饒慶琳,姜 敏, 胡廷會, 成良強, 呂建偉, 王 軍
(貴州省農業科學院 油料研究所,貴州 貴陽 550006)
【研究意義】花生又稱落花生(ArachishypogaeaLinn.),系薔薇目豆科1年生草本植物。其籽粒富含蛋白質和脂肪等營養物質,在油料作物中占有極其重要的地位[1]。目前世界上有100余個國家種植花生,各大洲均有分布[2]。中國的花生年產量占世界花生年總產量40%以上[3]。據FAO數據顯示,作為世界花生種植第一大國,2017年中國花生種植面積達462.79萬hm2,產量達1 715萬t[4]。我國各地均有種植花生,但主要分布在長江流域、黃河流域及華南等地[5]?;ㄉz傳育種研究最基礎的材料就是種質資源,分析、評價不同來源花生種質資源的品質性狀差異,篩選優異種質資源,對花生品種改良、新品種選育及生物技術研究等具有重要意義?!厩叭搜芯窟M展】近年來,許多作物領域先后對作物種質資源品質性狀進行分析與評價,如油菜、小麥、大豆、玉米及蝴蝶蘭等均有相關報道[6-10]。在花生方面,大部分報道集中在農藝性狀方面,而在品質性狀的分析與評價方面相關文獻報道則相對較少。陳雷等[11]運用DPS對17個花生材料的農藝性狀進行相關及聚類分析與選擇評價。牟書靚等[12]對108份花生種質資源的13個主要農藝性狀通過主成分分析法和聚類分析進行評價,最終選擇8個差異水平顯著的性狀進行分析。饒慶琳等[13]采用DPS對498份種質資源農藝性狀進行表型鑒定及綜合評價。徐楊玉等[14]利用近紅外光譜分析技術對100個南方花生區試品種21個品質性狀進行研究,通過主成分分析將其品質性狀綜合為3個主成分進行表達。劉衛星等[15]對24個花生品種的產量與品質性狀進行主成分分析發現,在不同的生態環境中,當單株飽果數的變異系數最大時產量性狀最好;當油酸亞油酸比值的變異系數最大時品質性狀最好。【研究切入點】與前人的研究相比,研究將農藝性狀與品質性狀同時進行分析,能更進一步體現分析的可靠性?!緮M解決的關鍵問題】通過近紅外光譜分析儀測定結合相關性分析、主成分分析和聚類分析法,對不同來源的46份花生種質資源籽粒的水分、油脂、蛋白質、芥酸、油酸、亞油酸及亞麻酸等35個品質性狀進行測定分析,探明不同種質間品質性狀的差異,以期為花生種質資源的利用和品質創新育種提供參考依據。
供試花生種質資源材料共計46份(表1),均由貴州省農業科學院油料研究所提供。

表1 供試材料的基本信息
1.2.1 材料預處理 所有種質資源材料于2017—2019年在貴州省農業科學院試驗基地進行,試驗按種質資源編號依次播種,行長2.5 m,行距40 cm,每行13穴,每穴3粒種子,每個材料種植5行,不設重復,基肥施三元復合肥25 kg/667m2,中耕除草2次,采用常規大田管理。成熟后收獲種子,農藝性狀參考姜慧芳等[16]標準進行,品質特征在種子收獲后6個月內利用近紅外光譜分析儀測定,主要包含花生籽粒中水分、油脂、蛋白質、芥酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸、花生酸、十二碳烯酸甲酯、山崳酸、木焦油酸、十七烷酸甲酯、蔗糖、T糖、果糖、油亞比等品質性狀指標。該研究的數據為近紅外光譜分析儀所測各年數據的平均值。
1.2.2 分析方法 對46份花生種質資源的水分、總糖、油脂、花生酸及硬脂酸等35個品質性狀檢測結果進行變異性、相關性、主成分及系統聚類分析。
數據采用Excel 2010,SPSS 17.0及DPS 21進行數據統計分析。
從表2看出,46份花生種質資源籽粒的35個品質性狀存在差異?;ㄉ蚜5鞍踪|含量和油亞比為21.620%~29.090%和0.867%~1.814%,平均含量為25.603%和1.183%,變異系數為6.444%和18.054%。花生籽粒中脂肪酸的組成有飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸,其中飽和脂肪酸棕櫚酸含量為9.690%~12.840%,平均含量為11.671%,變異系數為5.580%;不飽和脂肪酸油酸和亞油酸含量為35.580%~51.390%和27.950%~41.100%,平均含量為41.268%和35.383%,變異系數為8.707%和8.126%。主莖高和第一側枝長分別為19.000~48.000 cm和29.200~52.200 cm,平均為35.401 cm和52.200 cm,變異系數為17.696%和14.695%。百果重和百仁重分別為118.300~267.100 g和40.000~105.500 g,平均分別為166.602 g和64.733 g,變異系數為17.105%和17.628%。

表2 花生種質資源品質性狀的指標值及變異系數
總體看,花生種質資源的35個品質性狀表現出不同的變異程度,變異系數在1.236%~39.157%,為總糖<油脂<花生酸<硬脂酸<出仁率<棕櫚酸<水分<木焦油酸<蛋白質<十七烷酸甲酯<亞油酸<油酸<山崳酸<果糖<亞麻酸<十二碳烯酸甲酯<棕櫚油酸<果殼率<第一側枝長<蔗糖<500 g果數<百果重<單果重<百仁重<主莖高<油亞比<果殼重<百果仁重<結果枝數<干果重<單株生產力<總分枝數<鮮果重<單株結果數<芥酸,說明供試花生種質中總糖、油脂、花生酸、硬脂酸及出仁粒等指標差異不大,而芥酸、單株結果數鮮果重及總分枝數等指標在不同種質資源中變幅較大。
相關性分析表明,蛋白質與亞油酸(r=0.461**)呈極顯著正相關,與油酸(r=-0.440**)、油亞比(r=-0.437**)呈極顯著負相關;棕櫚酸與亞油酸(r=0.383**)、主莖高(r=0.456**)、第一側枝長(r=0.427**)呈極顯著正相關,與百果重(r=-0.342*)、百仁重(r=-0.327*)呈顯著負相關,與油酸(r=-0.533**)、油亞比(r=-0.501**)呈極顯著負相關;棕櫚油酸與主莖高(r=0.594**)、第一側枝長(r=0.614**)呈極顯著正相關,與亞油酸(r=-0.366*)呈顯著負相關;主莖高與第一側枝長(r=0.923**)呈極顯著正相關,與百仁重(r=-0.339*)呈顯著負相關,與百果重(r=-0.403**)呈極顯著負相關;第一側枝長與百果重(r=-0.461**)、單果重(r=-0.461**)、百仁重(r=-0.394**)呈極顯著負相關;百果重與百仁重(r=0.969**)呈極顯著正相關??梢?,品質性狀與產量性狀呈正相關性或負相關性,在對花生進行評價時,應綜合考慮各方面的性狀指標,為花生遺傳育種提供最基礎的資料。
從圖1看出,通過對46份花生種質資源的35個品質性狀檢測結果進行標準化轉化后進行系統聚類,結果聚為2大類4個小組,其中,在歐氏距離5.80處可將46份不同的花生種質資源分為2個大類,在歐氏距離4.00處,可將46份材料分為4個小組。第1類,包含19025(H15034)、19026(H15035)及19027(H15036)等共24份資源,其特點是山崳酸、木焦油酸、蔗糖、果糖、主莖高、第一側枝長、總分枝數、結果枝數、單株結果數、鮮果重、500g果數及果殼率偏高,其他品質性狀表現偏低;第2類,包含19036(H15049)、19064(H15079)及19129(60702)等共22份資源,其特點是水分、油脂、棕櫚酸、油脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸、總糖、油亞比、干果重及單株生產力等品質性狀偏高,果殼率最低。

圖1 花生種質資源品質性狀的聚類
從表3可知,前4個主成分的累計貢獻率為97.568%,說明其包含了品質性狀中的大部分信息。其中第1主成分特征值為8.170,貢獻率為23.342%,百果重、單果重、百果仁重貢獻值最大,特征向量均為0.326,可視為花生莢果產量因子;第2主成分特征值為4.680,貢獻率為13.371%,鮮果重、干果重、單株生產力的貢獻值最大,特征向量分別是0.372、0.366、0.288,可視為花生鮮果產量因子;第3主成分的特征值1.774,貢獻率為5.070%,總分枝數、結果枝數、十七烷酸甲酯的貢獻最大,特征向量分別是0.506、0.489、0.324,可視為花生分枝因子;第4主成分的特征值為0.238,貢獻率為0.680%,其中水分、第一側枝長、總分枝數貢獻率最大,特征向量分別是0.359、0.341、0.256,可視為花生水分因子。

表3 花生種質資源品質性狀的主成分分析
目前,關于作物種質資源農藝性狀和品質性狀的研究,大部分采用的是相關分析、主成分分析和聚類分析方法進行分析和評價。研究結果表明,46份花生種質資源的35個品質性狀表現出不同的變異程度,變異系數在1.236%~39.157%。孫銘等[17]研究認為,變異系數大于10%則表示樣本間差異較大。該研究共有23個品質性狀的變異系數大于10%,表明花生樣本間品質指標存在較大差異,即說明此次供試的材料存在遺傳多樣性,也從側面突顯出花生的性狀變異較為豐富,類型廣泛,具有很好的利用前景。
相關性分析表明,水分、油脂、蛋白質、芥酸、棕櫚酸、油亞比、油酸、亞油酸、主莖高、第一側枝長及百果重等表現出極顯著相關性。佟仕儉等[18]通過對44份花生資源研究得出,棕櫚酸與油亞比、油酸與油亞比、亞油酸與油亞比呈極顯著關系。遲曉元等[19]通過對花生突變體研究發現,油酸與亞油酸呈極顯著負相關關系。孫泓希等[20]通過對東北地區花生研究發現,主莖高與第一側枝長、百果重與百仁重等存在極顯著相關關系。均與該研究部分結果表現一致。從相關性分析結果看出,不同花生種質資源的33個品質性狀間存在較大的相關性,關聯程度較高,說明,此33個性狀可能存在一定程度的相互影響,因此在今后的品種選育工作中要注重各項指標的綜合考慮[21],避免因某一個指標的缺失影響到后面的育種工作。
主成分分析將35個主要品質性狀綜合為4個主成分,分別為花生莢果產量因子、花生鮮果產量因子、花生分枝因子和花生水分因子,4個主成分因子包含了花生種植資源98.568%的信息。
系統聚類結果顯示,在歐氏距離5.80時,供試材料劃分為2大類,第1大類包含24份資源,第2大類包含22份資源;在歐氏距離4.00處,可將供試材料分為4個小組,相似性系數在4.00~4.650,說明參試品種間差異明顯,很大程度上豐富了花生種質資源的遺傳多樣性。其中,第1大類中篩選到蔗糖含量較高的品種1個,為19032(H15043),該品種可以從鮮食花生方向挖掘;從第2大類中發現油酸含量較高的品種3個,分別為19129(60702)、19170(88-1808)及19173(R-5),高油酸品種是與人類健康相關的理想特征[20],因此,此3個品種可以向高油酸品種方向改良;高產方面,篩選到19435(豫花10號)、19036(H15049)、19192(泉花6號)、19199(粵油551)、19227(桂花26)及19035(H15048)共6個值得繼續研究的材料,在今后的育種工作中,可以作為優良種質資源繼續應用。
作物育種中種質資源是重要基礎性材料。在我國花生種質資源雖然比較廣泛,但是在長期的定向選擇育種過程中,花生栽培品種的遺傳背景變得日益狹窄。通過變異分析、相關性分析、主成分分析和聚類分析等進行綜合評價發現,46份不同花生種質資源的35個品質性狀表現出不同的變異程度,變異系數在1.236%~39.157%,其中有23個品質性狀的變異系數>10%,說明,46份材料存在遺傳多樣性,其性狀變異較為豐富,具有很好的利用前景。其水分、油脂、蛋白質、芥酸、棕櫚酸、油亞比、油酸、亞油酸、主莖高、第一側枝長及百果重等性狀間存在極顯著相關性。35個品質性狀可綜合為花生莢果產量因子、花生鮮果產量因子、花生分枝因子和花生水分因子4個主成分,其包含花生種植資源98.568%的信息。在歐氏距離為5.80時可將46份材料劃分為2大類,第1大類包含24份資源,其中,19032(H15043)為蔗糖含量較高的品種;第2大類包含22份資源,其中,19129(60702)、19170(88-1808)和19173(R-5)為高油酸品種,19435(豫花10號)、19036(H15049)、19192(泉花6號)、19199(粵油551)、19227(桂花26)和19035(H15048)為高產品種。該研究采用的方法能更可靠地分析參試品種,研究結果可為花生種質資源的利用和創新提供理論依據,對花生品種選育和遺傳改良具有重要意義。