55批金錢草中5種重金屬元素的含量測定

陳志恒，韓麗麗，祁立新，劉忠軍，王樂慶

(濰坊市檢驗檢測中心，濰坊 261100)

金錢草為報春花科植物過路黃LysimachiachristinaeHance的干燥全草，具有利濕退黃、利尿通淋、解毒消腫的功效，用于治療濕熱黃疸、膽脹脅痛、石淋、熱淋、小便澀痛等[1]。金錢草主要含有黃酮類、酚類、內(nèi)酯類、甾醇類、鞣質(zhì)、揮發(fā)油等化學成份[2]。金錢草之名最早見于明代《滇南本草》。《本草綱目拾遺》論神仙對坐草：“一名蜈蚣草……夏開小黃花，每節(jié)間有二朵,故名。”經(jīng)考證其為藥典收載品種，但不以金錢草命名。《中國藥典》1977年版一部正式收載并定名為金錢草[3]。

重金屬超標已成為影響中藥質(zhì)量，阻礙中醫(yī)藥發(fā)展的關(guān)鍵問題[4-5]。中藥重金屬的常用測定方法有紫外分光光度法、原子吸收分光光度法、原子熒光分光光度法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法(inductively coupled plasma mass spectrometry，ICP-MS)等[6]。本研究采用ICP-MS法對55批金錢草中的重金屬進行測定，以期為金錢草的質(zhì)量控制及安全性評價提供參考。

1 材料

1.1 儀器

MARS 6 CLASSIC微波消解儀(美國培安公司)；Agilent Technology 7900 ICP-MS(美國安捷倫公司)；XSE-204電子天平(瑞士梅特勒公司)；T16離心機(美國賽默飛世爾公司)；Millipore Integral 3超純水儀(法國默克公司)；HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司)；102電熱恒溫干燥箱(濰坊精鷹醫(yī)療器械有限公司)。

1.2 試藥

鉛標準溶液(批號177011-1，含量1000 μg/ml)、砷標準溶液(批號163080-3，含量1000 μg/ml)、鎘標準溶液(批號165017-1，含量1000 μg/ml)、汞標準溶液(批號16C043-1，含量1000 μg/ml)、銅標準溶液(批號16C060-1，含量1000 μg/ml)、金標準溶液(批號171042-2，含量1000 μg/ml)均購自國家有色金屬及電子材料分析測試中心；內(nèi)標(鍺、銦、鉍混合)標準溶液(批號5190-8593-1，含量100 μg/ml)購自安捷倫科技有限公司。實驗用水為超純水，甲醇(德國默克公司)、硝酸(德國默克公司)為色譜純，其他試劑均為分析純。

實驗用55批金錢草樣品來自于47個單位，涵蓋9個省、市、自治區(qū)，主要包括飲片生產(chǎn)單位、零售單位、批發(fā)單位和醫(yī)療機構(gòu)。經(jīng)副主任藥師石炳娟鑒定，所收集樣品均為報春花科植物過路黃LysimachiachristinaeHance的干燥全草。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液制備

2.1.1標準品貯備溶液的制備

分別精密量取鉛、砷、鎘、汞、銅單元素標準溶液適量，用10%硝酸溶液稀釋制成每1 ml含鉛、砷、鎘、汞、銅分別為1、0.5、1、1、10 μg的溶液，即得。

2.1.2標準品溶液的制備

精密量取鉛、砷、鎘、銅標準品貯備溶液適量，用10%硝酸溶液稀釋制成每1 ml含鉛0、1、5、10、20 ng，含砷0、1、5、10、20 ng，含鎘0、0.5、2.5、5、10 ng，含銅0、50、100、200、500 ng的系列濃度混合溶液。另精密量取汞標準品貯備溶液適量，用10%硝酸溶液稀釋制成每1 ml含汞0、0.2、0.5、1、2、5 ng的溶液，本液應臨用配制。

2.1.3內(nèi)標溶液的制備

精密量取內(nèi)標(鍺、銦、鉍混合)標準溶液，用水稀釋制成每1 ml含鍺、銦、鉍各1 μg的混合溶液，即得。

2.1.4供試品溶液的制備

取本品粉末于60 ℃干燥2 h。取約0.25 g，精密稱定，置微波消解罐中，加硝酸10 ml，過氧化氫 3 ml，密閉、消解。按表1消解程序，消解2次。消解液冷卻至60 ℃以下時取出消解罐，放冷，將消解液轉(zhuǎn)移至50 ml量瓶中，用少量水洗滌3次，洗液合并于量瓶中，加入金單元素標準溶液(1 μg/ml)200 μl，用水稀釋至刻度，搖勻，過濾，即得。

表1 消解程序

除不加金單元素標準溶液外，余同法制備試劑空白溶液。

2.2 測定方法

測定時選取的同位素為63Cu、75As、114Cd、202Hg和208Pb，其中63Cu、75As測定時以72Ge作為內(nèi)標，114Cd 以115In作為內(nèi)標，202Hg、208Pb以209Bi作為內(nèi)標，取3次讀數(shù)的平均值作為測量值。ICP-MS工作參數(shù)見表2。

表2 ICP-MS工作參數(shù)

2.3 線性關(guān)系及檢測限

將“2.1.2”項下系列標準品溶液分別進樣分析，以濃度(X)為橫坐標，測量值(Y)為縱坐標，繪制標準曲線，并計算檢測限。線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、范圍及檢測限見表3。

表3 5種元素線性關(guān)系及檢測限

2.4 精密度試驗

精密量取各元素標準品溶液，分別連續(xù)進樣5次，測定各元素含量。結(jié)果表明，63Cu、75As、114Cd、202Hg、208Pb的RSD值分別為0.6%、2.9%、2.6%、4.9%、2.7%，表明儀器精密度良好。

2.5 重復性試驗

取金錢草樣品0.25 g，共6份，精密稱定。平行制備6份供試品溶液，測定各元素含量。各元素的RSD值范圍為0.3%～5.3%，表明該方法重復性良好。

2.6 加樣回收率試驗

取已知含量的樣品(上述重復性試驗用樣品)共6份，每份0.25 g，精密稱定。根據(jù)重復性試驗所測得的各元素含量，等量加入對照品。按“2.1.4”項下方法制備供試品溶液，并測定各元素的含量。結(jié)果表明，各元素的平均回收率范圍為87.2%～110.1%，RSD值范圍為2.1%～4.6%，表明該方法準確可靠，能用于樣品中各元素的分析測定。

2.7 含量測定

對55批金錢草樣品中各元素進行含量測定。測定結(jié)果見表4。

表4 55批金錢草樣品的重金屬含量測定結(jié)果 n=3，mg/kg

3 討論

重金屬及有害元素在人體內(nèi)會與蛋白質(zhì)、酶等發(fā)生強烈的相互作用，使蛋白質(zhì)或酶失去活性，也能在人體某些器官中蓄積導致慢性中毒，引起免疫系統(tǒng)障礙和多種功能損害[7-8]。迄今為止，大部分中藥材尚未制定重金屬的含量限量標準[9]。本研究參照《中國藥典》2020年版一部中部分植物藥的重金屬限量指標，采用ICP-MS法測定了55批金錢草中5種重金屬元素的含量。該方法準確、快速、簡便、靈敏度高，可作為金錢草重金屬及有害元素的檢測方法。

《中國藥典》2015年版一部中甘草、金銀花、枸杞子等植物藥的重金屬限值為：鉛不得過5 mg/kg、鎘不得過0.3 mg/kg、砷不得過2 mg/kg、汞不得過0.2 mg/kg、銅不得過20 mg/kg。參考此限值，本研究中有18批次樣品鎘超標。《中國藥典》2020年版一部對鎘的限值適當放寬，從0.3 mg/kg修改為1 mg/kg，則有2批次樣品鎘超標，7批次樣品中銅超標，1批次樣品中砷超標，1批次樣品中汞超標，鉛均不超標。該結(jié)果表明，金錢草存在鎘、銅、汞、砷超標問題，且不同批次金錢草的有害元素含量差異較大。這可能與其生長環(huán)境有關(guān)，如土壤、大氣、水、化肥、農(nóng)藥的施用以及工業(yè)“三廢”等[10]。相關(guān)部門應加強監(jiān)管，并采取相應措施加以控制。