重度脂血干擾干、濕化學方法檢測部分生化指標的分析

張漢運 李有強 鄧雨潔 王晶晶 甘釗杏 曾繁興 陳錫泉

1.廣州市番禺區何賢紀念醫院醫學檢驗科，廣東廣州 511400；2.湖南省郴州市永興縣心家精神病醫院檢驗科，湖南永興 423000

近年來檢驗結果的準確性為臨床實踐做出了重大貢獻，分析前質量控制是整個檢驗質量控制中非常必要且不能忽視的重要環節，是保證檢驗結果準確性的前提[1-3]。分析前錯誤占臨床檢驗錯誤類型的一半以上，而分析樣品的質量對分析前質量控制非常重要[4]，因此，血清的溶血、高膽紅素血癥和脂血會極大地影響許多結果的準確性[5]。血脂最常見的原因是空腹時間短；其他常見原因包括飲食、糖尿病、急性胰腺炎、腎衰竭、酒精中毒、甲狀腺功能減退和某些藥物[6-7]。在臨床檢驗工作中容易發現脂血標本，可能對不同生化參數的分析結果造成不同程度的干擾[8]，Soleimani等[9]報道高速離心是有效消除脂血對檢測結果干擾的方法之一。因此，本研究觀察高速離心前后脂血標本在干、濕化學兩種儀器中14項生化指標檢測結果的差異，分析干、濕化學方法對重度脂血的抗干擾能力。

1 資料與方法

1.1 樣本收集

收集41例臨床脂血標本，標本管為黃色真空采血管（含分離膠），血清標本外觀為奶白色，不透光。

1.2 主要儀器與試劑

1.2.1 主要儀器 H7600全自動生化分析儀（日本日立Hitachi公司）；V5600干化學分析儀（德國強生公司）；TDZ5-WS低速離心機（湖南邁克爾實驗儀器有限公司）；SORVALL ST40高速離心機（美國賽默飛公司）。

1.2.2 試劑 H7600生化分析儀所用試劑天門冬氨酸氨基轉移酶（aspartate aminotransferase，AST）（上海三維生物）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）和肌酸激酶同工酶 MB（creatine kinase isoenzyme MB，CK-MB）（上海執誠生物）、淀粉酶（amylase，AMY）和尿素（Urea）（上海科華生物）、乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）和膽堿酯酶（cholinesterase，CHE）（浙江東甌生物）、肌酐（creatinine，Cr）和 HCO3-（浙江伊利康生物）、葡萄糖（glucose，Glu）（浙江美康生物）、Ca2+（北京利德曼生化），其余均為儀器配套試劑；干化學試劑均為儀器配套試劑。質控品和校準品購自美國朗道。

1.3 觀察指標及檢測方法

1.3.1 觀察指標 AST、CK、CK-MB、AMY、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、Ca2+、K+、Na+和 Cl-共 14 項指標。

1.3.2 質量控制 上樣前檢測質控，當質控在控后開始樣本檢測。

1.3.3 檢測方法 將41例樣本經3000 r/min（離心半徑11 cm）離心3 min后，分別在H7600和 V5600上檢測以上14項指標；再將標本經15 000 r/min（離心半徑7 cm）離心8 min后，吸取下層透亮血清，分別在H7600和V5600上再次檢測以上指標。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料用率表示，兩組間比較采用χ2檢驗；采用GraphPad Prism 5.0制作圖表，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

結果如圖1所示，H7600全自動生化分析儀檢測的41例脂血標本中，經高速離心后，3項指標（AMY、CK和Ca2+）的檢測結果比較，差異無統計學意義（t=0.9153，P=0.3655；t=1.822，P=0.0760；t=0.6470，P=0.5213），而其他 11 項指標（AST、CK-MB、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、K+、Na+和 Cl-）的檢測結果比較，差異有統計學意義（t=2.110，P=0.0412；t=3.632，P=0.0008；t=3.606，P=0.0009；t=3.540，P=0.0010；t=3.246，P=0.0024；t=2.188，P=0.0346；t=5.884，P<0.0001；t=4.559，P<0.0001；t=7.540，P<0.0001；t=11.69，P<0.0001；t=9.602，P<0.0001）。V5600干化學分析儀檢測的41例脂血標本中，經高速離心后，8 項指標（AMY、CK、Ca2+、AST、LDH、Urea、Cr和K+）的檢測結果比較，差異無統計學意義（t=0.6770，P=0.5023；t=0.2535，P=0.8012；t=1.551，P=0.1288；t=0.1019，P=0.9194；t=0.2251，P=0.8230；t=1.402，P=0.1686；t=0.2481，P=0.8053；t=1.033，P=0.8030），而其他 6 項指標（CK-MB、CHE、HCO3-、Glu、Na+、Cl-）的檢測結果比較，差異有統計學意義（t=4.581，P<0.0001；t=2.090，P=0.0430；t=3.466，P=0.0013；t=2.027，P=0.0494；t=4.609，P<0.0001；t=8.236，P<0.0001）。脂血標本在檢測AMY、CK和Ca2+3項指標上，對干、濕化學方法均沒有干擾（P>0.05），但是在檢測 CK-MB、CHE、HCO3-、Na+、Cl-和Glu 6項指標上，對干、濕化學方法均造成干擾（P<0.05）；脂血在檢測 AST、LDH、Urea、Cr和 K+5項指標上，對干化學方法沒有干擾（P>0.05），對濕化學方法造成干擾（P<0.05）。

圖1 高速離心前后檢測結果的比較

3 討論

脂血是臨床檢驗中常見的干擾物[10-11]。脂血的成分主要包括乳糜微粒和三酰甘油，這兩者可影響光的透射和散射，從而對采用比色法或比濁法檢測的生化項目造成較大干擾，導致檢驗結果不準確，是日常生化檢驗工作中最常見的標本影響因素之一，給臨床的診斷、治療及預后造成不利的影響[12]。人們因飲食、某些疾病和服用某些藥物而導致高脂血癥，嚴重的脂血標本在實驗室中并不罕見[9]。近年來，雖然隨著檢驗技術的高速發展、方法學的改進、儀器性能的提高，消除了輕、中脂血對大部分生化指標檢測的干擾，但仍面臨著嚴重脂血干擾檢測的挑戰[13]。據文獻報道可通過標本稀釋法、低溫冷藏法、磷鎢酸-鎂法和聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）法、脂質清除劑、脂質提取法、常溫高速離心法和低溫高速離心法消除脂血對檢測結果的影響[14-19]，而常溫高速離心法操作簡單，對實驗室條件要求不高，結果較為可靠，更適合臨床檢驗實際應用[15]。

關于重度脂血標本干擾干、濕化學方法檢測生化指標的報道不多（僅有一篇），文獻中描述的是脂血標本常規離心后的干、濕化學方法檢測結果的比較分析[20]，是干、濕化學方法上的比較，由于干、濕化學方法在方法上的根本差異，檢測指標的線性范圍可能有所差別，文中得出的結論可能值得進一步討論。不同的是，本研究首次通過觀察高速離心前后脂血標本在干、濕化學檢測結果的差異，比較干、濕化學方法對重度脂血的抗干擾能力，結果顯示，脂血在檢測AMY、CK、Ca2+3項指標上，對干、濕化學方法均沒有干擾（P>0.05），但是在檢測 CK-MB、CHE、HCO3-、Na+、Cl-、Glu 6項指標上，對干、濕化學方法均造成干擾（P<0.05）； 脂血在檢測 AST、LDH、Urea、Cr、K+5 項指標上，對干化學方法沒有干擾（P>0.05），對濕化學方法造成干擾（P<0.05）。以上結果表明，重度脂血在不同的程度上均會干擾干化學和濕化學兩種方法：濕化學方法檢測14項生化指標，11項生化指標受干擾，占比11/14；干化學方法檢測14項生化指標，6項生化指標受干擾，占比6/14；由此可見，在部分檢測指標上（AST、CK-MB、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、K+、Na+和Cl-），干化學方法對重度脂血的抗干擾能力優于濕化學方法。本研究存在的不足為：由于本研究所用的V5600干化學分析儀只開展部分生化指標（AST、CK、CK-MB、AMY、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、Ca2+、K+、Na+和 Cl-）檢測，無法納入更多的生化指標，使分析的結論存在一定的局限性，在后續的研究中考慮納入更多的生化指標。

綜上所述，在部分檢測指標上（AST、CK-MB、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、K+、Na+和 Cl-），干化學方法對重度脂血的抗干擾能力優于濕化學方法，若所測的指標能被重度脂血干擾，建議重度脂血標本經高速離心后再上機檢測，以保證結果的準確性。