荔枝草中一個新的倍半萜

陳小英 劉章彬 蔣小華 霍華珍 李典鵬 于洋

摘 要：? 為了研究荔枝草全草中的倍半萜類化學成分，該文運用大孔吸附樹脂D101、MCI、硅膠和反相HPLC等色譜技術對其進行分離純化，根據HR-ESI-MS、NMR波譜數據鑒定了化合物的結構。結果表明：從荔枝草全草95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分離得到3個桉葉烷型倍半萜類化合物，分別鑒定為8-ethoxy-eudebeiolide B （1）、salplebeone D （2）、salplebeone A （3）。其中，化合物1為新化合物。

關鍵詞： 荔枝草， 倍半萜， 8-ethoxy-eudebeiolide B， salplebeone D， salplebeone A

中圖分類號：? Q946.91

文獻標識碼：? A

文章編號：? 1000-3142（2021）11-1850-05

A new sesquiterpenoid from Salvia plebeia

CHEN Xiaoying1，2， LIU Zhangbin2， JIANG Xiaohua2， HUO Huazhen2， LI Dianpeng2， YU Yang2*

（ 1. College of Pharmacy， Guangxi University of Chinese Medicine， Nanning 530200， China; 2. Guangxi Key Laboratory of Functional Phytochemicals Research and Utilization， Guangxi Institute of Botany， Guangxi Zhuang Autonomous Region and Chinese Academy of Sciences， Guilin 541006， Guangxi， China ）

Abstract：? Three eudesmane-type sesquiterpenoids were isolated from the ethyl acetate layer of 95% ethanol extract of the whole plants of Salvia plebeia by various chromatographic methods， including macroporous resin D101， MCI， silica gel， and reversed-phase HPLC. Their structures were elucidated as 8-ethoxy-eudebeiolide B （1）， salplebeone D （2）， and salplebeone A （3） by using HR-ESI-MS and NMR data， in which Compound 1 is a new compound.

Key words： Salvia plebeia， sesquiterpenoids， 8-ethoxy-eudebeiolide B， salplebeone D， salplebeone A

荔枝草為唇形科鼠尾草屬植物荔枝草（Salvia plebeia）的全草，別名癩子草、癩蛤蟆草等，在我國廣泛分布于除新疆、甘肅、青海、西藏外的其他?。▍^）。全草入藥，在民間用于治療流感、咽喉腫痛、吐血、哮喘、尿道炎等癥（中國科學院中國植物志編委會，1977）。藥理研究表明荔枝草提取物具有多種生物活性，包括抗炎、抗氧化、抗菌、抗病毒和止咳祛痰平喘等作用（馬瑜紅等，2008;張紅霞，2010;楊澤華等，2015;郭秋言等，2018;姜敏等，2019）?；瘜W成分研究主要集中在黃酮、苯丙素、揮發油、萜類化合物（劉慧清等，2013;Jin et al.， 2015;王繼鋒等，2018），尤其是近年來研究人員從荔枝草中分離得到一些具有抗腫瘤和抗炎活性的倍半萜類化合物（Dai et al.， 2014;Jang et al.， 2016;Zhang et al.， 2017;Ma et al.， 2017，2018;Zou et al.， 2018），使荔枝草中倍半萜類化合物的研究日益受到重視。為更深入研究荔枝草化學成分，闡明其化學物質基礎，本研究從荔枝草95%乙醇提取物中分離得到3個桉葉烷型倍半萜類化合物，分別鑒定為8-ethoxy-eudebeiolide B （1）、salplebeone D （2）、salplebeone A （3）。其中，化合物1為新化合物。

1 材料與方法

1.1 材料

荔枝草于2017年12月至2018年2月采摘于河南省，經廣西壯族自治區中國科學院廣西植物研究所唐輝研究員鑒定為唇形科鼠尾草屬荔枝草（Salvia plebeia）。標本（編號20180625-1）保存于廣西植物功能物質研究與利用重點實驗室。

1.2 儀器

全自動數字旋光儀Autopol IV-T（美國魯道夫公司）;紫外可見分光光度計UH 5300（日立高新技術公司）;傅里葉變換紅外光譜儀Nicolet-6700（美國Thermo公司）;Avance 500 MHz核磁共振波譜儀（瑞士Bruker公司）;LC-MS-IT-TOF液相色譜質譜聯用儀（日本Shimadzu公司）;半制備液相色譜儀（北京賽譜銳思公司）;YMC-Pack ODS-A制備HPLC色譜柱（250 mm × 10 mm， S-5 μm， 日本YMC公司）;D101大孔吸附樹脂（天津市海光化工有限公司）;MCI gel CHP20P（日本三菱化學控股株式會社）;薄層色譜硅膠GF254及柱層析硅膠（青島海洋化工有限公司）;高效液相半制備分離所用試劑為色譜純，其他試劑均為分析純，實驗用水為純凈水。

1.3 提取和分離

將干燥的荔枝草（全草）30 kg粉碎后，室溫下用95%乙醇浸泡提取3次，每次7 d，提取液過濾，減壓濃縮得到浸膏2 090 g，將浸膏分散于溫水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮得到浸膏909 g。萃取浸膏經大孔吸附樹脂柱色譜分離，以純水，30%、50%、80%、95%乙醇溶液為流動相進行梯度洗脫，得到5個相應部分（A-E）。D（359.4 g）部分經MCI柱色譜分離，以水-甲醇（100∶0-0∶100）進行梯度洗脫，得到6個部分D1-D6。D4（11.7 g）經正相硅膠柱色譜分離，以石油醚-丙酮（100∶0-0∶100）梯度洗脫，利用TLC檢測合并得到12個部分（D4-1～D4-12）。D4-4（1.0 g）經反相半制備HPLC（40% CH3CN）分離純化得到化合物1（1 mg）。D4-6（2.7 g）經反相半制備HPLC（25% CH3CN）分離純化得到化合物2（14 mg）。D4-7（3.0 g）經反相半制備HPLC（30% CH3CN）分離純化得到化合物3（11 mg）。

2 結果與分析

從荔枝草95%乙醇提取物中分離得到3個桉葉烷型倍半萜類化合物，其中，化合物1為新化合物（圖1），結構鑒定結果如下。

表性的甲基氫信號δH 1.85 （3H， d， J=1.0 Hz）、1.38 （3H， s）、1.21 （3H， d， J=6.8 Hz）。DEPTQ譜顯示其含有17個碳信號，包括4個甲基，3個亞甲基，4個次甲基（包括2個烯碳信號），6個季碳（包括1個酮羰基、1個酯羰基、2個烯碳信號）。其中，2個羰基碳信號與4個烯碳信號組成了1個α，β-不飽和酮（δC 160.9， 126.7， 202.8）與1個α，β-不飽和酮-γ-內酯（δC 160.0， 126.1， 173.4）結構單元，結合以上數據可推測該化合物為桉葉烷型倍半萜內酯（Jang et al.， 2016）?；衔?的波譜數據與eudebeiolide B（Jang et al.， 2016）相似，主要差異僅是在化合物1的NMR譜中多1個乙氧基的共振信號[δH 3.41， m; 3.33， m; 1.19 （3H， d， J=7.0 Hz）; δC 59.9和15.8]，表明化合物1中的乙氧基替換了eudebeiolide B中的羥基。此推斷得到2D-NMR圖譜解析的進一步驗證，在1H-1H COSY譜中，H-2′/H-1′a和H-2′/H-1′b相關（圖2：A）表明乙氧基的存在。在HMBC譜中，H-1′a和H-1′b都與C-8 （δC 107.6）相關（圖2：A）表明乙氧基連接在C-8上。在NOESY譜中，H-4/H-14、H-6α/H-14、H-6α/H-1′b、H-9α/H-14相關（圖2：B）則提示H-4、H-14、8-OCH2CH3處于α方向，而H-5/H-6β、H-5/H-15、H-6β/H-15相關（圖2：B）則提示H-5、H-15處于β方向。因此，化合物1的結構確定為8-ethoxy-eudebeiolide B，是一個新化合物。化合物1的1H-NMR、13C-NMR數據見表1。

化合物2 淡黃色油狀物，HR-ESI-MS m/z： 261.109 6 [M + H]+（計算相對分子質量C15H17O4，261.112 1）。1H-NMR （CDCl3， 500 MHz） δ： 6.10 （1H， s， H-9）， 6.09 （1H， m， H-3）， 4.02 （1H， s， H-1）， 3.07 （1H， dd， J=16.8， 4.1 Hz， H-6β）， 2.95 （1H， m， H-5）， 2.55 （1H， m， H-6α）， 2.06 （3H， t， J=1.3 Hz， H-15）， 1.92 （3H， d， J=1.5 Hz， H-13）， 0.91 （3H， s， H-14）。13C-NMR （CDCl3， 125 MHz） δ： 79.4 （C-1）， 197.9 （C-2）， 125.5 （C-3）， 161.7 （C-4）， 45.9 （C-5）， 22.2 （C-6）， 145.8 （C-7）， 148.8 （C-8）， 113.8 （C-9）， 46.0 （C-10）， 122.4 （C-11）， 170.9 （C-12）， 8.9 （C-13）， 13.7 （C-14）， 22.1 （C-15）。以上數據與文獻（Ma et al.， 2018）基本一致，故鑒定為salplebeone D。

化合物3 淡黃色油狀物，HR-ESI-MS m/z： 303.115 9 [M + H]+（計算相對分子質量C17H19O5，303.122 7）。1H-NMR （CDCl3， 500 MHz） δ： 6.05 （1H， m， H-3）， 5.72 （1H， s， H-9）， 5.26 （1H， s， H-1）， 3.08 （1H， dd， J=17.8， 4.2 Hz， H-6β）， 3.06 （1H， m， H-5）， 2.56 （1H， m， H-6α）， 2.24 （3H， s， H-2′）， 2.04 （3H， t， J=1.3 Hz， H-15）， 1.93 （3H， d， J=1.7 Hz， H-13）， 1.07 （3H， s， H-14）。13C-NMR （CDCl3， 125 MHz） δ：79.9 （C-1）， 191.4 （C-2）， 127.2 （C-3）， 159.2 （C-4）， 46.2 （C-5）， 22.1 （C-6）， 145.4 （C-7）， 149.3 （C-8）， 112.0 （C-9）， 43.7 （C-10）， 122.9 （C-11）， 170.6 （C-12）， 8.9 （C-13）， 15.2 （C-14）， 21.9 （C-15）， 170.3 （C-1′）， 20.8 （C-2′）。以上數據與文獻（Ma et al.， 2017）基本一致，故鑒定為salplebeone A。

3 討論與結論

荔枝草在我國分布廣泛，資源豐富，在產品開發方面具有較好的發展前景（朱吉人等，2017）。該植物的藥理研究主要集中在其提取物方面（王繼鋒等，2018），對單體化合物的藥理研究較少，隨著對荔枝草化學成分和藥理活性的深入研究，越來越多的倍半萜類化合物及其藥理活性被發現。本研究通過對荔枝草95%乙醇提取物中的倍半萜類化學成分進行深入研究，從中獲得3個桉葉烷型倍半萜類化合物。其中，化合物1為新化合物。這3個化合物均為C-8、C-12位成環的桉葉烷型倍半萜內酯。

已有研究表明桉葉烷型倍半萜類化合物具有抗腫瘤（Ma et al.， 2017，2018）、抗炎（Dai et al.， 2014;Jang et al.， 2017;Zou et al.， 2018）等生物活性。其中，化合物2對白血病細胞株pfeiffer增殖有抑制作用（Ma et al.， 2018）。在10 μg·mL-1濃度下，化合物3對白血病細胞株K562、U937、oci-ly1增殖抑制率小于50%（Ma et al.， 2017）。通過對荔枝草中倍半萜類化合物的深入研究，豐富了該植物的化學成分，為進一步開發利用該植物提供了科學依據。

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（責任編輯 何永艷）