g，置具塞錐形瓶中，加入乙酸乙酯50.0 mL，密塞，稱定質量，超聲提取50 min，冷至室溫，再稱定質量，用乙酸乙酯補足減失的質量，過濾，再經0.22μm微孔濾膜過濾，供GC-MS測試。

3 結果

3.1 試驗結果按照“2.3”項下方法制備樣品，再按“2.1”項下色譜條件進行分析檢測，總離子流圖見圖1。采用GC-MS共檢出60多種成分，將質譜掃描圖中的各峰結果與NIST 2017質譜檢索數據庫對照分析，根據質譜碎片規律進行解析，并參考有關文獻數據加以鑒定，共鑒定出29種揮發性成分，結果見表1。

表1 乙酸乙酯超聲提取核桃花揮發性成分

圖1 核桃花揮發性成分總離子流圖（0～68 min）

3.2 結果分析根據試驗結果，核桃花中所含的揮發性成分復雜多樣，在鑒定出的29種揮發性成分中，種類最多的是萜類化合物。單萜及含氧衍生物有α-蒎烯、β-蒎烯、反式-松香芹醇等；倍半萜及含氧衍生物有δ-欖香烯、β-石竹烯、α-芹子烯、δ-杜松烯、石竹素等；鏈狀二萜有葉綠醇。

4 討論

萜類化合物是種類繁多、數量巨大、具有廣泛生物活性的一類重要的天然化學成分，萜類成分的研究是尋找和發現天然活性成分的重要來源，因此是很活躍的研究領域。在我國南方某些地區，核桃花也作為民間抗癌藥物使用〔5〕。核桃花中含有δ-欖香烯，而欖香烯和紫杉醇、長春堿、靛玉紅等被列入重要的植物源抗腫瘤藥物名單〔7〕。多年來，大量的實驗研究和臨床實踐證明，欖香烯毒副作用小，可透過血腦屏障，在抗癌的同時，還具有增強機體免疫力，與放化療協同增效、逆轉耐藥性等作用〔8-9〕。

本文采用乙酸乙酯超聲提取核桃花中的揮發性成分，與張鈺等〔10〕采用揮發油提取方法相比，提取方法簡便易行、快速省時，且分析檢測出的揮發性成分較多，除庚醛、壬醛、β-石竹烯、α-姜黃烯、油酸5種揮發性成分相同外，其余揮發性成分存在較大差異，這可能與所采用的提取方法和測定溫度有關。采用GC-MS對核桃花揮發性成分進行定性分析檢測，結合質譜檢索數據庫，鑒定出29種成分，這些成分具有廣泛的生物活性，通過對核桃花揮發性成分的定性分析，可為后續對含量豐富的成分進行定量測定提供理論基礎。本研究為核桃花中揮發性成分的定性分析提供了一種高效、快速的分析方法，也為核桃花資源的開發利用和質量控制提供科學依據。