帕瑞昔布鈉中鈉元素含量測定

文 /賈曉棟

帕瑞昔布鈉（Parecoxib Sodium）是一種新型的COX-2特異性的抑制劑，由法瑪西亞和輝瑞公司研制，2002年在歐洲獲批上市，商品名為特耐（Dynastat）。帕瑞昔布鈉是COX-2選擇性抑制劑伐地昔布的非活性前體藥物，其化學(xué)名為N-[[4-(5-甲基-3-苯基-4-異惡唑基)苯基]磺?；鵠丙酰胺鈉鹽，分子式為C19H17N2O4S.Na，分子量為392.40，CAS號為198470-85-8，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下圖1：

帕瑞昔布鈉是全球第一個可同時靜脈、肌肉注射用的COX-2抑制劑，其主要作用機(jī)制體現(xiàn)在它能夠抑制COX-2 的活性，抑制前列腺素類合成與釋放，從而發(fā)揮抗炎與鎮(zhèn)痛作用，其對COX-2和COX-1的最小半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為0.005 μmol/L和140 μmol/L，對COX-2的選擇性抑制強(qiáng)度比對COX-1的選擇性抑制作用強(qiáng)2.8萬倍，不會出現(xiàn)像其他NSAIDs會產(chǎn)生嚴(yán)重的胃腸道藥物不良反應(yīng), 如胃黏膜出現(xiàn)潰瘍，出血甚至穿孔[1-2]。帕瑞昔布鈉在臨床上適用于手術(shù)后疼痛的短期治療，主要用于中度或重度術(shù)后急性疼痛的治療，其止痛作用已經(jīng)在口腔科、骨科、婦科等術(shù)后治療中得到了確認(rèn)[3]。同時，手術(shù)后靜脈給藥還可以減少嗎啡的用量，提高術(shù)后鎮(zhèn)痛的質(zhì)量。目前，國內(nèi)對帕瑞昔布鈉原料藥質(zhì)量控制的研究主要包括理化性質(zhì)、含量等指標(biāo)[4]，未見對帕瑞昔布鈉中鈉元素含量控制的報道，為了有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，參考相關(guān)文獻(xiàn)報道[5~8]，采用火焰原子吸收法對帕瑞昔布鈉原料中鈉元素的含量測定方法進(jìn)行了研究，該方法靈敏度、準(zhǔn)確度能夠滿足相關(guān)藥品技術(shù)指導(dǎo)原則的要求，可用于帕瑞昔布鈉的質(zhì)量控制。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

AA6880-FG型原子吸收分光光度計（日本島津），BT-125D型電子天平（德國賽多利斯），鈉空心陰極燈（北京曙光明電子光源儀器有限公司）。

1.2 試劑試藥

氯化銫（光學(xué)級，百靈威科技有限公司），1000μg·mL-1鈉單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心），高純水（電阻率為18.0MΩ，山西德元堂藥業(yè)有限公司），帕瑞昔布鈉對照品（批號20200417，含量99.6%，山西德元堂藥業(yè)有限公司），帕瑞昔布鈉原料藥（批號20201001、20201002、20201003，山西德元堂藥業(yè)有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 儀器參數(shù)

火焰原子化器，檢測波長：589.0nm，燈電流：12mA，狹縫寬度0.2nm，火焰類型：空氣-乙炔，空氣流量：14L/min，乙炔流量：2.0 L/min。

2.2 溶液配制

2.2.1 稀釋劑

取氯化銫約2g，精密稱定，置1000ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品貯備液

精密量取1000μg·mL-1鈉單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液1mL，置10mL量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml，置100mL量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。

綜上所述，在信息技術(shù)的快速發(fā)展下，要從微課制作上入手，關(guān)注學(xué)生的學(xué)習(xí)與發(fā)展，在提升學(xué)生學(xué)習(xí)效果的同時來幫助學(xué)生掌握好重點(diǎn)知識，提高教學(xué)的質(zhì)量，滿足學(xué)生的發(fā)展需求，實(shí)現(xiàn)語文教育的目標(biāo)。

2.2.3 標(biāo)準(zhǔn)品溶液

精密量取標(biāo)準(zhǔn)品貯備液1mL，置100mL量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.4 供試品溶液

取帕瑞昔布鈉適量（約相當(dāng)于鈉元素1mg），精密稱定，置100mL量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，精密量取6mL，置10mL量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 專屬性

取稀釋劑及標(biāo)準(zhǔn)品溶液，分別于589.0nm波長處測定吸光度，具體結(jié)果詳見表1。

表1 專屬性

2.4 線性關(guān)系

精密量取標(biāo)準(zhǔn)品貯備液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL，分別置于不同10mL量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，于589.0nm波長處測定吸光度，并以標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度（C）為橫坐標(biāo)、吸光度（A）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，具體結(jié)果詳見表2及圖2。

表2 線性關(guān)系

2.5 檢測限

按照LOD=3.3δ/S公式計算，式中δ為響應(yīng)值的偏差，S為標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可知，δ= 0.00901，S = 0.7512，確定檢測限為0.031μg·mL-1。

2.6 定量限

按照LOD=10δ/S公式計算，式中δ為響應(yīng)值的偏差，S為標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可知，δ= 0.00901，S = 0.7512，確定定量限為0.094μg·mL-1。

2.7 準(zhǔn)確度

采用三種不同濃度（分別相當(dāng)于80%、100%、120%濃度水平）的供試品，用9份樣品的測定結(jié)果進(jìn)行評價[9]，具體操作為：取帕瑞昔布鈉對照品各適量（約相當(dāng)于鈉元素1mg），共6份，精密稱定，分別用稀釋劑溶解并稀釋制成每1mL約含鈉元素0.6μg的溶液，作為供試液，按上述方法測定，并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算，結(jié)果詳見表3。

表3 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

2.8 重復(fù)性

取帕瑞昔布鈉原料藥適量（約相當(dāng)于鈉元素1mg），各6份，精密稱定，分別用稀釋劑溶解并稀釋制成每1mL約含鈉元素0.6μg的溶液，作為供試品溶液，依上述方法測定，按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算鈉元素含量，結(jié)果詳見表4。

表4 精密度

結(jié)果表明，6份樣品測定結(jié)果RSD為1.90%，重復(fù)性符合相關(guān)規(guī)定，能夠滿足帕瑞昔布鈉中鈉元素含量測定的要求。

2.9 日間精密度

不同人員、不同日期，按重復(fù)性操作方法進(jìn)行測定，結(jié)果詳見表5。

表5 日間精密度

結(jié)果表明，12份樣品測定結(jié)果RSD為1.79%，日間精密度符合相關(guān)規(guī)定，能夠滿足帕瑞昔布鈉中鈉元素含量測定的要求。

2.10 溶液穩(wěn)定性

取標(biāo)準(zhǔn)品溶液及供試品溶液，分別于0、2、4、8、12h時進(jìn)行吸光度考察，結(jié)果表明，對照品溶液及供試品溶液在12h內(nèi)吸光度變化率小于5%，穩(wěn)定性良好，能夠滿足樣品測定的要求，具體結(jié)果詳見表6。

表6 溶液穩(wěn)定性

2.11 樣品測定

依上述原子吸收分光光度法對三批帕瑞昔布鈉樣品進(jìn)行了鈉元素含量測定，結(jié)果表明，三批樣品的鈉元素含量均在理論值的95.0%~105.0%范圍內(nèi)，具體詳見表7。

表7 含量測定

3 討論

據(jù)文獻(xiàn)報道[10]，鈉元素的吸收線主要包括589.0nm、589.5nm及 330.2nm， 其 靈 敏 度 分 別 為 0.001mg·L-1、0.02mg·L-1及2.0mg·L-1，為消除稀釋劑對樣品中鈉的含量測定，在實(shí)驗(yàn)過程中選擇589.0nm作為吸收線。另外，為提供鈉元素吸光度，提高檢測靈敏度，采用貧燃火焰，即空氣-乙炔比大于4:1，同時比較了空氣-乙炔比分別為6:1、7:1、8:1對檢測靈敏度的影響，結(jié)果表明該三種比例氣體對靈敏度無明顯影響，故空氣-乙炔比選擇為7:1。

鈉元素的電離電位為5.139 eV，在火焰中易電離而引起電離干擾現(xiàn)象，為消除電離干擾，一般采用在供試液中加入消電離劑的方式，常用的消電劑有氯化銫和氯化鉀[11]。在本實(shí)驗(yàn)實(shí)際操作中選擇氯化銫作為消電離劑，并比較了不同氯化銫濃度對樣品測定結(jié)果的影響，結(jié)果表明氯化銫濃度在0.1~0.3%范圍內(nèi)對樣品測定結(jié)果無明顯影響，在帕瑞昔布鈉中鈉含量測定方法中氯化銫濃度確定為0.2%。

采用文中確定的原子吸收分光光度法對三批樣品中鈉元素含量測定結(jié)果分別為5.79%、5.89%、5.84%，采用ICP-OES法測定結(jié)果分別為5.73%、5.83%、5.91%，兩種方法檢測結(jié)果基本一致，進(jìn)而說明本法合理、可行，能夠滿足帕瑞昔布鈉原料藥鈉元素含量控制的要求。