腰斑寶螺胚胎發育初步研究

游德平，姜芳燕，韓冰冰，陳攀，馬軍，楊寧

(1.海南熱帶海洋學院，熱帶海洋生物資源利用與保護教育部重點實驗室，海南省熱帶海洋漁業資源保護與利用重點實驗室，海南 三亞572022；2.海南大學三亞南繁研究院,海南 三亞572000)

腰斑寶螺也稱眼球貝，屬于軟體動物門、腹足綱、中腹足目、寶螺科、寶螺屬，主要分布于亞熱帶和熱帶的潮間帶、珊瑚礁或泥沙海底。本次研究主要為從產卵到卵囊破裂結束過程中的胚胎發育變化以及規律。

一、材料與方法

1.材料

腰斑寶螺采集時間為2021年5月30日，地點在海南三亞市小東海區域(109.498864°E、18.211454°N)，采集到的3只腰斑寶螺中有1只產卵，其殼長3.21厘米、殼寬1.99厘米、個體重8.1克(產卵后)，見圖1。腰斑寶螺從海區采集回來后，放在總體積110升的海水水族缸中暫養，并用體積0.8升的隔離盒與其他養殖生物隔開。隔離盒和串聯的水族缸的水流交換速度約170升/時，缸體上方照明時長約8時/天。

圖1 腰斑寶螺腹面(左)和側面(右)

2.觀察和記錄方法

每天早、中、晚(早上8點、中午12點、晚上8點)3次觀察記錄腰斑寶螺的活動狀態，使用小型顯微鏡(型號：STV-120M WSA)進行觀察，同時肉眼直接近距離觀察表面活動特點。

在觀察的同時讀取缸內兩支溫度計數值并取平均值，每天記錄3次。

二、結果

1.卵數統計

腰斑寶螺于6月1日，即采集后的第3天開始產卵，產卵持續時間約16小時，產卵時以最初產的幾十個卵囊為中心，逐漸向四周擴散呈輻射狀排列，最終近似圓形，共產出193個卵囊，每個卵囊內約有200個胚胎(圖2)。受精的胚胎為乳白色，未受精的幾乎透明。胚胎發育到后期，發現有4個卵囊逐漸渾濁，變為云霧狀、半透明、白色，沒有任何生命現象，使用紫外線燈照射發現有熒光反射(圖3)，而其他的正常發育的胚胎所在卵囊沒有熒光反射。

圖2 產卵初期(左)和后期(右)

圖3 壞死的卵囊

2.胚胎發育情況

6月1日開始產卵，計為第1天。卵囊飽滿，內部卵粒分布均勻，24小時后開始有生命活動跡象。此時親螺已停止繼續產卵，用腹足覆蓋、趴在卵囊塊上進行護卵，卵囊周邊的雜物會被親螺清理干凈。

隨著時間的推移，卵囊內的胚胎不斷發育，外觀上的顆粒感越來越明顯。

第5天，胚胎發育至擔輪幼蟲期，在卵囊內部無規則游動，游泳速度較慢。個體外表有一層透明膜包裹，兩邊、中間部位有凸起。胚胎個體全身無明顯的組織結構，見圖4。

第8天，觀察有2個黑色的點在胚胎的一端，根據相關資料推斷這是頭端正在發育中的眼，同時觀察到胚殼結構的出現，但還沒有出現明顯的螺塔，游泳速度非?？?，見圖4。最后發現卵囊中心位置胚胎的游泳速度較卵囊邊緣胚胎的游泳速度慢一些，而胚胎密度大小相反。

圖4 胚胎發育第5天(左)和第8天(右)

第9天，胚胎色素積累明顯、背部顏色加深，胚殼輪廓更明顯(圖5)，用于游泳的頭部二片翼足活動明顯。

第12天，整體卵囊顏色轉深，胚胎背部色素加深，胚殼仍為白色、有變大的現象。幼體擁擠在一起，卵囊隨時可能破裂，見圖5。

圖5 胚胎發育第9天(左)和第12天(右)

第14天，部分卵囊破裂；第15天，親螺開始離開卵囊塊。幼螺開始進入浮游生活階段。

三、總結

由于實驗樣本數量有限，本次實驗只是對腰斑寶螺胚胎的外部形態做了初步研究，未對卵裂期、囊胚期、原腸期、擔輪幼蟲期、仔螺等具體時期做細致的研究。本實驗中的溫度對腰斑寶螺卵囊內胚胎發育也起到重要作用，孵化期間每天的水溫為23～25℃，最適孵化溫度還有待進一步探索。

在本實驗中后期，水中的原生動物對卵囊會造成一定的干擾，它們附著于卵囊表面，有的會鉆進卵囊吞噬胚胎幼體。另外，胚胎脫離卵囊之后的浮游生活階段，開口餌料直接影響孵化率。有關寶螺科貝類胚胎的研究較少，蒲利云等(2014)曾對虎斑寶貝(Cypraea tigris)成功開展了野生馴化和不同生物餌料馴化實驗，對本實驗具有重要借鑒和指導作用。