實時熒光定量PCR 檢測妊娠晚期孕婦B 族鏈球菌感染的臨床價值分析

馬倩

B 族鏈球菌是孕晚期孕婦生殖系統感染常見病原微生物類型,常規情況下此類微生物主要存在于人體下消化道及泌尿生殖系統內,感染發生率較低,但在妊娠期間受女性自身激素分泌水平影響時,可在局部微生態環境變化后導致感染的發生。此類感染多發生于孕晚期階段,可導致早產、胎膜早破、宮內感染等不良妊娠結局的發生,且可由垂直傳播導致新生兒感染性疾病的發生,威脅新生兒生命安全［1］。現階段對孕晚期孕婦B 族鏈球菌感染的篩查主要采取微生物培養檢查方式,但此類檢驗技術用時較長,且極易受檢驗操作影響,導致檢驗結果誤差,需在現有檢驗技術基礎上合理選擇新型檢驗技術,提升臨床檢驗效果［2,3］。因此,為分析實時熒光定量PCR 檢測妊娠晚期孕婦B 族鏈球菌感染的臨床價值,特進行本次研究,詳情報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年7 月～2021 年4 月本院3721例接受B 族鏈球菌感染檢測的孕晚期孕婦作為研究對象,年齡19～40 歲,平均年齡(29.54±3.95)歲；孕周34～39 周,平均孕周(36.54±1.71)周；其中初產婦2548例,經產婦1173例。納入標準：①單胎妊娠者；②經明確研究細節后自愿加入研究者。排除標準：①已明確不良妊娠類型者；②明確妊娠期并發癥者。

1.2 方法 經采集孕婦陰道分泌物及直腸分泌物后均接受常規細菌培養檢驗及實時熒光定量PCR 檢測。

1.2.1 樣本采集 ①陰道分泌物：將無菌拭子置入陰道下段1/3 處,旋轉1 周后采集陰道分泌物,共采集兩份樣本,樣本采集后分別放置于不同無菌套管內密封保存。②直腸分泌物：經無菌拭子置入肛門括約肌上方2～3 cm 處,旋轉1 周后采集直腸分泌物,共采集2 份樣本,樣本采集后分別放置于不同無菌套管內密封保存。

1.2.2 細菌培養檢測 取陰道分泌物、直腸分泌物樣本各1 份,接種于血瓊脂平皿后,在35℃、5%～10%二氧化碳(CO2)環境中培養24～48 h 后,選取含B 族鏈球菌菌落瓊脂行CAMP 試驗,后進行微生物鑒定檢查。

1.2.3 實時熒光PCR 檢測 將無菌套管中陰道分泌物、直腸分泌物樣本進行嚴格實驗室處理后,采集部分樣本放入PCR 管內,取PCR 擴增試劑盒及全自動生化分析儀器實施擴增處理后檢驗。

1.3 觀察指標 對比細菌培養與實時熒光定量PCR檢測結果；對比不同年齡段(≤20 歲、21～30 歲、31～34 歲、≥35 歲)孕婦B 族鏈球菌陽性檢出率；對比B 族鏈球菌陰性、陽性孕婦妊娠結局(早產、胎膜早破、宮內感染、胎兒窘迫及新生兒感染)。

1.4 統計學方法 采用SPSS22.0 統計學軟件進行數據統計分析。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 細菌培養與實時熒光定量PCR 檢測結果對比實時熒光定量PCR 檢測陰道分泌物、直腸分泌物陽性檢出率分別為9.00%、9.16%,均高于細菌培養檢測的7.28%、7.77%,差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 細菌培養與實時熒光定量PCR 檢測結果對比［n(%),n=3721］

2.2 不同年齡段孕婦B 族鏈球菌陽性檢出率對比≤20 歲孕婦B 族鏈球菌陽性檢出率為5.58%,21～30 歲孕婦B 族鏈球菌陽性檢出率為7.19%,31～34 歲孕婦B 族鏈球菌陽性檢出率為10.02%,≥35 歲孕婦B 族鏈球菌陽性檢出率為12.16%；B 族鏈球菌感染發生率隨孕婦年齡增加上升,不同年齡段孕婦B 族鏈球菌陽性檢出率對比差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 不同年齡段孕婦B 族鏈球菌陽性檢出率對比(%)

2.3 B 族鏈球菌陰性、陽性孕婦妊娠結局對比 依據孕婦治療意愿予以B 族鏈球菌感染孕婦治療,B 族鏈球菌陽性孕婦早產、胎膜早破、宮內感染、胎兒窘迫及新生兒感染發生率均高于B 族鏈球菌陰性孕婦,差異有統計學意義(P＜0.05)。見表3。

表3 B 族鏈球菌陰性、陽性孕婦妊娠結局對比［n(%)］

3 討論

正常情況下女性生殖系統及直腸環境內微生態系統及環境均處于平衡狀態,單一菌種感染性疾病發生率較低,但在妊娠期間受女性自身雌激素及孕激素分泌水平變化影響,陰道內微生態環境可在局部免疫功能下降后出現失衡情況,從而誘發感染性疾病。B 族鏈球菌作為生殖系統內常見微生物類型,是妊娠晚期生殖系統感染主要病原微生物類型,且可在生殖系統感染進展后發生直腸內感染,臨床發病率受孕婦年齡影響［4］。

流行病學研究［5,6］指出,相較非孕期患者,妊娠期孕婦B 族鏈球菌發病后所致臨床風險性更為明顯,發病期間或可由B 族鏈球菌感染上行導致子宮、胎膜感染的發生,增加妊娠晚期流產、胎膜早破、早產等不良妊娠結局的發生,且在分娩期間或可由垂直感染導致新生兒感染的發生,誘發臨床感染性疾病,威脅新生兒健康安全。故在孕期檢查中針對孕晚期孕婦積極開展B 族鏈球菌感染檢測對控制B 族鏈球菌感染所致不良妊娠結局風險具有積極意義。

本次研究結果顯示,實時熒光定量PCR 檢測陰道分泌物、直腸分泌物陽性檢出率均高于細菌培養檢測,差異具有統計學意義(P＜0.05)。實時熒光定量PCR 檢測B 族鏈球菌感染發生率隨孕婦年齡增加上升。B 族鏈球菌陽性孕婦早產、胎膜早破、宮內感染、胎兒窘迫及新生兒感染發生率均高于B 族鏈球菌陰性孕婦,差異有統計學意義(P＜0.05)。現階段,孕期檢驗中對于B 族鏈球菌感染的檢測主要采取細菌培養方式實施檢驗,即在采集受檢孕婦陰道分泌物及直腸分泌物樣本,經特定環境條件內血瓊脂培養后對所得菌群進行針對性研究,分析受檢者B 族鏈球菌感染情況,但在此類檢驗實施中樣本采集、培養等實驗室操作的開展均存在質量影響因素,導致檢驗結果發生誤差,影響實際檢驗效果,應用局限性明顯［7-9］。在實時熒光定量PCR 檢測中,受檢驗技術特性影響,整體檢驗操作可在4 h 內完成,快速完成檢驗,且對于已死亡B 族鏈球菌同樣具有顯著檢驗效果,且檢驗操作自動化程度高,使得人工檢驗操作所致檢驗結果差異性風險明顯下降,檢驗結果真實性確切。且在本次研究中發現,部分B 族鏈球菌感染孕婦或僅存在陰道分泌物或直腸分泌物單一檢驗結果陽性情況,故對兩類樣本進行同時檢驗或可積極發揮妊娠晚期B 族鏈球菌感染篩查效果［10-13］。

綜上所述,實時熒光定量PCR 檢測妊娠晚期孕婦B 族鏈球菌感染具有顯著應用價值,需在年齡較大孕婦中加強檢測力度,且需在確認檢驗結果后及時予以干預,降低不良妊娠結局風險,保障母嬰安全。