四倍體長牡蠣的生產方法與生物學特性

于瑞海，李海昆，李春華，鄒多

(中國海洋大學水產學院，山東 青島266003)

由于三倍體牡蠣具有育性差、生長快、死亡率低的優點，三倍體牡蠣的養殖面積逐年增加，成為北方牡蠣養殖的熱點之一。目前養殖的三倍體牡蠣主要是采用二倍體牡蠣卵子與四倍體牡蠣精子雜交產生的。當前限制三倍體牡蠣苗種生產的瓶頸主要是四倍體牡蠣的供應。四倍體牡蠣是一個特殊群體，跟普通的二倍體牡蠣不同，自然界沒有野生存活的四倍體存在，都是由三倍體長牡蠣人工誘導而來的。

四倍體牡蠣是指細胞中含有四套染色體組的牡蠣，即4n；正常二倍體是含有2套染色體組，即2n。目前牡蠣的多倍體育種主要是三倍體和四倍體育種，生產上廣泛應用的是三倍體牡蠣和四倍體牡蠣。國內外對三倍體牡蠣研究較多，現主要就四倍體長牡蠣的生物學特性和未來的發展方向進行介紹和探討。

一、四倍體長牡蠣的生產方法

四倍體長牡蠣是由三倍體長牡蠣成熟的卵子與二倍體長牡蠣精子雜交，通過多種理化方法抑制雜交受精卵極體排放產生的。郭希明等(1994)首先報道了一種貝類四倍體生產技術，王昭萍等(2003)首次培育出存活四倍體長牡蠣，而誘導四倍體牡蠣的藥物主要是細胞松弛素B(簡稱CB)和6-二甲基氨基嘌呤(簡稱6-DMAP)。

成熟的三倍體牡蠣產卵量較少，成熟度較差。三倍體牡蠣產生的卵子與二倍體精子雜交，利用藥物處理抑制雜交受精卵的極體排放后會產生大量不同倍性的個體，而其中的非整倍體幼蟲大部分是不能存活下來的，所以誘導組幼蟲的存活率通常較低。處理時機掌握、處理時間以及藥物誘導毒性作用對誘導四倍體牡蠣的孵化率、幼蟲成活率都有一定影響，也會影響四倍體誘導率，因此，最后能夠存活下來的幼蟲較少。這也是目前四倍體長牡蠣群體緊缺的主要因素之一。

二、四倍體長牡蠣養殖生物學特性

與二倍體長牡蠣比較，四倍體長牡蠣主要表現如下特征。

1.可以自繁培育下一代，也可在自然或人工促熟條件下產卵、排精，再采用人工授精法繁殖后代。四倍體卵徑為63.68微米，明顯大于二倍體(平均卵徑49.35微米)。精子大小上4n精子比2n精子大30%左右。四倍體長牡蠣D形幼蟲大小為89微米，明顯大于二倍體長牡蠣。

2.與二倍體組生長比較，四倍體自繁組幼蟲具有一定生長優勢，比二倍體組早5～6天出現眼點。但在稚貝、幼貝及成貝階段沒有生長優勢，處于生長劣勢，同月齡比二倍體組個體小，差異顯著。

3.四倍體長牡蠣精子可與二倍體長牡蠣卵子受精雜交生產100%的三倍體長牡蠣，為三倍體長牡蠣規模化生產提供保證，這是四倍體長牡蠣最大的價值之一。

4.四倍體長牡蠣自繁后代會出現染色體丟失的問題，因此，后代倍性極不穩定，隨著生長時間的延長，染色體不斷缺失，大部分衰退變成三倍體、二倍體及非整倍體，只有小部分四倍體存在，這是其最大缺點之一。

因此，四倍體長牡蠣需要不斷進行誘導培育，由于誘導難度較大，造成四倍體長牡蠣不能滿足生產需求，而沒有足量的四倍體長牡蠣直接導致三倍體長牡蠣苗種供應緊張。

三、四倍體長牡蠣發展趨勢

根據四倍體長牡蠣生長性狀和發展特點，可進行如下工作，以保證四倍體長牡蠣種群穩定發展，從而保證三倍體長牡蠣產業健康可持續發展。

1.完善四倍體長牡蠣誘導技術工藝，包括三倍體親貝促熟培養、誘導時機、誘導時間、藥物濃度和誘導幼蟲的培育等。四倍體長牡蠣誘導組幼蟲培育技術要進行優化和完善，提高四倍體長牡蠣的誘導率以及四倍體長牡蠣幼蟲成活率，從而保證能培育出一定量的四倍體群體。

2.研究培育染色體穩定四倍體群體技術，培育性狀穩定的四倍體家系，通過四倍體長牡蠣群體選育和家系選育，經過多年連續篩選，獲得四倍體倍性相對穩定家系，以減少四倍體長牡蠣誘導過程。

3.加強四倍體倍性檢測力度，保證四倍體長牡蠣真實性。四倍體長牡蠣的生產應用和實驗前都要進行倍性檢測，保證使用的四倍體長牡蠣都是真正的四倍體。對于養殖的四倍體群體也要定期進行倍性檢測，以便及時掌握四倍體長牡蠣群體的倍性變化情況，比較準確了解四倍體長牡蠣具體數量。

4.要完善利用四倍體長牡蠣生產全三倍體牡蠣生產工藝。三倍體長牡蠣育苗生產時，首先要保證使用的四倍體長牡蠣為真正的四倍體；其次是要有嚴格的二倍體解剖技術及雌雄挑選技術，確保挑出百分百的雌貝，之后取卵、浸泡促熟，鏡檢有無二倍體精子污染，發現污染立即舍棄，重新解剖取卵。人工授精時，把握好四倍體精子和二倍體卵子的配比，在最大限度利用四倍體精子的同時盡可能提高受精率。孵化過程中要降低孵化密度，最大限度提高孵化率。三倍體幼蟲培育期間也要嚴格管理和操作，定期進行倍性檢測，以保證三倍體長牡蠣苗培育成功，為養殖戶提供優質三倍體苗種。