氟尼辛葡甲胺注射液的制備及性狀初步研究

郭金梅，朱術(shù)會(huì)，李申華，郭華亮，王成森

（1.濰坊市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，山東 濰坊 261061；2.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院，山東 濰坊 261061；3.山東金瑞生物科技有限公司，山東 濰坊 261061）

氟尼辛葡甲胺（Flunixin meglumine）是一種非甾體動(dòng)物用解熱鎮(zhèn)痛藥[1]，屬于環(huán)氧化酶抑制劑[2]。該藥物具有較強(qiáng)的解熱、鎮(zhèn)痛和消炎作用，獸醫(yī)臨床上單獨(dú)或與抗生素聯(lián)合使用來治療馬、牛及豬的內(nèi)臟絞痛、肌肉及骨骼的疼痛、發(fā)熱和炎癥[3-4]；還可以用于動(dòng)物因感染引起的急性炎癥的治療[5-6]，如關(guān)節(jié)炎、母豬乳房炎、子宮炎及無乳綜合征[7]。

氟尼辛葡甲胺可口服、靜脈注射及肌肉注射[8]，其注射液在大型家畜疾病治療中應(yīng)用較廣，臨床需求量大，本試驗(yàn)在氟尼辛葡甲胺注射劑制備中使用具有助溶和促進(jìn)藥物吸收作用的輔料聚維酮K-30、聚乙二醇-6000和甘油，以期制備的氟尼辛葡甲胺注射液性質(zhì)穩(wěn)定，在獸醫(yī)臨床治療中有較好的作用。

1 材 料

1.1 主要試劑

試驗(yàn)用氟尼辛葡甲胺原料及氟尼辛葡甲胺標(biāo)準(zhǔn)品，由山東金瑞生物科技有限公司贈(zèng)送；聚維酮K-30（批號(hào)為20171220）、聚乙二醇-6000（批號(hào)為20180112）、甘油（批號(hào)為20170625）、液相色譜級(jí)甲醇（批號(hào)為20180114）、亞硫酸氫鈉（批號(hào)為20171106）、EDTA-2Na（批號(hào)為20171009），均購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 主要儀器

高效液相色譜儀（型號(hào)為L(zhǎng)C-10A），購(gòu)自島津（中國(guó)）有限公司；電子天平（型號(hào)為JH4101），購(gòu)自上海精科天美貿(mào)易有限公司；澄明度測(cè)定儀（型號(hào)為YB-2），購(gòu)自天津盛達(dá)三合光學(xué)儀器有限公司；數(shù)顯恒溫磁力攪拌器（型號(hào)為MYP11-2），購(gòu)自上海梅穎儀器有限公司。

2 方 法

2.1 制劑制備及性狀考察

稱取處方量的氟尼辛葡甲胺原料置于一定量的注射用水中，不斷攪拌，60 ℃水浴加熱20 min，待氟尼辛葡甲胺充分溶解后，分別加入處方量的聚乙二醇-6000、聚維酮K-30、甘油、亞硫酸氫鈉和EDTA-2Na，充分?jǐn)嚢璨?0 ℃水浴加熱至完全溶解，調(diào)pH 值為7.8～8.0，用注射用水定容，0.45 μm濾膜過濾，灌封，滅菌。

取3批次氟尼辛葡甲胺注射液樣品進(jìn)行性狀考察，參考2020 年版《中國(guó)獸藥藥典》二部附錄溶液顏色和溶液澄清度檢測(cè)方法，對(duì)氟尼辛葡甲胺注射液進(jìn)行外觀、顏色、澄明度和pH值檢查。

2.2 含量測(cè)定

參考文獻(xiàn)，采用高效液相色譜（HPLC）外標(biāo)法測(cè)定[9]，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-水-冰醋酸（60∶39∶1）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm，流速1 mL·min-1，進(jìn)樣20 μL。

2.3 穩(wěn)定性考察

2.3.1 強(qiáng)光照射試驗(yàn)

取3 批次氟尼辛葡甲胺注射液樣品，置于（4 500±500）lx 光照強(qiáng)度下放置20 d，分別于第0、5、10、15 天和第20 天取一定量樣品進(jìn)行含量測(cè)定，分別考察氟尼辛葡甲胺注射液的性狀、澄明度和pH值。

2.3.2 高溫試驗(yàn)

取3批次氟尼辛葡甲胺注射液樣品置于60 ℃條件下放置15 d，分別于第0、5、10 天和第15 天時(shí)取樣測(cè)定氟尼辛葡甲胺的含量，并分別考察其性狀、澄明度和pH值。

2.3.3 長(zhǎng)期試驗(yàn)

取3 批次氟尼辛葡甲胺注射液樣品室溫放置0、30、60、120、180 d 后分別取樣進(jìn)行含量測(cè)定，并分別考察其性狀、澄明度和pH值。

2.4 臨床解熱作用試驗(yàn)

取濰坊市某養(yǎng)豬場(chǎng)自然感染并發(fā)熱、體溫在40 ℃以上、體重60 kg左右育肥豬20頭，隨機(jī)分為A、B組。其中A組按2.0 mg·kg-1（以氟尼辛葡甲胺計(jì)）肌肉注射氟尼辛葡甲胺注射液，B 組為空白對(duì)照組，不給予藥物治療。藥物注射后分別于3、6、9、12 小時(shí)測(cè)定直腸溫度，記錄數(shù)據(jù)并進(jìn)行分析。健康豬體溫38～39.5 ℃。

3 結(jié)果與分析

3.1 氟尼辛葡甲胺注射液性狀考察

本試驗(yàn)制備的氟尼辛葡甲胺注射液為淡黃色澄清透明液體，無纖維、顆粒色塊等可見異物，pH值為7.8～9.0，性狀符合2020版《中國(guó)獸藥典》注射液性狀要求，合格率100%，3批次性狀考察結(jié)果見表1。

表1 氟尼辛葡甲胺注射液性狀考察

3.2 氟尼辛葡甲胺注射液含量測(cè)定

目前市場(chǎng)銷售的氟尼辛葡甲胺注射劑規(guī)格多為10 mL，0.5 g；含量為5%，本試驗(yàn)制備的氟尼辛葡甲胺注射劑規(guī)格為50 mL，5.0 g；含量為10%，試驗(yàn)采用高效液相色譜法對(duì)3個(gè)批次的制劑含量進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果見表2，藥物含量在為（99.54±1.17）～（102.24±0.96）mg·mL-1，含量在標(biāo)示量的95%～105%的區(qū)間，符合注射劑含量一般要求。

表2 氟尼辛葡甲胺注射液樣品含量測(cè)定結(jié)果 mg·mL-1

3.3 氟尼辛葡甲胺注射液穩(wěn)定性考察

3.3.1 強(qiáng)光照射試驗(yàn)

氟尼辛葡甲胺注射液在（4 500±500）lx 光照強(qiáng)度下10 d，外觀性狀、澄明度、pH 值和含量均無明顯變化，但到第15 天后，氟尼辛葡甲胺制劑的顏色加深，結(jié)果見表3。表明該制劑在強(qiáng)光照下會(huì)發(fā)生顏色變化，因此該制劑存儲(chǔ)及運(yùn)輸過程中應(yīng)盡量避免強(qiáng)光照射。

表3 氟尼辛葡甲胺注射液強(qiáng)光照射試驗(yàn)結(jié)果

3.3.2 氟尼辛葡甲胺注射液高溫試驗(yàn)

3個(gè)批次的樣品在60 ℃條件下放置10 d，外觀性狀、澄明度、pH值和含量均無明顯變化，到15 d后氟尼辛葡甲胺注射液顏色變深，相對(duì)含量下降，結(jié)果見表4。表明該制劑在長(zhǎng)期高溫下放置發(fā)生分解。

表4 氟尼辛葡甲胺注射液高溫試驗(yàn)結(jié)果

3.3.3 氟尼辛葡甲胺注射液長(zhǎng)期試驗(yàn)

氟尼辛葡甲胺注射液在室溫放置180 d，3 個(gè)批次的氟尼辛葡甲胺注射液的含量變化不明顯，制劑外觀、澄明度及pH 值均符合規(guī)定，在長(zhǎng)期試驗(yàn)中未觀察到結(jié)晶現(xiàn)象，結(jié)果見表5。說明該制劑在室溫下長(zhǎng)時(shí)間放置性質(zhì)穩(wěn)定。

表5 氟尼辛葡甲胺注射液長(zhǎng)期試驗(yàn)結(jié)果

3.4 臨床解熱作用試驗(yàn)

健康豬體溫為38～39.5 ℃，試驗(yàn)A 組豬肌肉注射試驗(yàn)制備的氟尼辛葡甲胺注射液3 h 后，有4頭豬的體溫為38～39.5 ℃，注射藥物6 h后有9頭豬體溫為38～39.5 ℃，12 h 后10 頭豬體溫全部為38～39.5 ℃，全部試驗(yàn)豬體溫恢復(fù)正常，見表6。B 組為對(duì)照組，9 頭豬未經(jīng)藥物治療，12 h后體溫超過39.5 ℃。從試驗(yàn)結(jié)果來看，發(fā)熱豬經(jīng)肌肉注射氟尼辛葡甲胺注射液12 h 后，體溫能夠恢復(fù)正常，這說明本研究制備的氟尼辛葡甲胺注射液對(duì)豬的發(fā)熱癥狀具有解熱作用。

表6 氟尼辛葡甲胺注射液臨床解熱作用試驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)論

本研究制備的氟尼辛葡甲胺注射液為淡黃色均一透明液體，pH值7.8～9.0；性狀和含量符合注射劑的一般要求；該制劑室溫放置性質(zhì)穩(wěn)定，在強(qiáng)光照下顏色發(fā)生變化，高溫60 ℃條件下放置15 d 后相對(duì)含量下降，臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示對(duì)豬發(fā)熱癥狀具有解熱作用。